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miR-95对结肠癌细胞系SW620侵袭和迁移的影响及机制
目的 探讨小分子非编码RNA-95(miR-95)表达对结肠癌细胞系SW620侵袭、迁移能力的影响及其机制.方法 将miR-95干扰慢病毒转入结肠癌细胞系SW620,用qRT-PCR检测细胞中miR-95表达,用Transwell小室和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;MTT法检测细胞同种、异种细胞黏附能力;用Western印迹检测3组细胞的EMP1,VEGFC和MMP2蛋白表达.结果 SW620转染miR-95干扰慢病毒72 h后,转染率较高;与空病毒组和对照组比较,转染组miR-95的表达降低(P＜0.05);侵袭和迁移能力减弱(P＜0.05);同种黏附能力增强(P＜0.05);异种黏附能力减弱(P＜0.05);同时转染组EMP1蛋白表达明显增高,VEGFC、MMP2蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 miR-95能够促进SW620细胞侵袭和迁移能力,可能是通过EMP1、VEGFC和MMP2实现的.
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肝癌组织EMP1表达生物学意义
目的 探讨上皮膜蛋白(epithelial membrane protein-1,EMP1)在肝癌组织中的表达水平及过表达对肝癌细胞生物表型的影响.方法 采用免疫组织化学方法、蛋白质印迹法检测唐山市人民医院2008-01-01-2012-12-30 65例肝癌组织及35例癌旁肝脏组织中的表达情况(距其癌组织边缘≥2 cm,镜下未见癌浸润).采用慢病毒转染建立EMP1过量表达的肝癌HepG2细胞株.荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测EMP1转染后肝癌HepG2细胞株中EMP1表达含量的变化.MTT法、流式细胞术及Transwell检测EMP1过量表达对肝癌细胞增殖、细胞凋亡及细胞侵袭转移的影响.结果 免疫组织化学结果表明,EMP1蛋白在肝癌组织中的表达阳性率为32.3％(21/65),明显低于癌旁肝脏组织的85.7％(30/35),x2=26.118,P＜0.001.蛋白质印迹法检测结果表明,EMP1蛋白在肝癌组织的表达相对量(0.257±0.022)较癌旁肝脏组织(0.863±0.086)明显降低,两者比较差异有统计学意义,t=11.824,P＜0.001.EMP1蛋白表达水平与肝癌有无淋巴结转移、临床分期、组织分级以及血行转移有关(P＜0.05),而与肝癌患者年龄、性别、病理类型及T分期无关,P值均＞0.05.EMP1高表达的肝癌细胞其增殖能力明显减弱,细胞凋亡及侵袭转移能力明显降低,Caspase9蛋白表达上调,而血管内皮生长因子-C (vascular endothelial growth factor C,VEGFC)与基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白的表达量明显下调,P＜0.05.结论 肝癌组织中EMP1蛋白表达减低,可能通过调控Caspase-9及VEGFC蛋白表达影响肝癌细胞增殖、凋亡与转移的生物学过程.
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EMP1对喉癌hep2细胞增殖、凋亡及迁移的影响
目的 研究EMP1在喉癌中的作用.方法 选取51例喉癌标本及其癌旁组织,构建EMP1过表达载体,转染人喉癌Hep-2细胞系,应用MTT法、克隆形成实验、流式细胞术及Transwe11法分别检测细胞的增殖、凋亡及迁移情况,明确EMP1过表达后对喉癌细胞产生的生物学效应.结果 EMP1过表达后,Hep2细胞的增殖能力明显减弱,细胞克隆形成数目平均值明显减少,细胞的凋亡率平均值明显上调,穿过小室滤膜的细胞数平均值明显下调.即喉癌细胞的增殖能力及迁移能力减弱,凋亡增强.结论 EMP1基因在喉癌的发生发展中发挥抑癌基因的作用.
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鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中EMP1、COX-2及Stathmin蛋白表达与上皮化生程度的关系
目的 检测鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中上皮细胞膜蛋白1(EMP1)、环氧化酶2(COX?2)及Stathmin蛋白的表达情况,分析其与上皮化生程度的相关性.方法 选取2015年1月～2016年3月在本院就诊的鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者28例作为实验组,20例肥厚性鼻炎患者的下鼻甲黏膜组织作为对照组,采用免疫组化技术和qRT?PCR检测鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤、下鼻甲黏膜组织EMP1、COX?2以及Stathmin的表达情况,并比较三种因子在不同组织中的表达情况.结果 实验组EMP1蛋白表达的阳性率显著低于对照组(P<0.05),COX?2及Stathmin蛋白表达的阳性率显著高于对照组(P<0.05).实验组EMP1的mRNA水平显著低于对照组(P<0.05),COX?2及Stathmin mRNA水平显著高于对照组(P<0.05).EMP1蛋白表达水平与上皮化生的严重程度呈负相关,COX?2及Stathmin蛋白表达水平与上皮化生的严重程度呈正相关.结论 鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中EMP1、COX?2及Stathmin蛋白的异常表达与上皮化生程度有关,联合检测EMP1、COX?2及Stathmin蛋白表达可评估鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤上皮异常重塑情况.
关键词： 鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤 EMP1 COX?2 Stathmin 上皮化生
