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内皮素1和血管紧张素Ⅱ对大鼠肝细胞核核苷三磷酸酶活性的影响
核被膜核苷三磷酸酶(nucleoside triphosphatase, NTPase)为通过细胞核孔复合体转运mRNA的限速酶.本实验探讨内皮素1(ET-1)和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)对大鼠肝细胞核NTPase 活性的影响.体外分离的大鼠肝细胞核与ET-1 或 Ang Ⅱ单独或分别与ET-1的ETA 受体拮抗剂JKC301、 ETB 受体拮抗剂BQ788或AngⅡ的AT1 受体拮抗剂 Losartan、AT2 拮抗剂 PD123177共同孵育肝细胞核,分别测定ATP 和 GTP作底物时,肝细胞核NTPase活性.结果发现ATP 和 GTP作底物时, ET-1 (10-11～10-9 mol/L)或Ang Ⅱ (10-11～10-9 mol/L)孵育肝细胞核均浓度依赖地增强其NTPase 活性(均P＜0.01),ET-1和AngⅡ对NTPase的刺激作用可分别被JKC301(10-6mol/L)和Losartan (10-6mol/L) 阻断(P＜0.01).ET-1和 Ang Ⅱ共同孵育后,核NTPase活性与ET-1或Ang Ⅱ单独孵育相比显著增加(均P＜0.01).结果表明:ET-1和Ang Ⅱ可分别通过ETA 和 AT1 受体刺激肝细胞核NTPase活性.
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牛磺酸对次氯酸诱导的大鼠肝细胞核核苷三磷酸酶损伤的保护作用
目的探讨牛磺酸对次氯酸(hypochlorous acid,HOCl)诱导的大鼠肝细胞核核苷三磷酸酶(NTPase)损伤的保护作用.方法体外分离大鼠肝细胞核,用HOCl单独或与牛磺酸共同孵育,分别以ATP和GTP作底物检测核NTPase的活性.结果 ATP和GTP作底物时,HOCl(1×10-9～5×10-6 mol*L-1)以浓度依赖的方式抑制NTPase活性.牛磺酸(1×10-6～1×10-4 mol*L-1)可显著拮抗HOCl(1×10-6 mol*L-1)导致的NTPase活性降低.另外,牛磺酸(1×10-6～1×10-4 mol*L-1)单独孵育肝细胞核,对NTPase有轻度刺激作用.结论牛磺酸可浓度依赖地拮抗HOCl诱导的肝细胞核NTPase活性下降,此作用可能是其保护机制之一.
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血管内膜增生过程中核酸代谢相关酶活性变化的研究
目的和方法:应用血管内皮剥脱后再狭窄模型,动态观察胸腹主动脉壁核膜核苷三磷酸酶及核酸代谢和糖代谢相关酶5'-核苷酸酶、腺苷脱氨酶和琥珀酸脱氢酶活性的变化.探讨其与血管平滑肌细胞增生和新生内膜形成的关系.结果:血管内皮剥脱后,胸腹主动脉壁核膜核苷三磷酸酶活性持续升高,与血管内膜增厚程度相平行;血管平滑肌细胞收缩型标志蛋白α-肌动蛋白表达降低及合成型标志蛋白骨桥蛋白表达上调,说明血管平滑肌细胞发生了表型转化,由分化型转变成为去分化型;5'核苷酸酶、腺苷脱氨酶和琥珀酸脱氢酶活性表现为先升后降,三种酶活性均于血管平滑肌细胞增殖旺盛期(术后3～7 d)达峰值.结论:细胞内参与mRNA转运及糖、核酸代谢的一系列酶活性的变化是新生内膜形成的生化基础.
