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槲皮素对小鼠体内和体外NIH-3T3细胞的抗氧化作用及其机理
目的 比较槲皮素对小鼠体内和体外H2O2处理前/后的NIH-3T3细胞抗氧化效应的差异并探讨其作用机理.方法 将NIH-3T3细胞分为4组,槲皮素前保护组(Qb)、槲皮素后保护组(Qa)、H2O2组(H2O2)和对照组(C).用试剂盒检测细胞内T-AOC、SOD、GSH-Px、GSH、MDA、NOS和NO2-/NO3-的水平;MTT和TUNEL法检测细胞凋亡率和生存率;免疫印迹和免疫组化技术检测细胞的cyclin D1、PTEN、NF-kB、HSP-70、BCl-2、BAX、及caspase-3的表达.另将20只Wistar大鼠等分为对照组和实验组,检测槲皮素灌胃前、后1、2及24 h血浆内T-AOC、SOD、GSH-Px、GSH、MDA、NOS和NO2-/NO3-的水平.结果 H2O2组细胞凋亡率增高,cyclin D1、mN及BCl-2的表达下调;BAX、HSP-70、NF-kB及caspase-3的表达上调;T-AOC,SOD,GSH-Px及GSH水平降低,NOS、NO2<'-./NO3-及MDA增高.动物灌胃后1 h、2 h血浆中T-AOC、SOD、GSH-Px、GSH,NOS及NO2-/NO3-的水平增高,MDA降低;24 h后基本恢复.结论 槲皮素在体内外皆可通过调节抗氧化酶体系发挥抗氧化作用,其效应依据H2O2处理与否和处理前/后等细胞的异质性而呈现一定差异.
关键词： 槲皮素 H2O2氧化应激 抗凋亡信号传导 NIH-3T3细胞系 抗氧化酶体系 -
维生素E在体内外具有抗氧化作用
目的 探讨维生素E在体内外的应激损伤.方法 体外实验:人肝RBL细胞系根据H2O2损伤及损伤前后给予维生素E分为4组,对照组(C)、H2O2损伤组(Ec)、H2O2损伤前(Eb)及后(Ea)给维生素E组;体内实验:将20只清洁级雄性Wistar大鼠分为对照组和大及小剂量维生素E组,每天进行一次35和15 mg/kg溶液2 mL灌胃,连续3d.体外实验应用MTT和TUNEL法检测细胞存活率和凋亡率,免疫印迹和免疫组化方法检测细胞中NF-κB、Hsp-70、Bcl-2、Bax及caspase-3的表达水平;体内实验应用生化法检测3和6d后血浆内T-AOC、SOD、GSH和MDA的水平.结果 H2O2损伤组(Ec)细胞凋亡率增加(P＜0.01),细胞内Bax、Hsp-70、NF-κB及caspase-3显著升高(P＜0.01),而Bcl-2显著下降(P＜0.01),维生素E干预后能显著缓解上述变化(P＜0.01),H2O2损伤前干预效果优于后干预.灌胃后3d血浆中T-AOC、SOD、GSH的水平增高,MDA降低(P＜0.01),6d后其相关指标变化更加显著(P＜0.05).结论 维生素E可通过调节人肝RBL细胞相关蛋白表达水平和Wistar大鼠血浆中抗氧化酶体系而发挥抗氧化作用.
