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131Ⅰ-SAP的制备及应用安全性研究
目的 探讨一种新型淀粉样变性诊断标记物131 Ⅰ-SAP的制备方法及其应用安全性.方法 应用Iodogen法对SAP标准品进行131Ⅰ标记；纸层析法测定131 Ⅰ-SAP的标记率与放射化学纯度.将131Ⅰ-SAP分别于4℃和37℃新鲜人血清中0h,24h,48h,72h和96h,测定放射化学纯度,评价其体外稳定性.对131Ⅰ-SAP进行热原、异常毒性等安全性实验.结果 131Ⅰ-SAP的标记率为70.6％,96h后的放射化学纯度仍大于90％.热原、异常毒性实验均为阴性.结论 131Ⅰ-SAP具有较好的体外稳定性,并且无热原及明显毒性反应,适合进一步临床实验及应用的安全性.
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肝素结合蛋白和正五聚蛋白3在新生儿细菌感染性疾病诊断中的价值
目的 探讨肝素结合蛋白(HBP)和正五聚蛋白3(PTX3)对新生儿细菌感染性疾病的临床诊断价值.方法 采用回顾性分析方法,选取2017年3月至11月武汉大学人民医院新生儿科30例新生儿脓毒症(脓毒症组)、84例局部细菌感染新生儿(一般感染组)及50例单纯高胆红素血症新生儿(对照组).一般感染组和脓毒症组的114例细菌感染新生儿中,有39例合并休克(休克组),75例未合并休克(非休克组).分别采用免疫比浊法和双位点夹心酶联免疫吸附实验测定HBP和PTX3水平,并收集血清降钙素原(PCT)及全血白细胞(WBC)计数等实验室检查数据.非正态分布数据的比较采用非参数检验,各指标诊断性能比较采用受试者工作特征曲线(ROC),各指标相关性分析采用Pearson相关系数.结果 脓毒症组、一般感染组和对照组HBP值分别为(64.41±78.51)ng/ml、(47.16±50.59)ng/ml、(31.97±20.76)ng/ml,PTX3值分别为(2.23±1.44)ng/ml、(1.76±0.94)ng/ml、(1.26±0.66)ng/ml,PCT值分别为(31.92±36.65)ng/ml、(7.72±9.28)ng/ml、(1.87±5.02)ng/ml.脓毒症组PTX3、PCT水平显著高于一般感染组(Z=3.74,Z=5.01,P均<0.05);也显著高于对照组(Z=3.98,Z=5.20,P均<0.05).脓毒症组HBP水平高于一般感染组,但差异无统计学意义(Z=1.16,P>0.05);也高于对照组,差异有统计学意义(Z=2.37,P<0.05).休克组PTX3和PCT水平显著高于非休克组(Z=2.20,Z=3.70,P均<0.05);休克组HBP水平高于非休克组,但差异无统计学意义(Z=0.37,P>0.05).HBP、PTX3、PCT诊断新生儿细菌感染性疾病曲线下面积(AUC)分别为0.683、0.802、0.869;HBP、PTX3、PCT三者联合诊断优于单指标诊断,AUC大为0.910.PTX3与PCT呈正相关(r=0.242,P<0.05).结论 PTX3和PCT能有效辅助临床诊断新生儿细菌感染性疾病,联合PTX3、PCT和HBP诊断优于单指标诊断.
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胎盘组织中五聚素3的表达及其与重度子痫前期发病的关系
目的 探讨重度子痫前期孕妇胎盘组织中五聚素3(PTX3)的表达及其与重度子痫前期发病的关系.方法 选择2010年10月至2011年3月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的孕妇53例,其中重度子痫前期孕妇23例为子痫前期组,足月择期行剖宫产的健康孕妇30例为对照组.采用免疫组化SP法检测PTX3蛋白在胎盘组织中的表达部位,分别采用实时荧光定量PCR技术和蛋白印迹法检测两组孕妇胎盘组织中PTX3 mRNA和蛋白的表达水平.结果 (1)胎盘组织中PTX3的表达部位:子痫前期组和对照组胎盘组织巾均有PTX3蛋白的表达,且表达部位基本一致,主要表达于血管周围间质、蜕膜细胞及终末绒毛中.子痫前期组胎盘组织中可见中性粒细胞的浸润.(2)胎盘组织中PTX3 mRNA及蛋白的表达水平:子痫前期组孕妇胎盘组织中PTX3mRNA的表达水平为1.98±0.54,对照组为0.87±0.27,子痫前期组PTX3 mRNA表达水平高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).子痫前期组孕妇胎盘组织中PTX3蛋白的表达水平为1.42±0.29,对照组为0.56±0.25,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PTX3在重度子痫前期孕妇胎盘组织巾呈高表达,可能与重度子痫前期的发病有关.
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血清淀粉样P物质对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的影响
目的 研究血清淀粉样P物质(SAP)对血清对氧磷酶1(PON1)活性、炎症因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及ApoE/-小鼠动脉粥样硬化发生发展的影响,探讨SAP调节动脉粥样硬化的可能机制.方法 C57/BL6雄性小鼠6只为正常组,予普通饮食喂养;雄性ApoE-/-小鼠12只高脂饲料喂养12周,随机分为SAP组和PBS组,每组各6只,SAP组予腹腔注射SAP(6mg/g),隔天1次,共14d,PBS组予腹腔注射PBS(6mg/g),隔天1次,共14d.第16周时收集各组血液及动脉标本,检测小鼠血清血脂4项和PON1活性,ELISA检测血清SAP和MCP-1水平,HE染色观察动脉斑块大小,油红O染色观察斑块内脂质沉积情况,免疫组化检测斑块内SAP的表达.结果 与正常组相比,PBS组和SAP组小鼠血清PON1活性明显下降(P＜0.01),MCP-1水平明显增高(P＜0.01),血管内大量斑块形成;与PBS组相比,SAP组小鼠血清PON1活性增高(P=0.046),MCP-1水平明显下降(P=0.032),血管内斑块面积减少(P=0.001),斑块内油红O阳性脂肪细胞数量减少(P=0.03).结论 SAP可能通过提高PON1活性、降低MCP-1水平而延缓动脉粥样硬化的发生发展.
关键词： 血清淀粉样P成分 动脉粥样硬化 对氧磷酶1 单核细胞趋化蛋白-1 -
血清淀粉样P成分的DNA结合特性
目的检测血清淀粉样P成分(SAP)与不同DNA的结合活性并研究SAP与DNA的结合是否有利于此类抗原的清除,探讨它在SLE发生发展中的作用及意义.方法用亲和层析和凝胶过滤方法自小鼠和人血清中纯化SAP,分别提取来自细菌、质粒、酵母、小鼠淋巴细胞等不同DNA,用DOT-EIA方法检测SAP与它们的结合活性,用巨噬细胞吞噬实验观察SAP与DNA结合后对DNA清除的影响.结果人和小鼠SAP均与细菌DNA结合强,其次为质粒、酵母DNA,与淋巴细胞DNA和小牛胸腺DNA的结合较弱,与单链λDNA结合弱;与来源于活化状态小鼠淋巴细胞DNA的结合力高于非活化状态;SAP与活化淋巴细胞DNA结合后可促进巨噬细胞对DNA的吞噬.结论SAP与不同DNA结合活性各异.
