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重组细胞高产型H3N2猪流感病毒株的拯救
为拯救出一株能够在动物传代细胞中高水平复制的H3N2亚型猪流感疫苗株,利用反向遗传操作技术,将A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)毒株的PB1、PA、NP、M、NS基因和A/PR/8/34毒株的PB2基因作为内部基因与猪流感病毒A/Swine/Henan/S4/01(H3N2)毒株的HA、NA基因进行重组,成功拯救出了具有高度细胞适应性毒株rH3N2株,该毒株接毒MDCK细胞60h后,血凝价可以达到1:512,表明该毒株具有高度适应细胞繁殖特性,为H3N2亚型猪流感病毒细胞培养型疫苗的研制奠定了基础.
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用8质粒病毒拯救系统产生H9N2/WSN重组A型流行性感冒病毒
把禽流行性感冒(流感)病毒A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因cDNA克隆至polⅠ-polⅡ双向转录和表达载体pHW2000,用这两种质粒与8质粒病毒拯救系统中流感病毒A/WSN/33(H1N1)6个内部基因eDNA的质粒组合(6+2重排),共转染COS-1细胞,产生了能在鸡胚中高滴度增殖的H9N2/WSN重组病毒.用A/WSN/33的8个基因cDNA质粒作对照,也产生了转染子病毒.经过EID50测定和MDCK 感染实验,新基因型H9N2/WSN病毒感染鸡胚的能力强(EID50为10-11/0.2ml),而且对鸡胚的毒力弱,在不加胰酶的情况下不使MDCK细胞产生病变.经电镜观察,两个转染子病毒的形态与野生型流感病毒相似.反向遗传操作技术的建立,为对禽流感病毒基因功能和疫苗构建等方面的研究提供了新的手段.
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H5N1禽流感疫苗的研究进展
在亚洲、欧洲、非洲,高致病性禽流感(H5N1株)不断的在家禽和迁徙鸟类中爆发,近人类在感染这种高致病禽流感(HPAI)病毒和因HPAI病毒的病死率都在增加,暗示着流感大流行仍威胁着人类,诸如神经氨酸酶抑制剂等抗病毒药对预防和治疗H5N1感染是有价值的.但供应有限和耐药性限制其发展.疫苗作为控制流感大流行的一种主要手段,受到各个国家的重视.因此,发展H5N1疫苗被认为是主要的策略,保护人类避免一个可能的H5N1的流感大流行大体上建立的普通人流感疫苗的原则也被应用到大流行H5N1的流感疫苗的发展上.但是,发展H5N1疫苗也存在一些实际和科学上的挑战[1～3].
