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长柱重楼中主要甾体皂苷类成分的定性定量分析
为了从化学成分上研究长柱重楼是否具有重楼药材代用品的开发价值,该研究利用UPLC-Q-TOF MS比较了长柱重楼和滇重楼的化学成分,并进一步利用HPLC-UV同时测定了77株不同来源的长柱重楼中8种重楼皂苷的含量.结果显示长柱重楼和滇重楼的化学成分相似,长柱重楼化学成分更为复杂,鉴定的22个主要共有峰均为甾体类化合物.不同株长柱重楼中重楼皂苷的含量具有一定的差异,其中药典规定4种甾体皂苷(重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ)总量高的为3.30％,低的为0.068％,8种甾体皂苷总量高的为6.18％,低的为0.71％.长柱重楼中78％的样品符合《中国药典》要求,整体质量较为稳定,可以作为重楼替代品种进行研究开发.
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重楼同属植物长柱重楼与药用重楼的药效学对比研究
重楼为多种中成药的原料,由于市场需求量大幅增长,野生重楼资源日益减少,人工栽培生长缓慢,导致重楼资源紧缺.该研究比较了重楼同属植物长柱重楼和药典收载的云南重楼、七叶一枝花在镇痛、抗炎、止血方面的药理活性,以其扩大重楼药用资源范围,保护重楼野生资源,满足市场需求.该实验研究表明长柱重楼和云南重楼、七叶一枝花均具有镇痛、抗炎、止血作用,可明显降低醋酸致小鼠扭体次数,抑制角叉菜胶致大鼠足肿胀和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高,缩短出血时间和凝血时间,且长柱重楼与云南重楼、七叶一枝花的镇痛、抗炎、止血作用相当.
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长柱重楼总皂苷体外抗肿瘤活性及毒性研究
目的 研究长柱重楼总皂苷(PCT3)体外抗肿瘤活性及毒性.方法 用改良二甲基四氮唑盐法检测PCT3、顺铂对人肺癌细胞株(A-549)和人肝癌细胞株(HEPG-2)的增殖抑制作用.小鼠一次性腹腔注射52,74,105,150mg·kg-1 PCT3,检测PCT3的半数致死量(LD50),并观察肝组织病理切片的变化,用比色法测定PCT3的溶血作用.结果 PCT3对A-549和HEPG-2细胞增殖抑制的半数抑制浓度(IC50)分别为11.71和2.36 μg·mL-1,顺铂对A-549和HEPG-2细胞增殖抑制的IC50分别为6.31和5.33 μg·mL-1.PCT3对小鼠的LD50为92.40 mg·kg-1,其对动物的整体健康状态有一定的影响,具有一定的肝毒性.PCT3的溶血率随着浓度的增加而增加,其溶血的半数有效量为4.31 μg·mL-1.结论 PCT3对人癌细胞株A-549和HEPG-2细胞的增殖均有较强的抑制作用,对HEPG-2细胞的增殖抑制作用强于A-549细胞.同时,PCT3有一定的肝毒性和溶血活性,其溶血活性与细胞毒活性有较明显的相关性.
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基于HPLC指纹图谱鉴别云南重楼和长柱重楼
目的 通过HPLC指纹图谱鉴定云南重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.) Hand.-Mazz和长柱重楼Parisforrestii (Takht.)H.Li..方法 建立20批样品的HPLC指纹图谱,SPSS19.0软件进行聚类分析和主成分分析.结果 云南重楼与长柱重楼HPLC指纹图谱的相似度分别为0.905 ～0.998和0.905～0.986,聚类分析与主成分分析均可将两者明显区分开.结论 该方法专属性强、准确度高,可用于重楼属植物的品种鉴定及质量控制.
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长柱重楼形态描述补充及其皂苷类成分特征
报道了长柱重楼的资源分布并对其形态描述进行补充.首次对长柱重楼皂苷类成分进行含量测定,主要含薯蓣皂苷,为长柱重楼的进一步开发利用提供了研究基础.
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改良CTAB法提取重楼属3种药用植物干燥根茎DNA
目的:本研究采用改良CTAB法提取重楼属3种植物的DNA,分析了CTAB浓度对其DNA得率以及醋酸钾(KAc)或KAc+ 20％乙醇对其DNA纯度的影响,为重楼属植物药材的分子标记鉴定研究提供技术和理论依据.方法:采用基于CTAB的6种方法提取重楼属3种植物干燥根茎的DNA,并用紫外分光光度法测定A.和A280的值计算评价DNA得率和纯度.结果:4％ CTAB提取3种重楼的DNA得率均高于2％ CTAB;添加KAc的方法2(2％ CTAB)、方法5(4％ CTAB)以及添加KAc+ 20％乙醇的方法3(2％ CTAB)和方法6(4％ CTAB)提取的DNA纯度和质量以及通用引物ITS2F/ITS2R的PCR扩增结果均优于不添加KAc或KAc+ 20％乙醇的方法1和方法4.结论:本研究表明4％ CTAB有利于重楼属3种植物干燥根茎DNA得率的提高,在DNA沉淀之前添加KAc或KAc+20％乙醇有利于改善DNA纯度和质量.
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长柱重楼总皂苷的抗肿瘤活性及急性毒性作用研究
目的 研究长柱重楼总皂苷(PCT3)的体内外抗肿瘤活性及ig一次性给药的急性毒性.方法 采用改良MTT法检测PCT3对人结直肠癌(HCT-116)细胞和人胃癌(SGC-7901)细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC50).ig一次性给予小鼠1.646、2.352、3.360、4.800 g/kg PCT3进行急性毒性测试.建立小鼠皮下肝癌(H22)模型,分别ip顺铂2 mg/kg(阳性对照)、生理盐水(阴性对照);ig给予0.5％ CMC-Na(溶剂对照)、30、90、270 mg/kg PCT3,连续给药9d,检测小鼠肿瘤、体质量抑制率,肝、脾、肾、胸腺系数.结果 与阴性对照组比较,PCT3对HCT-116和SGC-7901细胞增殖有明显的抑制作用(P＜0.05、0.01),IC50分别为7.6、5.9.μg/mL.大剂量PCT3可致动物腹泻及活动抑制,半数致死量(LD50)为1.985 5 mg/kg.与溶剂对照组比较,PCT3对小鼠体质量无显著影响;270 mg/kg PCT3对H22肿瘤发挥显著抑制作用(P＜0.05),抑制率为26.8％;对各脏器系数均无显著影响;与阴性对照组比较,顺铂显著抑制肿瘤和体质量的增长(P＜0.01),抑制率分别达81.4％和37.4％;对肝脏、脾脏、胸腺系数均发挥显著抑制作用(P＜0.05、0.01).结论 顺铂抑瘤率明显高于PCT3,但其显著抑制小鼠的体质量和肝脏、脾脏、胸腺系数,PCT3在体内外具有一定的抗肿瘤活性,且毒性较低,其活性及作用机制有待进一步研究.
