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金钱松内生真菌JJ18杀螺作用实验研究
目的:研究金钱松内生真菌JJ18的杀螺作用、活性部位及该菌株杀螺活性的传代稳定性,从而探索其应用的可能性.方法:按照WHO的杀螺剂浸泡试验法观察不同处理下JJ18发酵液杀螺效果.结果:JJ18菌株发酵液的活性成分集中在胞外液,当胞外液浓度10%时,72h杀螺率接近90%,且发酵外液成盐后有良好的耐热性,强光照下7 d内活性物质基本不改变,菌株传代稳定,杀螺活性成分集中在正丁醇萃取部位.结论:金钱松内生真菌JJ18代谢产物的杀螺活性,有开发应用的可能性.
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八氯二丙醚和杀虫丁复方杀螺作用的效果观察
目的观察杀虫丁与八氯二丙醚复方灭螺效果. 方法用不同浓度的杀虫丁与不同浓度的八氯二丙醚复配,进行浸杀灭螺试验,求得佳复方后进行喷洒灭螺试验. 结果 0.4 mg/L杀虫丁与4.0 mg/L八氯二丙醚复方浸杀钉螺,24 h增效71%,48 h增效73%;与0.6 mg/L八氯二丙醚复方浸杀钉螺,24 h增效57%,48 h增效60%.0.2 mg/L杀虫丁与2.0 mg/L八氯二丙醚复方浸杀钉螺,24 h增效259%,48 h增效233%;与 3.0 mg/L八氯二丙醚复方浸杀钉螺,24 h增效279%,48 h增效250%. 0.1 mg/L杀虫丁与1.0 mg/L八氯二丙醚复方浸杀螺,24 h增效367%,48 h增效219%.0.4 g/m2杀虫丁与4.0 g/m2八氯二丙醚复方喷洒杀螺,24 h增效33%,48 h增效24%. 结论八氯二丙醚对杀虫丁杀灭钉螺有增效作用,其中以10倍以上剂量复方杀螺作用为明显.
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金钱松内生真菌JJ18灭螺活性与菌株鉴定
目的 研究金钱松内生真菌JJ18发酵液醇提物杀螺活性和对湖北钉螺糖原和总蛋白的生理生化影响,并进行菌株鉴定.方法 按照世界卫生组织(WHO)的杀螺剂浸泡试验法观察不同浓度下JJ18发酵液提取物的灭螺效果,采用蒽酮显色法测定处理后钉螺软体的糖原含量变化,凯氏定氮法测定其蛋白质含量.采用核糖体rDNA ITS区序列分析进行鉴定,并进行系统进化分析.结果 JJ18菌株发酵液醇提物灭螺效果显著,试验浓度400 mg/L作用3 d后灭螺率达到100%,与1 mg/L氯硝柳胺溶液处理2～3 d的灭螺效果相当;经统计分析:72 h灭螺的LC50和LC90浓度分别为145.0和311.9 mg/L.JJ18发酵液醇提物处理后钉螺软体的糖原含量显著下降,减少幅度从10.42%～28.03%;蛋白质含量的变化不明显.鉴定该菌为黑曲霉.结论 金钱松内生真菌JJ18代谢产物的杀螺活性有开发应用的可能性,显示了植物内生真菌是筛选新型灭螺药物的重要资源.
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具有灭螺活性的金钱松内生真菌JJ18发酵条件优化
目的 通过改进发酵工艺提高金钱松内生真菌JJ18的杀螺活性.方法 采用单因素和正交试验对发酵培养基及发酵条件进行优化.按照 WHO 的杀螺剂浸泡试验法,以杀螺率为主要衡量指标,同时考察发酵液的生物量.对金钱松内生真菌 JJ18 发酵条件进行优化.结果 以马铃薯175g/L为氮源,初始 pH 值6.0,葡萄糖和蔗糖15 g/L为碳源,磷酸二氢钾0.5mmol/L 为代谢调节因子,接种量 2%,250 ml三角瓶装液量50ml,温度30℃,120 r/min,发酵7 d,杀螺活性大提高16.7%.生物量与杀螺率存在一定的相关性.结论 通过改变发酵工艺可以提高杀螺活性,金钱松内生真菌 JJ18 具有开发应用的潜力.
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金钱松内生真菌杀螺活性菌株筛选
目的 筛选出对钉螺具有致死作用的金钱松内生真菌菌株,并进行形态学初步鉴定.方法 从药用植物金钱松的18株内生真菌中,按照WHO的杀螺剂浸泡试验法观察不同内生真菌以及不同浓度发酵液杀螺效果,并采用玻片培养法进行真菌鉴定.结果 JJ18菌株发酵液的中和液(pH=7)有较高的杀螺效果,24 h钉螺死亡率达26.7%,48 h达76.7%,72 h达100.0%.发酵液浓度为5%时,钉螺死亡率为53.3%;浓度为10%时,钉螺死亡率为86.7%.其杀螺活性成分主要是发酵液的细胞外产物,且对鱼无急性毒性.通过鉴定该菌属于曲霉属.结论 金钱松内生真菌JJ18细胞外产物具有一定的杀螺效果,可作为筛选新型杀螺药物的资源.
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中药蛇床子提取液杀灭钉螺的活性成分研究
目的探讨中药蛇床子中具有显著杀螺活性的化学成分及其杀螺效果.方法采用渗漉法以50%乙醇为溶媒提取生药蛇床子,经硅胶柱层析梯度洗脱得到其化学成分,经理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构.并将其配制成不同浓度的溶液作浸杀钉螺试验,观察钉螺死亡率.结果经过其熔点测定和光谱分析鉴定所得到的2个化合物分别为蛇床子素和佛手柑内酯,均为香豆素类化合物.杀螺试验表明这2个化合物均显示了较强的杀灭钉螺的活性.结论证实了蛇床子中香豆素类化学成分为杀螺的活性成分.
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垂序商陆叶灭螺活性及其毒性的初步研究
目的 探讨垂序商陆叶杀灭钉螺效果、对钉螺糖原的影响及其对斑马鱼的急性毒性.方法 用系统分离法分离垂序商陆叶的各极性部位,采用WHO推荐的"杀螺剂实验室终筛法"中的浸泡法进行浸杀灭螺试验,筛选垂序商陆叶的灭螺活性部位;用蒽酮比色法测定灭螺活性部位对钉螺糖原的影响;测定垂序商陆叶极性部位对斑马鱼的急性毒性.结果 垂序商陆叶灭螺活性部位集中在乙酸乙酯极性部位,对钉螺48 h LC_50和LC_90值分别为6.0 mg/100 ml和26.1 mg/100 ml;垂序商陆叶乙酸乙酯极性部位可使钉螺糖原含量降低20%;在近LC_50浓度(48 h)的垂序商陆叶乙酸乙酯极性部位作用下,斑马鱼可存活12 h.结论 垂序商陆叶乙酸乙酯极性部位有较好的灭螺效果,但对斑马鱼有较强的急性毒性.
