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香豆素类成分在球花石斛Dendrobium thyrsiflorum 叶和根中的分布与动态变化
目的:探讨球花石斛Dendrobium thyrsiflorum不同生长发育时期叶和根中香豆素类(coumarins)成分的分布与动态变化,为充分利用药用石斛资源提供实验依据.方法:采集球花石斛营养生长期和生殖生长期的叶、根,利用激光共聚焦显微技术观察、分析其所含香豆素类成分.结果:球花石斛的叶除叶脉近上、下表皮处的维管束纤维群外,其他部位均有香豆素类成分的存在;球花石斛根的各部位均有香豆素类成分存在,尤其在皮层以内细胞的壁和壁内周.球花石斛叶、根的香豆素类成分的相对含量在生殖生长中的盛花期均高于营养生长期;在生殖生长进入始果期二者均几无香豆素类成分分布.结论:为充分利用药用植物,可从球花石斛的叶、根中提取香豆素类成分.
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球花石斛茎中香豆素类成分的定位与相对定量
目的探讨不同生长年限、不同部位球花石斛(Dendrobium thyrsiflorum Rchb.f.)茎中香豆素类(coumarins)成分的分布与相对含量变化,为合理评价及利用药用石斛提供科学依据.方法利用激光共聚焦显微技术(laser scanning confocal microscopy,LSCM)观察二月份采收的球花石斛1-3龄茎的基部、中部和顶部的香豆素类成分.所记录数据经正态性、方差齐性检验后进行方差分析(ANOVA),并使用Tukey's检验作多重比较.结果香豆素类成分主要分布在球花石斛茎的维管束部位并以维管束外侧纤维的壁较多.统计分析显示香豆素类成分的含量在不同年龄茎的各个部位之间差异极显著或显著,显著值分别为:基部P=0.004(＜0.01);中部P=0.009(＜0.01);顶部P=0.036(＜0.05).结论若以利用香豆素类成分为目的,建议二月采收时,宜选择2龄茎.
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球花石斛的位点特异性PCR鉴别研究
为建立球花石斛的DNA分子标记鉴别方法,本文根据测定及GenBank上登录的109种共计164个石斛样本的rDNA ITS序列,设计了特异性鉴别引物QH-JB1 和QH-JB2,并对球花石斛进行了位点特异性PCR鉴别研究.结果表明,当复性条件为63.5 ℃,1 min时,只有球花石斛的模板DNA能被扩增出约300 bp的阳性扩增带,而其他种石斛均为阴性.证明用本法鉴别球花石斛简便、省时,也适用于干燥球花石斛药材的鉴别,具有广泛的应用前景.
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GC-MS法检测球花石斛花中挥发性成分
目的 研究球花石斛花中挥发性的化学成分.方法 采用水回流法从球花石斛花中提取挥发性成分,并用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术,对球花石斛花中的挥发性成分进行了测定.结果 共鉴定出22种化学成分,其中含量较高的主要有亚油酸(51.82%)、亚麻酸(10.056%)、棕榈酸(9.282%)、硬脂酸(4.579%)、8-羟基-4,7-二甲基香豆素(4.727%)、6,7-二甲氧基香豆素(3.083%)、二十三烷(4.490%)等.结论 该文首次采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对球花石斛花挥发性成分进行提取研究.
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球花石斛和流苏石斛的显微鉴别及多糖含量测定
目的 建立球花石斛和流苏石斛的鉴别方法,为进一步鉴别不同种石斛提供实验基础.方法 采用组织切片和显微数量分析对球花石斛和流苏石斛进行显微鉴别;采用苯酚-浓硫酸法测定二者多糖含量.结果 球花石斛和流苏石斛组织切片特征明显,且针晶束和硅质块数量差异具有统计学意义(P＜0.01);球花石斛及流苏石斛的多糖含量分别为4.42％、4.47％.结论 球花石斛和流苏石斛多糖含量相近,可采用显微数量分析方法鉴别,此方法简单、快速、重复性好,可为临床上准确使用不同石斛品种提供可靠的鉴别方法.
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球花石斛的离体快繁体系研究
目的 建立球花石斛离体快繁研究体系.方法 利用球花石斛种子为外植体,采用种子培养方式开展繁育试验研究.结果 球花石斛种子接种MS+香蕉泥13％的培养基上,可成功诱导其原球茎;MS +0.1mg/L NAA+ 1.5mg/L 6-BA+香蕉汁13％为球花石斛增殖的佳培养基,增殖系数为7.9;无根苗生根的适宜培养基为1/2 MS +0.1mg/L NAA+2mg/L 6-BA+香蕉汁13％+土豆汁10％+活性炭2mg/L,生根率达到95％,平均根数为6.3条;组培养移栽到松树皮+水苔(3∶1)的栽培基质上,成活率为100％,且植株长势良好.结论 寻找到球花石斛离体繁育研究中各阶段佳培养基,建立了该植物的离体快繁体系.
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云南球花石斛提取物体外自由基清除活性研究
目的 研究药用植物球花石斛(Dendrobium thyiflrum) 95％乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇5种粗提物体外自由基清除活性.方法 采用DPPH自由基清除法对云南球花石斛五种提取物的体外自由基清除作用进行研究.结果 球花石斛乙酸乙酯粗提物的自由基清除效果显著,其IC50为0.11 mg/mL.结论 球花石斛提取物在自由基清除活性方面有一定的应用价值,该研究工作对球花石斛的开发应用,提供一定的科学依据.
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云南球花石斛花化学成分的研究
目的 研究云南球花石斛花化学成分,发现其活性成分.方法 球花石斛花溶剂提取、硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析进行分离纯化,波谱分析(核磁共振氢谱、碳谱、和质谱)确定结构.结果 从该药用植物花乙酸乙酯萃取部分分离并鉴定了7个化合物,分别为:β-sitosterol (1),stigmasterol (2),6,7-dimethoxy coumarin (3),6-methoxy-7-hydroxy coumarin (4),dibutyl phthalate (5),naringenin (6),daucosterol (7).结论 所有化合物均为首次从本植物花中分离得到.
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HPLC测定不同采收期球花石斛中酚类成分的含量
目的:比较不同采收期球花石斛中酚类成分(联苄、菲和芴酮类成分)的含量变化,为球花石斛的合理采收及质量评价提供科学依据.方法:采用高效液相色谱法对不同采收期球花石斛中联苄类化合物石斛酚(gigantol)和杓唇石斛素(moscatil-in),菲类化合物moscatin及笏酮类化合物dendroflofin、dengibsin和denchrysan A的含量进行测定.色谱条件:色谱柱为Beck-man Coulter ODS(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈和0.1%三氟醋酸水溶液,梯度洗脱[32%A(0～15 min),32%A→65%A(15～45 min),65%A→32%A(45～55 min)],流速:1.0 mL·min-1;检测波长280 nm;柱温25℃.结果:石斛酚、杓唇石斛素、moscatin、dendroflorin、dengibsin和denchrysan A在测定的范围内均表现出良好的线性(r＞0.9992);方法的回收率在95.8%～102.4%之间(RSD＜2.8%).结论:通过对同一年12个月不同采收期的球花石斛中联苄、菲和芴酮类成分的含量测定,证明方法灵敏,准确可靠,重复性好.总酚类成分的含量在4,5月份和10,11月份相对高于其他月份.
