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大麻素WIN55,212-2对体外培养牛眼小梁细胞前列腺素E2表达的影响
目的 研究大麻素WIN55,212-2对体外培养的牛眼小梁细胞前列腺素E2(PGE2)表达的影响,从而探讨其降眼压机制.方法 采用组织块培养法对牛眼小梁细胞进行原代培养,取传3代的细胞运用酶联免疫吸附(ELISA)法测定不同浓度大麻素WIN55,212-2作用后细胞上清液中PGE2水平的变化;运用RT-PCR方法检测不同浓度大麻素WIN55,212-2作用后PGE2 mRNA在小梁细胞内的表达水平.结果 细胞上清液中的PGE2水平与细胞内PGE2 mRNA水平随大麻素浓度变化呈剂量依赖性升高.结论 一定剂量的大麻素可以促进小梁细胞分泌PGE2,从而达到降低眼压的目的.
关键词: 大麻素WIN55 212-2 小梁细胞 前列腺素E2 前列腺素E2mRNA -
大麻素WIN55,212-2对体外培养牛眼小梁细胞MMP-3、MMP-9及TIMP-1表达的影响
目的 研究大麻素WIN55,212-2对体外培养的牛眼小梁细胞MMP-3、MMP-9及LTlMP-1表达的影响,从而探讨其降眼压机制.方法 采用组织块培养法对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养,应用免疫组化方法(NSE,Ⅷ因子相关抗原染色)鉴定细胞,应用透射电镜对细胞进行形态学及生长特性观察;对传3代的小梁细胞分别施加含大麻素WIN55,212-2终浓度为0(对照组)、1、10、20、40μmol/L的培养液,48h后行MMP-3和MMP-9免疫组化SP染色,结果进行计算机图像分析并进行统计学检验.提取上清液用ELASA法检测随浓度的不同TIMP-1量的变化.结果 体外培养的牛眼小梁细胞表达MMP-3及MMP-9,大麻素WIN55,212-2可促进MMP-3及MMP-9的表达,并抑制TIMP-1的表达.结论 一定剂量的大麻素可以促进牛眼小梁细胞MMP-3及MMP-9的表达(P<0.05),并抑制TIMP-1的表达(P<0.01),从而达到降低眼压的目的.
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大麻素WIN55,212-2对体外培养牛眼小梁细胞cAMP表达的影响
目的 通过研究大麻素WIN55,212-2对体外培养牛眼小梁细胞(BTMC)环腺苷酸(cAMP)表达的影响,探讨其增加房水排出而降低眼压的机制.方法 对BTMC进行体外原代培养及传代培养,应用免疫组化的方法鉴定细胞.然后用不同浓度的WIN55,212-2作用于BTMC,放射免疫法检测细胞上清液中cAMP的水平.结果 WIN55,212-2浓度在0.1-20μmol/L范围内,培养液中cAMP水平随浓度增加而显著性升高,若WIN55,212-2浓度继续增高(40-60μmol/L),cAMP水平不再升高.结论 WIN55,212-2可能通过提高BTMC内cAMP水平而起到降低眼压的作用.