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地五养肝胶囊对肝纤维化大鼠肝脏Hedgehog通路的调节作用
目的:探讨地五养肝胶囊(DWYG)对肝纤维化大鼠肝脏Hedgehog(Hh)信号通路的影响.方法:Wistar大鼠随机分为空白对照组、肝纤维化模型组和DWYG干预组,四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型.应用HE和Masson染色检测不同处理组大鼠肝组织损伤和纤维化程度;应用Western Blot和Real-time qRT-PCR分别检测不同处理组大鼠肝组织Hh信号通路的蛋白和基因表达水平.结果:与空白对照组相比,肝纤维化模型组大鼠出现明显肝组织损伤和纤维化改变,且纤维化肝组织中Shh、Gli1、Smo和Ptc的蛋白和基因表达水平显著上调(P＜0.05);而与肝纤维化模型组相比,DWYG干预可显著减轻肝组织损伤和纤维化程度,同时显著下调纤维化肝组织中Shh、Gli1、Smo和Ptc的蛋白和基因表达水平(P＜0.05).结论:DWYG抗纤维化效应与其抑制纤维化大鼠肝组织中过度活化的Hh信号通路相关.
关键词： 地五养肝胶囊 Hedgehog信号通路 肝纤维化 补肾生髓成肝 -
地五养肝胶囊HPLC指纹图谱建立及7种成分测定
目的 建立地五养肝胶囊HPLC指纹图谱,并测定7种成分的含有量.方法 该药物甲醇提取液的分析采用Proshell 120 SB-C18色谱柱(2.1 mm× 100 mm,2.7μm);以乙腈-醋酸水为流动相,梯度洗脱;柱温30 ℃;体积流量0.3 mL/min;检测波长254 nm.结果 10批样品HPLC指纹图谱中有13个共有峰,相似度在0.90以上.7种成分在各自范围内线性关系良好(r＞ 0.999 8),平均加样回收率98.65％ ～111.46％,RSD 0.59％ ～ 3.81％.结论 该方法精密度、稳定性、重复性良好,可用于地五养肝胶囊的质量控制.
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地五养肝胶囊对二乙基亚硝胺诱导斑马鱼肝损伤的保护作用
目的 考察地五养肝胶囊对二乙基亚硝胺诱导斑马鱼肝损伤的保护作用.方法 360条斑马鱼随机分成空白组(标准培养液)、模型组(二乙基亚硝胺)、地五养肝胶囊干预组(25、50、100 μg/mL)、异甘草酸镁注射液干预组(0.1 mg/mL).7d后,测量斑马鱼肝脏面积,计算其相对光密度,整体油红0染色法测定肝内脂滴数.结果 模型组肝脏浑浊,其面积较空白组显著减小(P ＜0.001),相对光密度显著升高(P＜0.05),脂滴密集分布;50 μg/mL地五养肝胶囊干预组及异甘草酸镁注射液干预组肝脏更清晰,脂滴更少,肝脏面积、相对光密度与空白组比较均无明显差异(P＞0.05).结论 地五养肝胶囊对二乙基亚硝胺致斑马鱼肝损伤具有一定保护作用.
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地五养肝胶囊治疗肝病的理论依据
地五养肝胶囊是湖北省中医院研发的一种新型复方中药制剂,具有抗炎保肝及调控肝再生作用,用于治疗慢性肝病.地五养肝胶囊是继承中医“生机学说”,创新“肝主生发”肝脏象理论提出的新治疗法则,经过系统深入地研究,构建了“补肾生髓成肝”的理论体系.“补肾生髓成肝”可以通过补肾生“骨髓”“脑髓”和“精髓”而调控转化生成肝,以维持或促进正常肝脏发生发育和再生修复机制、防止肝再生紊乱机制,从而防治肝脏病证的发生发展.方中茵陈清热利湿、利胆退黄,姜黄破血行气、辛温通络,五味子收敛固涩、益气生津、补肾宁心,甘草和中缓急、通经脉、利血气,同时配以熟地黄甘温补肾而养阴,诸药合用,补肾生髓而成肝.方中各药其有效成分对肝病的治疗及预后有促进作用,且临床应用表明地五养肝胶囊对肝病具有良好的治疗效果,是一种安全有效的治疗肝病的药物.该胶囊前期主要研究其抗慢性肝炎以及其治疗肝纤维化作用,相应抗癌机制研究较少.由于肝纤维化是慢性肝病发展到肝硬变必经之阶段,而肝硬变、慢性感染和炎症反应与肿瘤发生密切相关,因此可以对其抗肝癌作用展开进一步研究.
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地五养肝胶囊的定性研究
地五养肝胶囊为湖北省中医院的医院制剂，由茵陈、姜黄、五味子、甘草等中药组成，具有补肾养肝、清利湿热、解毒通络有功能，用于慢性肝炎患者，在临床使用，获得良好疗效。为控制产品质量，对本品进行了定性定量研究。
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地五养肝胶囊对2-AAF/PH大鼠模型肝癌前病变的抑制作用
目的 观察地五养肝胶囊(DWYG)对2-AAF/PH大鼠模型肝癌前病变的抑制作用.方法 建立2-AAF/PH大鼠肝癌前病变模型,采用SPF级Wistar大鼠384只,随机分为空白组、假手术组、模型组、DWYG组.取肝切除后第8、10、14、17、19、22天实验大鼠肝组织进行病理组织学观察,采用IPP6.0软件进行图像处理.计数各实验点肝脏表面直径＞1 mm的小结节、细胞核数目、细胞核面积总量、细胞核平均直径和细胞核IOD值.结果 肝组织结节数:术后第8、22天,DWYG组低于模型组.细胞核数目:术后第10、14、17、22天,DWYG组高于空白组.细胞核面积总量:术后第17天,DW-YG组高于空白组;术后第19天,DWYG组低于模型组.细胞核平均直径:术后第17天,DWYG组高于空白组,术后第19天,DWYG组低于模型组.以上实验数据经统计学处理,差异显著,P＜0.01或P＜0.05.结论 地五养肝胶囊具有抑制2-AAF/PH模型大鼠肝癌前病变的作用.
关键词： 2-AAF/PH模型 地五养肝胶囊 肝癌前 -
地五养肝胶囊对肝纤维化大鼠肝组织EMT/MET的影响
目的 研究地五养肝胶囊(Diwu Yanggan Capsule,DWYG)对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝脏上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)/间质-上皮转化(mesenchymal-epithelial transition,MET)的影响.方法 SPF级Wistar大鼠给予50％ CCl4/大豆油腹腔注射建立肝纤维化模型.给予DWYG干预后,采用羟脯氨酸(Hyp)检测试剂盒检测该复方对纤维化大鼠肝脏Hyp含量的影响.进一步,应用Western blot检测该复方对纤维化大鼠肝组织上皮细胞标志分子(E-cadherin)和间质细胞标志分子(Vimentin)蛋白表达水平的影响.应用quantitative real-time RT-PCR检测该复方对纤维化大鼠肝组织促EMT分子(TGF-β1)以及促MET分子(BMP-7)基因表达水平的影响.结果 与空白对照组大鼠相比,CCl4诱导的肝纤维化模型大鼠肝组织Hyp含量显著升高,同时纤维化肝组织中E-cadherin的蛋白表达水平和BMP-7的基因表达水平明显下降,而Vimentin的蛋白表达水平和TGF-β1的基因表达水平明显升高.给予DWYG后,干预组大鼠肝组织Hyp含量较模型组大鼠显著降低,同时纤维化肝组织中E-cadherin的蛋白表达水平和BMP-7的基因表达水平均显著上调,而Vimentin的蛋白表达水平和TGF-β1的基因表达水平显著下调,且纤维化肝组织中TGF-β1/BMP-7比值明显下降.结论 EMT/MET失衡参与了CCl4诱导的大鼠肝纤维化的发生与发展,DWYG可通过调控EMT/MET平衡(抑制EMT而促进MET)减轻肝纤维化的病变,其调控机制与降低纤维化肝组织中TGF-β1/BMP-7比值相关.
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地五养肝胶囊对肝肾精虚大鼠肝再生的影响
目的:研究地五养肝胶囊对肝肾精虚/MSG-肝再生-大鼠肝再生的影响.方法:复制肝肾精虚/MSG-肝再生-大鼠模型(简称“模型组”)和正常大鼠肝大部分切除再生模型(简称“PHx组”).将实验大鼠分4组:模型组、PHx组、对照组和治疗组,每组32只.治疗组大鼠以地五养肝胶囊灌胃,除PHx组外另两组大鼠以等体积生理盐水灌胃.在术后1、3、7、10天时分别观察大鼠的肝再生度、肝再生指数(％)和肝细胞分裂指数MI.结果:模型组大鼠术后第1天肝再生度、肝再生指数、MI分别为(0.34±0.1O)、(1.88±0.14)、(1.05±0.12)均显著高于PHx组(0.22±0.08)、(1.46±0.13)、(0.86±0.16)和对照组(0.21±0.05)、(1.47±0.18)、(0.87±0.16),P均＜0.05;模型组大鼠术后第3、7和10天肝再生度、肝再生指数、MI分别为(0.42±0.08、0.57±0.12、0.70±0.08),(2.07±0.04、2.41±0.06、2.84±0.10)和(1.04±0.18、0.41±0.16、0.15±0.03),均显著低于PHx组(0.53±0.10、0.73±0.09、0.88±0.06),(2.31±0.29、3.02±0.30、3.49±0.05),(1.85±0.19、0.62±0.03、0.29±0.04)和对照组(0.54 ±0.09、0.71±0.11、0.90±0.10),(2.33±0.42、3.07±0.13、3.46±0.05),(1.81±0.04、0.67±0.18、0.28±0.05),P均＜0.05.治疗组大鼠术后第1天肝再生度、肝再生指数、MI分别为(0.13±0.07)、(1.52±0.11)、(0.77±0.14)均显著低于模型组大鼠(0.34±0.10)、(1.88±0.14)、(1.05±0.12),P均＜0.05；治疗组大鼠术后3、7、10天肝再生度、肝再生指数、MI分别为(0.50±0.05、0.74±0.06、0.86±0.03),(2.19±0.11、2.84±0.12、3.27±0.06),(1.89±0.13、0.57±0.20、0.28±0.04)均显著高于模型组(0.42±0.08、0.57±0.12、0.70±0.08),(2.07±0.04、2.41±0.06、2.84±0.10),(1.04±0.18、0.41±0.16、0.15±0.03),P均＜0.05.结论:地五养肝胶囊可一定程度地纠正肝肾精虚/MSG-肝再生-大鼠的肝再生紊乱,早期可抑制肝再生的异常亢进,中晚期可一定程度地改善被抑制的肝再生,使损伤的肝组织得以再生修复.通过下丘脑-垂体-肝轴影响肝再生过程可能是其作用机制之一.
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地五养肝胶囊辅助治疗乙肝肝硬化失代偿期患者的疗效观察
目的 观察地五养肝胶囊辅助治疗乙肝肝硬化失代偿期的临床疗效.方法 69例乙肝肝硬化患者随机分为常规治疗组(36例)和联合治疗组(33例),其中常规治疗组选用常规内科西药治疗.联合治疗组在常规治疗的基础上给予"地五养肝胶囊"治疗,疗程为12周.比较两组患者治疗前后临床症状、血生化指标变化情况.结果 两组患者治疗后临床主症较治疗前均有明显改善(P<0.05),且联合治疗组改善明显优于常规治疗组(P<0.05);两组治疗后血清PAB、ALB、CHE水平明显升高(P<0.05),而TBIL明显下降(P<0.05),且联合治疗组较常规治疗组比较升高或降低更为显著(P<0.05).结论 地五养肝胶囊可明显改善乙肝肝硬化失代偿期患者的临床症状及实验室指标.
