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基于液质联用技术的复方三芪口服液化学成分特征图谱研究
目的:建立复方三芪口服液中化学成分的UPLC-LTQ-Orbitrap液质联用定性分析方法,对黄芪、三七的黄酮、皂苷类成分的电喷雾串联质谱信息进行探讨.方法:采用kinetix(2.1mm×100mm,1.7μm)色谱柱,流动相乙腈-水梯度洗脱,经DAD检测器后采用ESI-LTQ-Orbitrap质谱负离子模式采集,一级全扫描离子在离子阱内进行碰撞诱导解离(CID)测定多级质谱,傅里叶变换回旋共振检测高分辨质谱数据进行分析.结果:超高效液相色谱很好地对三芪口服液中化学成分进行分离,分别建立黄芪、三七化合物质谱数据库,根据精确相对分子量信息和多级质谱碎片信息,结合对照品质谱行为,从复方三芪中快速分析鉴定了39个成分.结论:本方法分离度良好,灵敏度高,可同时对复方制剂三芪口服液中不同类型化合物快速分析,并有助于开展进一步的活性成分和质量控制研究.
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杨霓芝应用益气活血法治疗糖尿病肾病的学术思想探讨
1糖尿病肾病的气虚血瘀病机DM(糖尿病)属中医"消渴病"范畴,一般认为其病机观点是阴津亏虚、燥热偏胜,临床表现为消渴、多食、多尿等.DN(糖尿病肾病)由糖尿病发展而来,属于中医"消渴病"合并"水肿"、"尿浊"、"腰痛"等范畴,按逻辑推理也应以阴津亏虚、燥热偏胜为基础证型.
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三芪口服液对5/6肾切除大鼠血小板膜糖蛋白CD62P表达的影响
目的:观察三芪口服液对慢性肾衰竭大鼠血小板膜糖蛋白(CD62P)表达的影响.方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、包醛氧淀粉组,及三芪口服液治疗高、中、低剂量组(TMH、TMM、TML组).观察12周,检测大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、血红细胞压积(HCT)、血小板计数(PLT)和CD62P的表达.结果:三芪口服液治疗后,与模型组比较能降低BUN、Scr值,下调CD62P,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:三芪口服液在一定程度上可下调CD62P的表达,这可能是其改善肾功能的机制之一.
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三芪口服液对实验性肾炎大鼠肾小管功能及HGF、TGF-β1表达的影响
目的:研究益气活血为组方原则的"三芪口服液"对实验性肾炎大鼠肾小管间质的影响,并初步探讨其作用机制.方法:采用葡萄球菌肠毒素B(SEB)分次静脉注射,牛血清白蛋白(BSA)隔日灌胃、弗氏佐剂及BSA分次皮下注射,延长造模时间等方法改进大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型.予益气活血中药复方三芪口服液治疗,现察对大鼠的病理形态学、24h尿蛋白定量、尿微量白蛋白、NAG、CYSC的影响;并通过应用免疫组化、PCR等技术检测HGF、TGF-β1等细胞因子的.结果:益气活血中药复方三芪口服液能减少大鼠尿微量白蛋白、NAG酶、CYSC水平;提高大鼠肾组织HGF 表达,减少TGF-β1的表达.结论:益气活血中药复方三芪口服液具有肾小管功能保护作用,调节HGF、TGF-β1的表达可能是其作用机制之一.
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3／4肾切除大鼠心脏病变及三芪口服液的调控作用
目的：探讨3/4肾切除大鼠的心脏病变及三芪口服液干预的疗效。方法建立3/4肾切除大鼠并发早期心肾综合征模型，用三芪口服液治疗，并以缬沙坦作为对照组。检测血肌酐（ Scr），观察心脏形态及病理变化，探讨三芪口服液的干预作用；结果模型组与空白组比较，血肌酐升高（P＜0.01）、左心室/全心重（LVw/Hw）、LVw/体重（Bw）、Hw/Bw上升（P＜0.01，P＜0.05，P＜0.05）。三芪组与模型组比较，血肌酐、LVw/Hw、LVw/Bw均较模型组减低（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.05），与缬沙坦组比较差异无统计学差异（P＞0.05）。心肌苏木素-伊红（HE）、Masson染色方面，模型组出现心肌细胞肥大，排列不均匀，相同切片做Masson染色后，纤维排列疏松、紊乱，部分间质有蓝色胶原沉积；三芪组、缬沙坦组与模型组比较，心肌细胞肥大及排列不均匀明显改善，未见明显心肌间质胶原沉积。结论3/4肾切除大鼠模型是早期心肾综合征的良好模型，三芪口服液可降低模型大鼠Scr水平，改善肾功能，并且能降低LVw/Hw、 LVw/Bw，改善左心室重构及心肌纤维化。
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三芪口服液对糖尿病模型大鼠氧化应激作用的研究
目的:探讨三芪口服液对糖尿病模型大鼠肾脏损伤因素中脂毒性和氧化应激的干预.方法:选用4周龄雄性SD大鼠40只:随机取8只作为对照组,其余32只大鼠为造模组.造模组行右肾切除术,对照组于开腹后即行切口缝合,2周后造模组腹腔注射STZ溶液(剂量35 mg·kg-1),对照组腹腔注射同等剂量无菌柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液.筛选成模糖尿病大鼠16只,随机分为模型组和三芪组,每组8只.三芪组给予三芪口服液,对照组和模型组给予相同容积蒸馏水.干预6周,观察各组大鼠一般情况、尿蛋白、血脂、肾功能指标、肾组织氧化应激指标.结果:与模型组比较,三芪组大鼠尿蛋白、肾功能、血脂及氧化应激指标均明显改善(P＜0.01).结论:三芪口服液具有肾脏保护作用,其机制可能和改善脂毒性和氧化应激损伤相关.
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三芪口服液对糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞及其蛋白表达的影响
目的 观察三芪口服液对实验性糖尿病肾病(DN)模型大鼠足细胞计数及足细胞标志性蛋白PCX及足细胞裂孔膈膜蛋白的影响.方法 SD雄性大鼠,予STZ单次腹腔注射及高脂饲料造模,筛选DN成模大鼠,随机分组,药物干预;6周后采集大鼠尿测尿蛋白,处死大鼠取肾组织以免疫组化方法测定PCX、nephrin的蛋白表达、足细胞计数.结果 三芪口服液组肾小球足细胞数较模型组多(P＜0.05)；定量分析结果显示；模型组PCX平均荧光密度、nephrin蛋白表这均低于三芪口服液组(P＜0.05)；Pearson相关分析结果显示,24小时UMA与肾小球足细胞PCX平均荧光密度、nephrin蛋白表达呈负相关(P＜0.01).结论 益气活血中药复方三芪口服液能够上调肾足细胞裂孔隔膜nephrin、足细胞特异性标志蛋白PCX的蛋白表达,从而改善足细胞的损伤,减少尿蛋白,延缓DN进程.
