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葛花解酲方对肝癌细胞原位移植瘤小鼠端粒酶蛋白表达水平的影响
目的:探讨葛花解酲方对肝癌小鼠端粒酶蛋白的影响.方法:Balb/C小鼠32只,除正常组8只外,其余制备供瘤体,建立H22小鼠肝癌细胞原位移植瘤模型,并随机分成3组,每组8只,分别为模型组、葛花解酲方低、高剂量组(20,40 g·kg-1).给药组以中药水煎剂ig,正常组代以生理盐水,观察小鼠一般情况;体重、肝脏指数的变化;HE染色观察肝脏病理损伤的情况;ELISA检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),谷氨酰转移酶(GGT)的变化;Western blot检测肝脏端粒酶蛋白含量的变化.结果:与正常组比较,模型组体重明显降低,肝脏指数,ALT,AST,GGT水平及端粒酶蛋白水平明显升高(P＜0.05);与模型组比较,葛花解酲方高、低剂量组小鼠体重明显升高,ALT,AST,GGT及端粒酶蛋白水平明显降低(P＜0.05).病理结果显示,模型组小鼠肝组织和细胞异型性明显,给药后小鼠肝脏病理损伤有所减轻.结论:葛花解酲方能减轻肝脏损伤,保护肝功能,通过抑制端粒酶蛋白表达,抑制其异常激活引起的细胞无限增殖,对小鼠肝癌原位移植瘤有一定的防治作用.
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葛花解酲方对移植性肝癌小鼠肿瘤组织生长抑制及其APC蛋白表达的影响
目的:探讨葛花解酲方对BALB/c小鼠H22肝癌细胞生长抑制作用,及其对肿瘤组织腺瘤样息肉蛋白(APC)蛋白表达的影响.方法:雄性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组和葛花解酲方高、低剂量(40,20 g·kg-1)组,正常组不做处理,其余3组制备移植性肝癌小鼠模型,从造模后第2日开始给药,正常组及模型组给予生理盐水ig,葛花解酲方高、低剂量组给予同体积中药水煎剂ig.ig剂量均为0.01 mL·g-1,连续灌服12d后处死小鼠,完整剥离肿瘤组织,称重,计算抑瘤率;肿瘤组织制作病理切片;取脾脏和胸腺,计算脾脏和胸腺指数;取血离心后用酶联免疫吸附法检测血清中白细胞介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量变化.免疫组化法检测小鼠肿瘤组织中APC蛋白的表达,免疫印迹法(Western blot)检测APC蛋白表达.结果:与模型组比较,葛花解酲方高、低剂量组对小鼠瘤重均有不同程度的抑制作用,抑瘤率分别为37.05％,16.51％ (P ＜0.05,P＜0.01).模型组APC蛋白高表达,葛花解酲方高、低剂量组中APC表达水平较模型组明显下降(P＜0.05,P＜0.01).结论:葛花解醒方在一定剂量下能抑制肝癌小鼠瘤块的生长,并呈量效关系,还对抑癌基因APC有一定的调控作用,这可能是葛花解酲方抑制肝癌细胞的作用机制之一.
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葛花解酲方对乙醇性 HBV 转基因小鼠肝癌癌前病变细胞周期调控因子表达的影响
目的：观察葛花解酲方对乙醇性 HBV 转基因小鼠肝癌癌前病变细胞周期蛋白 D1（CyclinD1）、周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）及 p27细胞周期调控因子蛋白表达的影响，探讨葛花解酲方阻断肝癌癌前病变的作用机制。方法将24只 HBV 转基因小鼠适应性饲养1周后，随机分为对照组、模型组、治疗组，每组8只。各组小鼠于22周末进行取材光镜观察肝组织病理学改变并用免疫组织化学法检测 CyclinD1、CDK4及 p27 KIP1蛋白的表达。结果与模型组比较，给药组肝组织病理形态学得到明显改善；与对照组比较，模型组 CyclinD1和 CDK4阳性表达率显著升高（P＜0．05）；与模型组比较，治疗组 CyclinD1和 CDK4阳性表达率显著下降（P ＜0．05）；与对照组比较，模型组 p27 KIP1阳性表达率显著降低（P ＜0．05），与模型组比较，治疗组 p27 KIP1阳性表达率显著升高（P ＜0．05）。结论葛花解酲方可以通过下调癌基因 CyclinD1和 CDK4的表达，上调抑癌基因 p27 KIP1的表达，从而达到保护肝脏损害、逆转肝癌癌前病变的作用。
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葛花解酲方对肝癌细胞原位移植瘤小鼠抗氧化作用的影响
目的 观察葛花解酲方对肝癌细胞原位移植瘤小鼠抗氧化作用的影响. 方法 采用H22小鼠腹水瘤细胞原位移植瘤动物模型,对癌变小鼠进行治疗. 通过HE染色切片观察小鼠肝脏的组织和细胞形态变化. ELISA检测血清超氧化物歧化酶( SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)、丙二醛( MDA)的含量并观察免疫组化染色的表达情况. 结果 H22腹水瘤细胞诱发的原位移植瘤小鼠肝脏可出现无限增殖、坏死等病理变化. 葛花解酲方可调节SOD、MDA、GSH-Px的表达水平,在一定程度上具有抗氧化损伤作用,进而减缓模型小鼠癌变进程. 结论 葛花解酲方对H22小鼠腹水瘤细胞诱发的肝脏肿瘤有确切的疗效,其机制可能与抗氧化作用的激活有关.
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葛花解酲方对移植性肝癌小鼠外周血中免疫炎症因子含量的影响
目的 通过研究葛花解酲方对移植性肝癌模型小鼠中IL-1、TNF-α水平变化的影响,探讨其可能的作用机制.方法 将H22肝癌细胞株培养至对数生长期,接种到各造模组小鼠腋窝下,第2日开始给药,至造模周期结束后剥离瘤块,制作病理切片;取脾脏和胸腺,计算脾脏和胸腺指数;取血离心后用酶联免疫法检测血清中IL-1和TNF-α含量变化.结果 模型组、葛花解酲方高、低剂量组IL-1、TNF-α分泌水平与空白组相比较均具有有统计学意义(P＜0.05);模型组与葛花解酲方高、低剂量组相比较具有有统计学意义(P＜0.05).结论 葛花解酲方在一定剂量下能够调节IL-1和TNF-α的分泌水平、改善BALB/c小鼠的免疫功能进而提示葛花解酲方的抑瘤作用可能与此相关.
