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哈蟆油蛋白对骨质疏松预防及ALP,Osteocalcin,Runx-2基因表达的调节作用
目的:观察哈蟆油蛋白(ROP)的抗骨质疏松作用,并探讨其对骨生长相关基因的调节作用.方法:采用去势法建立大鼠骨质疏松模型,随机分为空白组,模型组,戊酸雌二醇组,ROP高、中、低剂量组(0.15,0.075,0.037 5 g·kg-1);利用X射线技术测量股骨和腰椎骨密度(BMD);利用骨骼强度仪检测股骨的大载荷量;应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测骨生长相关基因的表达.结果:与空白组比较,模型组股骨、腰椎骨密度明显降低(P ＜0.05,P＜0.01),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),Osteocalcin,Runx-2基因表达均显著下调(P＜0.01);与模型组比较,ROP高、中剂量组腰椎BMD均有显著增加(P＜0.01),ROP高剂量组ALP,Osteocalcin,Runx-2基因表达显著上调(P＜0.01).结论:ROP能显著提高大鼠BMD和大载荷量;ROP可能通过上调ALP,Osteocalcin,Runx-2基因的mRNA表达,促进成骨分化,调节骨代谢平衡,从而发挥防治骨质疏松的作用.
关键词： 哈蟆油蛋白 骨质疏松 碱性磷酸酶 Osteocalcin Runx-2 -
蝙蝠葛碱对成骨细胞分化成熟的影响
目的 探讨蝙蝠葛碱对成骨细胞分化成熟的影响及其机制.方法 正常人成骨细胞株(NHOst)培养在含有100ng/ml的蝙蝠葛碱的培养基中,7d后,通过相差显微镜观察细胞形态的变化,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALPase)和硝酸银(Von Kossa)镀银染色检测钙沉积.通过RT-PCR分析核心结合因子A1(Core binding factor A1,Cbfa1) mRNA的表达.通过Western-blot检测骨基质蛋白Osteocalcin的表达.结果 培养7d后,实验组细胞呈岛样生长并开始分化成熟,成熟的细胞形成骨结节,而对照组细胞则未见骨结节形成.通过碱性磷酸酶和硝酸银镀银染色发现,实验组细胞可见钙沉积,而对照组细胞未见钙沉积.实验组Cbfa1和Osteocalcin的表达都明显高于对照组.结论 蝙蝠葛碱可促进骨细胞分化成熟.
关键词： 蝙蝠葛碱 成骨细胞 分化 Cbfa1 Osteocalcin -
根尖周炎模型小鼠DKK1、SFRP1及骨形成相关分子Runx2、Osteocalcin的表达变化
目的:检测DKK1和SFRP1在小鼠实验性根尖周炎中不同时期的表达,并初步观察根尖周炎症状态下骨形成相关分子Runx2和Osteocalcin改变.方法:将50只8~10周C57 BL/6雄性小鼠随机分成0 d,7 d,14 d,21 d组和28 d组,每组10只.分离下颌骨,Micro-CT扫描观察根尖周炎症骨缺损体积,同时制备磨牙近远中向矢状切片行HE组织学观察,采用免疫组化检测DKK1和SFRP1及骨形成相关分子(Runx2和Osteocalcin)表达水平.另每组取3只小鼠,处死前14 d和4 d分别注射钙黄绿素(30 mg/kg)和茜素红(50 mg/kg)后行硬组织磨片,初步观察根尖周骨改建状态.结果:Micro-CT扫描显示随根尖周炎的发生发展,术后7 d开始至14 d,根尖缺损体积逐渐增大,术后21 d达到高值.破骨细胞数量在21 d多,28 d趋于稳定.DKK1和SFRP1阳性细胞在术后7~14 d表达逐渐增多,在术后28 d表达有所下降.Runx2和Osteocalcin阳性细胞术后7~28 d表达数目持续增多.结论:DKK1和SFRP1参与了根尖周病病理过程,根尖周骨破坏进程可能伴随代偿性骨形成.
关键词： DKK1 SFRP1 Runx2 Osteocalcin 根尖周炎
