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在尾核痛反应神经元和整体甩尾反射水平上研究辛卡利特对抗电针的镇痛作用
目的:研究辛卡利特(CCK-8)对抗电针(EA)对大鼠尾核(Cd)中痛反应神经元放电和甩尾潜伏期(TFL)痛阈的影响.方法:采用了同步记录大鼠Cd中痛兴奋神经元(PEN)或痛抑制神经元(PIN)电变化与辐射热照射大鼠尾所引起TFL的方法.实验分3组:①对照组:不给大鼠任何处理.②EA组:用G-6805型治疗仪,电压6 V,频率15 Hz,连续电脉冲,刺激双侧"足三里"15 min.③EA+CCK-8组:在EA双侧"足三里"15 min后,借助自动微量推进器立即向大鼠侧脑室注入CCK-8(10ng/10μL),2 min注射完毕.结果:辐射热照射大鼠尾可使PEN诱发放电增加或PIN诱发放电减少的同时发生甩尾反射,表现出辐射热致疼痛效应;EA双侧"足三里"15 min可抑制PEN的电活动或加强PIN的电活动,同时使TFL延长,即呈现出EA的镇痛效应;侧脑室注射CCK-8能同时对抗EA所引起PEN或PIN和TFL的镇痛作用.结论:CCK-8的抗EA镇痛作用在中枢痛反应神经元电活动和整体行为反射水平上是协调一致的.提示降低脑内CCK-8的含量能提高临床针刺的镇痛疗效,以及PEN和PIN的电活动作为疼痛和镇痛指标是确实可行的.
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八肽胆囊收缩素对神经细胞缺氧的作用
目的 探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对缺氧神经细胞的作用.方法 采用神经细胞原代分离培养技术,以细胞外上清液LDH、神经细胞3H-谷氨酸摄取及3H-GABA摄取功能为损伤指标.结果 缺氧后神经细胞上清液中LDH含量明显增高,3H-谷氨酸和3H-GABA摄取率较未缺氧对照组明显降低.给予CCK-8后, 可减轻缺氧引起的这些神经细胞损伤,CCK-B受体拮抗剂L-365260可阻断CCK-8对神经细胞缺氧的保护作用.结论 CCK-8对缺氧性神经细胞损伤具有保护作用; 该作用可被CCK-B受体拮抗剂阻断,说明其保护机理是由B受体介导产生的.
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八肽胆囊收缩素对大鼠滑膜细胞株RSC-364增生的影响及其可能的分子机制
目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的大鼠滑膜细胞增生的影响及其可能的分子机制.方法通过噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的CCK-8对TNF-α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞、Ⅱ型胶原性关节炎(CIA)大鼠滑膜细胞增生的作用;用酶联免疫吸附(ELISA)法测定CCK-8对TNF-α作用下RSC-364细胞对白细胞介素(IL)-6分泌的影响.结果在TNF-α存在的情况下,10-6、10-7和10-8 mol/L浓度的CCK-8对RSC-364 细胞和CIA大鼠滑膜细胞的增生有显著的抑制作用,而10-6 mol/L浓度的CCK-8对RSC-364细胞IL-6的产生则呈剌激作用,CCK的受体拮抗剂丙谷胺可拮抗CCK-8对IL-6产量的促进作用.结论 CCK-8在 TNF-α存在的情况下可抑制大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞和CIA大鼠滑膜细胞的增生,这种抑制作用可能是通过促进IL-6的产生实现的.提示CCK-8可能具有潜在的调控类风湿关节炎发病过程的作用.
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流式细胞术检测细胞存活率的方法学建立
目的 探讨流式细胞术测定细胞存活率的可行性及准确性,为药物筛选、细胞增殖测定、药物毒性检测等提供新的选择.方法 使用流式细胞术、CCK-8比色法以及台盼蓝染色排除法测定Jurkat细胞存活率.结果 使用流式细胞术,细胞浓度大于105/mL时,CV值小于5%;细胞浓度小于104/mL时,CV值为5%～10%.使用流式细胞术r2为0.993 5,斜率为0.999 4;使用CCK-8比色法r2为0.991 2,斜率为1.011;使用台盼蓝染色排除法r2为0.969 8,斜率为1.057.结论 流式细胞术进样流速稳定,且与活细胞数量成正比,可用于测定细胞存活率.
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L-365,260翻转辛卡利特对抗吗啡对大鼠离体十二指肠电与机械活动的影响
目的:研究辛卡利特(CCK-8)的抗吗啡作用及其作用机制.方法:采用了同步描记大鼠离体十二指肠电与机械活动的方法.结果:乙酰胆碱(ACh,300nmol/L)可使大鼠离体十二指肠峰波振幅增大、数目增多,其收缩幅度随之增大,两者呈正相关.吗啡(330 nmol/L)对离体十二指肠峰波的振幅、数目和收缩幅度均无明显影响,但能选择性抑制ACh对十二指肠段电与机械活动的加强作用,呈负相关.CCK-8(0.7 nmol/L)本身对十二指肠段的电与收缩活动均无明显影响,但能选择性对抗吗啡的作用,即峰波振幅、数目再次增加,收缩幅度也随之增加.在此基础上,CCK-B受体拮抗剂L-365,260(30nmol/L)能翻转CCK-8的抗吗啡作用.结论:CCK-8能对抗吗啡抑制ACh加强十二指肠活动的作用,推测该作用是通过CCK-B受体实现的.
