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前列活血汤对自身免疫性前列腺炎大鼠模型前列腺内炎性细胞因子的影响
目的 观察前列活血汤对自身免疫性前列腺炎大鼠模型(EAPAM)前列腺组织内炎性细胞因子的影响,从而探讨中药治疗前列腺炎的作用机制和作用靶点.方法 60只雄性Wistar大鼠选择40只,随机分成四组:正常对照组、模型组、前列泰组、前列活血汤组,每组10只;余20只制作前列腺组织抗原用.除正常组外,余三组经腹部皮下多点注射大鼠前列腺组织抗原造模(EAPAM).免疫造模3天后,除正常组外,余三组动物分别予生理盐水、前列泰、前列活血汤灌胃8周.动物处死后光镜下观察各组大鼠前列腺组织的病理改变;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠前列腺组织中白介素8(IL-8)、白介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;聚合酶链式反应法(PCR)检测大鼠前列腺组织中TNF-αmRNA的表达水平.结果 模型组前列腺组织中IL-8、IL-10、TNF-α、TNF-αmRNA表达水平较正常对照组均明显升高(P＜0.05);前列腺活血汤组前列腺组织中IL-8、IL-10、TNF-α、TNF-αmRNA表达水平较模型组均有所降低(P＜0.05).结论 前列活血汤能通过调节前列腺局部免疫状态从而明显减轻模型大鼠前列腺的炎症反应.
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丹蒲胶囊对自身免疫性前列腺炎大鼠模型炎性因子的影响
目的 观察丹蒲胶囊对自身免疫性前列腺炎大鼠模型(EAPAM)炎性细胞因子的影响,探讨中药治疗慢性前列腺炎(CP)的作用机制.方法 采用腹部皮下多点注射大鼠前列腺组织抗原的方法造成EAPAM,随机分成3组,每组10只,即:丹蒲胶囊组、前列泰片组、模型组,并以10只正常动物作为正常对照组.各组动物给予灌胃治疗,给药56天后处死动物,光镜观察各组动物前列腺组织的病理改变,通过酶联免疫吸附法检测各组动物血清及前列腺组织中IL-8、IL-10、TNF-α、PGE2等的水平.结果 与正常对照组比较,模型组动物血清及前列腺组织中IL-8、、IL-10、TNF-α水平及前列腺组织中PGE2水平均明显升高(P<0.05～0.01).丹蒲胶囊组血清及前列腺组织中IL-8((3.07±0.61)ng/L、(7.32±2.44)ng/L]较模型组[(4.73±1.95)ng/L、(10.14±3.64)ng/L]降低;丹蒲胶囊组血清及前列腺组织TNF-α[(85.34±19.20)ng/L、(87.01±15.40)ng/L]较模型组[(111.48±31.57)ng/L、(119.88±14.13)ng/L]降低;丹蒲胶囊组前列腺组织中IL-10[(34.05±7.56)ng/L]较模型组[(47.20±15.97)ng/L]明显降低;丹蒲胶囊组PGE2[(603.97±114.62)ng/L]较模型组[(712.58±117.10)ng/L)]也明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 丹蒲胶囊能够明显减轻模型大鼠前列腺炎症反应,调节局部免疫状态.
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湿热消腰部热敷疗法对EAP模型前列腺Th17细胞相关因子表达的影响
目的:通过检测湿热消腰部热敷疗法对实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)(湿热证)小鼠模型前列腺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-17A表达的影响,探讨湿热消腰部热敷疗法可能的作用机制.方法:120只健康雄性KM小鼠,随机抽取20只为正常组,其余100只应用Wistar大鼠前列腺蛋白提纯液辅以免疫佐剂及中医病因造模法制备实验性自身免疫性前列腺炎(湿热证)小鼠模型,造模成功后的小鼠随机分为模型组、基质组、低剂量组、中剂量组和高剂量组.脱去各组小鼠腰1～腰3椎体处毛发,低剂量组、中剂量组和高剂量组用湿热消棉垫、基质组用凡士林棉垫、正常组及模型组用生理盐水棉垫,所用棉垫加热至45℃左右外敷于小鼠脱毛区,每次治疗10min,正常组、模型组、基质组和低剂量组1次/d,中剂量组2次/d,高剂量组3次/d,连续干预4周后处死,用免疫组化法和Western Blot检测检测各组小鼠前列腺组织中TGF-β1、IL-6和IL-17A的表达.结果:造模后,模型小鼠的症状、体征及病理学改变基本符合慢性前列腺炎(湿热证)的表现.免疫组化法和Western Blot结果显示,模型组与正常组相比,前列腺组织中TGF-β1表达明显下降,IL-6和IL-17A表达显著提高,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,高、中、低剂量组IL-6和IL-17A显著下降(P＜0.05),高、中剂量组TGF-β1显著提高(P＜0.05).结论:湿热消腰部热敷疗法通过调节TGF-β1和IL-6的表达,抑制Th17细胞的分化而在CP的治疗中发挥作用.
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白介素-10在自身免疫性大鼠前列腺炎中的作用
目的:通过建立实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)大鼠模型,探讨IL-10对EAP的治疗作用及对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响. 方法:30只Wistar大鼠随机分为正常对照组(C组,10只)、EAP模型阳性对照组(P组,10只)和IL-10干预组(1组,10只).C组给予生理盐水,P组以Wistar大鼠前列腺蛋白提纯液辅以双重免疫佐剂制作EAP模型,Ⅰ组在诱导EAP模型后应用IL-10干预.HE染色观察各组前列腺组织炎性细胞浸润情况,电镜观察前列腺细胞及细胞周围超微结构的变化,半定量RT-PCR法检测前列腺组织TNF-α和TGF-β1的含量. 结果:P组前列腺组织的炎症程度、TNF-α和TGF-β1水平明显高于C组(P<0.05),Ⅰ组大鼠经IL-10治疗后前列腺组织炎性细胞浸润减轻,TNF-α和TGF-β1水平较P组下降,差异均有显著性(P<0.05). 结论:IL-10可减轻EAP大鼠前列腺组织炎症浸润,降低TNF-α和TGF-β1的表达,对EAP有一定的治疗作用.
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自身免疫性前列腺炎动物模型及评价标准研究进展
慢性前列腺炎是一种发病率高且目前发病机制尚未明确的疾病.研究表明,自身免疫反应是其产生的原因之一.而建立有效的动物模型是了解自身免疫性前列腺炎发病机制、寻找其正确诊疗手段的有效途径和方法.目前与自身免疫性前列腺炎相关的动物模型主要包括年龄相关的自发性前列腺炎模型、自身免疫调节因子(AIRE)相关的自发性前列腺炎模型、自身抗原诱导的前列腺炎模型以及激素诱导的前列腺炎模型.自身免疫性前列腺炎动物模型是否造模成功主要从组织学、形态学、特异性抗原、炎症因子以及疼痛程度这5个方面进行评价.
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湿热消腰部热敷疗法对EAP小鼠模型前列腺Th17/Treg相关特异性因子表达的影响
目的:检测湿热消腰部热敷疗法对实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)小鼠模型前列腺组织Th17/Treg相关特异性因子表达的影响,探讨湿热消腰部热敷疗法可能的作用机制. 方法:120只健康雄性KM小鼠,随机抽取20只为正常组,其余100只应用Wistar大鼠前列腺蛋白提纯液辅以免疫佐剂及中医病因造模法制备实验性自身免疫性前列腺炎(湿热证)小鼠模型,造模成功后的小鼠随机分为模型组、基质组、低剂量组、中剂量组和高剂量组.脱去各组小鼠腰1～腰3椎体处毛发,低剂量组、中剂量组和高剂量组用湿热消棉垫、基质组用凡士林棉垫、正常组及模型组用生理盐水棉垫,所用棉垫加热至45℃左右外敷于小鼠脱毛区,每次治疗10 min,正常组、模型组、基质组和低剂量组1次/d,中剂量组2次/d,高剂量组3次/d,连续干预4周后处死,用蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR检测各组小鼠前列腺组织中的视黄酸相关核孤儿受体γt(RORyt)和双头叉转录因子p3(Foxp3)基因蛋白及其mRNA表达. 结果:造模后,模型小鼠的症状、体征及病理学改变基本符合慢性前列腺炎(湿热证)的表现.干预后,模型组与正常组相比,前列腺中Foxp3及其mRNA表达明显下降,RORyt及其mRNA表达显著提高,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,中、高剂量组RORyt及其mRNA的表达显著降低(P＜0.05),高剂量组Foxp3的表达显著提高(P＜0.05),低、中、高剂量组Foxp3 mRNA的表达均无明显改变(P＞0.05). 结论:湿热消腰部热敷疗法可能是通过下调RORγt基因的表达,抑制Th17细胞的分化,使Th17/Treg分化失衡得到控制而在慢性前列腺炎的治疗中发挥作用.
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复方玄驹胶囊治疗自身免疫性前列腺炎大鼠的实验研究
目的:研究复方玄驹胶囊对自身免疫性前列腺炎大鼠的治疗效果. 方法:健康Wistar大鼠60只,随机分为5组,对照组、低浓度蛋白免疫模型组、低浓度蛋白免疫+复方玄驹胶囊全方治疗组、高浓度蛋白免疫模型组、高浓度蛋白免疫+复方玄驹胶囊全方治疗组.除对照组外,其余4组用高低两种浓度(15 mg/ml及80 mg/ml)的同种大鼠前列腺匀浆蛋白提纯液进行注射造模.造模(30 d)成功后,对照组和模型组生理盐水[1 ml/(200 g·d)]灌胃,治疗组用生理盐水溶解的复方玄驹胶囊全方[0.068 g/(ml·d)]灌胃,随后分别于30、45、60 d分批处死大鼠.用ELISA法检测大鼠血清中的IL-8、IL-10及TNF-α的表达,并观察大鼠前列腺组织病理切片. 结果:与模型组相比,经复方玄驹胶囊全方灌胃治疗的高浓度蛋白免疫大鼠血清中IL-8、TNF-α在造模45 d时由(148.54±17.23) pg/ml、(62.14±5.59)pg/ml下降到(100.77 ±11.08) pg/ml、(32.63 ±2.91) pg/ml(P＜0.05);60 d时由(143.69±17.28) pg/ml、(59.38 ±5.50) pg/ml降到(95.77±10.53) pg/ml、(29.63±2.66) pg/ml(P＜0.05).低浓度组造模45 d时IL-8、TNF-α亦由(128.47±12.21) pg/ml、(40.43±3.64) pg/ml下降至(111.76 ±10.07) pg/ml、(35.44±3.17) pg/ml(P ＜0.05),60d时由(131.07±10.93) pg/ml、(43.34 ±3.91) pg/ml降至(97.46±8.75) pg/ml、(30.44 ±2.75) pg/ml(P ＜0.05).高浓度蛋白免疫的治疗组大鼠血清IL-10在造模45 d、60 d分别由(189.14±16.78) pg/ml、(184.14±15.89) pg/ml上升至(230.48±29.96) pg/ml、(248.48±31.03) pg/ml(P＜0.05),低浓度组由(223.14±17.87) pg/ml、(224.14±17.93) pg/ml升高至(231.42 ±23.18) pg/ml、(249.42±24.97) pg/ml(P＜0.05).病理切片示对照组无明显变化;实验组病理切片显示大鼠前列腺组织腺体结构破坏,炎性细胞浸润;治疗组治疗15d后光镜下观察病变逐步改善,腺腔增大,上皮细胞轻度增生,间质中无明显炎性细胞浸润,可见少量纤维组织. 结论:复方玄驹胶囊能降低自身免疫性前列腺炎大鼠前列腺组织炎性改变,并有效改善炎性因子表达,对大鼠自身免疫性前列腺炎有一定疗效.
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电针“三阴”穴对自身免疫性前列腺炎大鼠炎症因子的影响
目的:观察电针“三阴”穴对自身免疫性前列腺炎大鼠局部炎症因子的影响. 方法:在大鼠皮内注射同种异体Wistar雄性大鼠前列腺蛋白提纯液,辅以双重免疫佐剂复制自身免疫性前列腺炎大鼠模型.将40只雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、舍尼通对照组、电针组,每组10只.除正常对照组外,其余大鼠均造模处理,45 d后,正常对照组与模型组以抓取、捆绑、固定处理,电针组和舍尼通组分别给予电针“三阴”穴治疗和舍尼通药物灌胃.连续治疗2个疗程(每个疗程7d,间隔ld,共15 d)后处死各组动物,检测各组动物前列腺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮合酶(iNOS)、总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)水平. 结果:与正常对照组比较,模型组前列腺组织中TNF-α表达显著升高[(32.20±1.65)pg/mlvs (15.31 ±1.36) pg/ml] (P＜0.01)、iNOS活性显著增强[(1.25 ±0.23) U/mlvs (0.81 ±0.33) U/ml](P＜0.01),T-AOC活性显著减低[(1.11±0.15) U/mlvs (1.56±0.16) U/ml](P＜0.01),MDA含量明显增高[(0.91±0.21) nmol/ml vs (0.66±0.14)nmol/ml](P＜0.05)；与模型组比较,电针组前列腺组织中TNF-α表达[(17.32±2.69) pg/ml]明显降低(P＜0.01)、iNOS活性[(0.98 ±0.15) U/ml]显著减低(P＜0.05),T-AOC活性[(1.44 ±0.26) U/ml]明显增加(P＜0.05),MDA含量[(0.70±0.20) nmol/ml]明显减低(P＜0.05). 结论:电针“三阴”穴能够降低促炎症细胞因子活性,降低血管通透性,减少炎症细胞侵润,并提高局部抗氧化防御系统活性,从而抑制前列腺组织形态结构的损伤,减轻炎症反应,达到治疗目的.
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自身免疫性前列腺炎大鼠模型的建立
目的:使用前列腺蛋白提纯液建立自身免疫性前列腺炎大鼠模型. 方法:选用36只Wistar大鼠,随机分为对照组、低浓度组和高浓度组,每组12只.对照组注射生理盐水,低浓度和高浓度组实验大鼠于0、14 d分别注射等剂量15 mg/ml及80 mg/ml浓度的前列腺蛋白提纯液,4周后处死大鼠,前列腺组织HE染色,取大鼠外周血检测血清炎症因子IL-8、IL-10,血清免疫球蛋白IgA、IgM,辅助性T细胞Th1/Th2等指标. 结果:高浓度组有3只大鼠死亡,对照组与低浓度组均无死亡.前列腺大体观察对照组无明显变化,低浓度组大鼠前列腺体积增大,质地稍硬,高浓度组大鼠前列腺质地坚硬,与周围组织粘连.实验组病理切片显示前列腺组织腺体结构破坏,有炎性细胞浸润.大鼠血清IL-8指标低浓度组[(129.07±11.48) pg/ml]、高浓度组[(147.58±17.70) pg/ml]与对照组[(94.12 ±7.04) pg/ml]比明显升高(P＜0.05);大鼠血清IL-10指标低浓度组[(227.14±18.19) pg/ml]、高浓度组[(187.14±16.32) pg/ml]与对照组[(252.48 ±21.72) pg/ml]相比显著降低(P＜0.05).大鼠血清IgA与对照组[(0.19 ±0.14) mg/ml]相比,低浓度组[(0.25±0.37) mg/ml]和高浓度组[(0.31 ±0.42) mg/ml]明显升高(P＜0.05);大鼠血清IgM指标低浓度组[(0.23 ±0.41) mg/ml]、高浓度组[(0.34 ±0.58) mg/ml]与对照组[(0.17 ±0.33) mg/ml]相比,显著升高(P＜0.05).外周血辅助性T细胞Th1/Th2未见明显改变. 结论:低、高浓度组大鼠造模均获成功.使用低浓度的前列腺蛋白提纯液造模的动物死亡率低,病理改变及血清炎症因子变化符合自身免疫性前列腺炎的表现,可作为制备自身免疫性前列腺炎的可靠模型浓度.
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水飞蓟宾磷脂复合物对大鼠自身免疫性前列腺炎炎性细胞因子的影响
目的:研究水飞蓟宾磷脂复合物(SPC)对大鼠自身免疫性前列腺炎炎性细胞因子的影响.方法:将大鼠随机分为正常对照组、模型组、普适泰[26mg/(kg·d)]组和高、中、低剂量[84、42、21 mg/(kg·d)]SPC组,每组8只.除正常对照组外,其余各组采用免疫佐剂法建立大鼠自身免疫性前列腺炎模型,灌胃给予相应药物,连续给药30 d.检测各组大鼠末次给药24 h后前列腺、脾、胸腺的脏器指数,前列腺组织病理变化,血清中白细胞介素8(IL-8)、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平.结果:各组大鼠的脏器指数差异均无统计学意义(P＞0.05).与正常对照组比较,模型组大鼠的前列腺组织有明显炎症反应,血清中IL-8、IL-10、TNF-α水平均明显增加(P＜0.05);与模型组比较,普适泰组和中、高剂量SPC组大鼠前列腺组织的炎症反应均有好转,血清中IL-8、IL-10、TNF-α水平均明显减少(P＜0.05),低剂量SPC组大鼠血清中仅TNF-α水平明显减少(P＜0.05),其余指标间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:SPC能显著改善自身免疫性前列腺炎模型大鼠的免疫功能,并具有减轻前列腺免疫炎症反应的作用.
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大鼠慢性前列腺炎模型长时程形态学研究
目的:探讨大鼠慢性前列腺炎(Chronic pmstatitis,CP)模型长期造模后对前列腺形态学改变的影响.方法:选取SD大鼠,于0、30 d腹腔分别注射百白破疫苗,同时皮下多点注射20 g/L的大鼠前列腺蛋白提纯液及完全福氏佐剂(Freundg corn-plete adjuvant,FCA),第45、60、90、120天取材观察各组大鼠前列腺组织的形态学变化.结果:造模后不同时段前列腺组织学变化具有差异性.造模45 d后前列腺间质毛细血管周围出现淋巴细胞浸润,上皮细胞间隙增宽;60d和90 d后,间质水肿明显,出现肥大细胞浸润;造模后120 d出现间质纤维化,腺腔扩张等病理变化.结论:长期造模的不同时段可反映CP不同的病理学变化过程,提示大鼠CP模型不同时间段可分别用于不同病理生理阶段的发病机理和临床治疗研究.
