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转基因动物的食用安全性评价
转基因食品商业化进入市场前必须经过食用安全性和环境安全性评价.FAO/WHO专家提出,转基因动物的食用安全性评价基本上可以参照转基因植物的食用安全性评价程序,但要进行个案分析.鉴于动物与植物特性的不同,转基因动物的安全性评价又有其特异之处.本文对国内外转基因动物的食用安全性评价概况和进展作一综述.
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转基因大米的免疫毒理学评价
目的评价转基因大米和非转基因大米对小鼠免疫功能的异同.方法以转豇豆胰蛋白酶抑制剂(cowpea trypsin inhibitor,CpTI)基因大米和母系非转基因大米喂养BALB/C小鼠30天(均配成AIN-93G的全价营养饲料,并且含有大量的转基因大米或非转基因大米),比较各组小鼠的各项免疫毒理指标:体重、脏器指数、血常规、淋巴细胞分类、血清抗体滴度、空斑试验(PEC)、迟发型皮肤过敏反应(DTH)、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验.结果发现转基因大米和非转基因大米喂养的小鼠各项免疫毒理指标无差异.结论转基因大米对小鼠的免疫功能的影响与非转基因大米基本相同,转基因大米与非转基因大米在免疫毒理学方面的评价具有"实质等同性".
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转CpTI基因大米在五指山小型猪体内消化稳定性的初步研究
目的 建立五指山小型猪在体消化稳定性模型,评价转CpTI大米的胃肠消化稳定性.方法 在五指山成年猪体内同时安置胃、肠瘘管,通过经口喂饲途径,以大豆作为阳性对照,测定不同时间点消化液的pH,采用蛋白凝胶电泳法分析测定不同时间点消化产物中的蛋白片段,比较转CpTI大米和亲本大米消化产物的区别.结果 给样后胃液pH迅速中和至6.0左右,以后逐步降低,在4～6h后又开始回升,大豆引起胃液pH下降和回升时间均较米粉晚;13×103、17×103、34×103和50×103是大豆中几种相对消化稳定的蛋白片段,在5～6h的胃肠液中仍然能检测出高表达,其中50×103、34×103、17×103三个蛋白片段呈现胃液、肠液消化稳定性,而13kD呈现胃液消化稳定性;米粉给样0.25h后胃液中未检出任何耐受蛋白酶消化的片段或亚基,而亲本明恢86米粉和转CpTI基因米粉比较,无论是胃液或肠液中蛋白消化情况均无明显区别.结论 利用五指山小型猪建立的在体消化稳定性模型是可行的,转CpTI基因米粉与亲本米粉在五指山小型猪胃液、肠液中的消化稳定性具有等同性.
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转基因作物的安全性评价策略、现状及发展
基因重组技术赋予农业生产以巨大的活力,但转基因作物的安全性问题却不容忽视.有关国际组织及政府已达成共识:在"实质等同性"原则的基础上,应对转基因作物进行详尽周密的安全性评价工作.有关策略包括实质等同性分析、毒性实验、致敏性研究、营养学评价等,随着新技术的发展,基因组学、蛋白质组学、代谢组学等新技术也将用于对非目标效应的监测,欧盟已在酝酿上市后监测的一些措施.总之,转基因作物的安全性评价策略是十分严格的,且还在逐步完善.
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Cry1Ie基因在大肠杆菌中的表达及等同性鉴定
目的 以Cry1Ie基因表达蛋白为模式蛋白,建立外源基因表达蛋白的技术平台.方法 利用大肠杆菌系统高效表达Cry1Ie蛋白,并采用SDS-PAGE技术分离纯化,通过生物学活性和免疫反应性2项指标检测了大肠杆菌表达蛋白与转基因玉米中蛋白的等同性.结果 大肠杆菌表达系统可以产生大量的Cry1Ie蛋白,所获得的蛋白与转Cry1Ie玉米表达的Cry1Ie蛋白有相同的免疫反应性和生物活性.结论 大肠杆菌表达系统可以作为Cry1Ie外源基因蛋白表达技术平台用于转基因植物食用安全性的初步研究.
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转GmDREB1基因抗旱小麦T349的免疫毒理学评价
目的 评价转GmDREB1基因抗旱小麦T349的免疫毒性作用.方法 将250只6～8周龄、体重为18～22 g的SPF级雌性BALB/c小鼠按体重分层随机分为5个大组,每大组50只,每大组再按体重分层随机分为5组,每组10只,分别为阴性对照组、普通小麦组、亲本小麦组、转基因小麦组和环磷酰胺阳性对照组.阴性对照组和环磷酰胺阳性对照组以AIN-93G饲料喂养,普通小麦组、亲本小麦组和转基因小麦组以掺入相应小麦的饲料喂养.饲喂30 d后,检测小鼠的各项指标,包括体重、脏器系数、外周血淋巴细胞表型、血清细胞因子水平、血清免疫球蛋白水平、溶血空斑数、血清半数溶血值( HCso)、脾淋巴细胞增殖能力、迟发型超敏反应和吞噬细胞功能.结果 阴性对照组、普通小麦组、亲本小麦组、转基因小麦组、阳性对照组小鼠饲喂30 d后体重分别为(21.0±0.3)、(20.4±0.7)、(21.1±1.0)、(21.1±1.0)、(19.4±1.0)g (F=7.47,P＜0.01)；脾脏器系数分别为(0.407±0.047)％、(0.390±0.028)％、(0.402±0.042)％、(0.421±0.041)％、(0.304±0.048)％(F=12.41,P＜0.01)；胸腺脏器系数分别为(0.234±0.032)％、(0.246±0.028)％、(0.249±0.040)％、(0.234±0.034)％、(0.185±0.039)％ (F =5.58,P＜0.01)；小鼠外周血T淋巴细胞百分比分别为(70.43±4.44)％、(68.33±5.37)％、(73.04±2.68)％、(74.42±2.86)％、(90.42±1.66)％(F=57.51,P＜0.01)；B淋巴细胞百分比分别为(13.89±3.19)％、(15.34 ±4.84)％、(13.06±4.22)％、(12.93±2.36)％、(3.01±0.96)％(F=12.79,P＜0.01)；Th细胞百分比分别为(55.87±3.80)％、(55.24±4.60)％、(57.92±3.70)％、(59.57±2.54)％、(77.37±2.31)％(F=68.58,P＜0.01)；辅助性T细胞(Th)/抑制性T细胞(Ts)比值分别为4.16±0.29、4.73±0.96、4.19±0.78、4.52±0.40、6.34±0.73(F=17.57,P＜0.01)；小鼠血清IgG水平分别为(1046.38±210.67)、(1065.49±297.22)、(1517.73±299.52)、(1576.67±241.92)、(1155.88±167.05) μg/ml (F=10.53,P＜0.01)；小鼠血清IgM水平分别为(333.83±18.97)、(327.73±27.72)、(367.47±27.18)、(363.42±46.14)、(278.71±24.42) μg/ml (F=12.11,P＜0.01)；小鼠血清IgA水平分别为(51.69±10.10)、(42.40±8.35)、(32.11±4.22)、(37.12±4.90)、(41.45±8.89) μg/ml (F=8.25,P＜0.01)；小鼠溶血空斑数分别为(29.2±14.6)、(28.0±20.0)、(34.8±30.9)、(33.2±25.1)、(4.8±5.3)个/106个脾细胞(F=3.33,P＜0.05)；HC50值分别为82.3±6.5、79.7±4.6、75.8±4.1、74.9±3.6、70.8±2.1 (F=9.99,P＜0.01)；脂多糖诱导的脾细胞增殖能力分别为0.21±0.10、0.21±0.14、0.26±0.12、0.25 ±0.14、0.07±0.06(F=4.18,P＜0.05).结论 转GmDREB1基因抗旱小麦T349与亲本小麦对小鼠的免疫器官及免疫功能的影响具有实质等同性,无免疫毒性作用.
