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煤矿工尘肺结核患者结核分枝杆菌L型耐药基因rpoB序列分析
目的 探讨淮南矿区尘肺结核患者感染结核分枝杆菌L型利福平耐药基因rpoB突变特点.方法 收集结核分枝杆菌L型临床分离株42株,其中利福平耐药株31株,敏感株11株,抽提临床分离株DNA和H37Rv标准菌株DNA,PCR法扩增rpoB基因,并应用全自动DNA测序仪对rpoB基因的突变集中区域进行测序分析.结果 42株结核分枝杆菌L型中,31株耐药株rpoB基因突变率93.55%(29/31),主要集中在531位点(51.61%,16/31)和526位点(32.26%,10/31)碱基置换突变,新发现516位点突变目前在国内外研究中未见报道.11株敏感株未见rpoB基因单链构象异常.结论 高度保守的rpoB基因突变是导致结核分枝杆菌L型利福平耐药的分子基础,其突变位点呈多样性.
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肺癌组织中结核分枝杆菌L型MPB64基因的检测
目的 分析结核分枝杆菌L型及其MPB 64基因与肺癌发生的相关性并探讨其临床意义.方法 收集并分析新疆维吾尔自治区胸科医院2015至2017年收治入院的肺结核合并肺癌患者(n=77)为肺癌合并肺结核组,同时间段确诊为肺癌患者(n=80)和肺结核患者(n=80)分别为肺癌组和肺结核组.取纤维支气管镜取组织切片采用IK抗酸染色法检测标本中的结核分枝杆菌L型,采用原位分子杂交技术检测结核分枝杆菌L型MPB 64基因片段的存在及定位.其中77例肺结核合并肺癌患者和80例单纯肺癌患者按不同组织类型、不同组织学分级及不同病理分期检测结核分枝杆菌L型阳性率及其基因片段的表达情况.结果 患者一般资料比较结果显示,肺癌组和肺癌合并肺结核组在病理类型的比例分布上差异存在统计学意义(P<0.05).结核分枝杆菌L型的阳性检测率和MPB 64基因阳性表达存在明显差异,具有统计学意义(P=1.141,P=0.018).肺结核组与肺癌组MPB 64基因的表达情况无显著相关性(P=0.357);肺结核组与肺癌合并肺结核组MPB 64基因的表达情况存在相关性(P=0.033).肺癌组与肺癌合并肺结核组MPB 64基因的表达情况无显著相关性(P=0.586).结核分枝杆菌L型与肺癌病理类型相关性分析发现,结核分枝杆菌L型阳性率与鳞癌发生具有显著相关性(P<0.05).结论 结核分枝杆菌L型及其MPB 64基因与肺结核合并肺癌发生存在相关性,并且结核分枝杆菌L型感染与肺鳞癌发生具有显著相关性,临床上在肺癌或肺结核的诊断与治疗过程中应给与关注.
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结核分枝杆菌L型血流感染与肺癌患者红细胞免疫功能的相关性分析
目的 研究结核分枝杆菌 L型(TBL)血流感染与肺癌患者红细胞免疫功能改变存在的关联.方法 回顾性选取肺癌患者50例(其中TBL阳性者28例,阴性者22例),肺结核病人18例,健康人40例为对照组.采用溶血离心培养法和滴片法结合免疫酶染色检测结核患者血液中的分枝杆菌L型,采用常规方法测定并比较三组患者血清红细胞C3b受体花环促进率(RFER)、抑制率(RFIR)、红细胞沉降率(ESR)、免疫复合物花环率(ICRR)和红细胞C3b受体花环率(C3bRR).结果 肺癌组、肺结核组较对照组的RFER均明显降低,但肺癌组与肺结核组比较差异无统计学意义(P >0.05);三组之间RFIR互相比较,差异无统计学意义(P >0.05);TBL阳性组的ESR比TBL阴性组明显升高,差异有统计学意义(P <0.05);与TBL阴性组相比,TBL阳性组的ICRR和C3bRR显著偏低,差异有统计学意义(P <0.05);而两组的RFER均较对照组明显降低,差异有统计学意义(P <0.05).结论 结核分枝杆菌L型血流感染与肺癌患者红细胞免疫功能存在关联.
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某矿区煤工尘肺结核患者结核分枝杆菌L型的耐药性分析
对某矿区煤工尘肺结核患者痰标本分离的32株结核分枝杆菌L型进行回复试验及药物敏感性检测.结果有24株(75.0%)回复为细菌型;且32株L型均为耐药株,对INH、RFP、EMB、SM耐药率分别为75.0%、90.6%、78.1%、50.0%,其中多耐药株27株;单耐药株5株.提示开展结核分枝杆菌L型及药敏试验对指导临床用药有重要意义.
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浅述L型结核分枝杆菌检测在诊断结核病中的价值
目的：探讨L型结核分枝杆菌（MTB-L）检测在诊断结核病中的价值。方法：选取2012年7月～2014年7月期间在我院就诊的44例普通结核病患者、44例耐药结核病患者、44例耐多药结核病患者和44例健康体检者作为研究对象，将44例普通结核病患者作为研究1组，将44例耐药结核病患者作为研究2组，将44例耐多药结核病患者作为研究3组，将44例健康体检者作为对照组。我们采用荧光定量PCR法对这四组人员的痰液标本进行MTB-L检测，然后对检测的结果进行统计分析。结果：在对照组的44例健康体检者中，有1例健康体检者MTB-L的检测结果呈阳性，其MTB-L的阳性检出率为2.3%。在研究1组的44例患者中，有25例患者MTB-L的检测结果呈阳性，其MTB-L的阳性检出率为56.8%。在研究2组的44例患者中，有32例患者MTB-L的检测结果呈阳性，其MTB-L的阳性检出率为72.7%。在研究3组的44例患者中，有39例患者MTB-L的检测结果呈阳性，其MTB-L的阳性检出率为88.6%。研究3组患者MTB-L的阳性检出率明显高于对照组健康体检者、研究1组患者和研究2组患者，组间相比差异具有显著性（P<0.05）。研究2组患者MTB-L的阳性检出率明显高于对照组健康体检者和研究1组患者，组间相比差异具有显著性（P<0.05）。研究1组患者MTB-L的阳性检出率明显高于对照组健康体检者，组间相比差异具有显著性（P<0.05）。结论：罹患结核病的患者，其MTB-L的阳性检出率会明显升高，且随着耐药性的产生，其MTB-L的阳性检出率会进一步提高。此类情况应引起临床医生的注意。
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PCR-SSCP法检测结核分枝杆菌L型rpsL耐药基因
目的 探索尘肺结核患者感染的结核分枝杆菌(MT)L型的耐药基因rpsL突变与耐受链霉素(SM)的关系.方法 用PCR-SSCP方法检测rpsL基因,与采用常规SM药敏试验(AST法)的结果进行对比分析.结果 采用AST法检测,52株结核分枝杆菌L型临床分离株中共有26株(50.0%)耐SM;PCR-SSCP法检出rpsL基因突变率为40.4%(21/52),2种方法检测耐药株的符合率为80.8%.结论 结核杆菌L型对SM的耐药与rpsL基因突变有关.
关键词： 尘肺 结核分枝杆菌L型 耐药 rpsL基因 聚合酶链反应-单链构象多态性分析 -
结核分枝杆菌L型感染对结核病患者耐药状况的影响
目的：分析深圳市罗湖辖区结核病患者分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis, MTB)及其L型( MTB-L)的耐药状况,探讨MTB-L感染对结核病患者耐药状况的影响。方法收集确诊的960例患者(初治916例,复治44例)痰液标本,对其中涂片染色阳性的468例标本进行培养,并对培养阳性的标本进行异烟肼、链霉素、利福平和乙胺丁醇等四种一线药物药敏试验,比较MTB和MTB-L耐药率的差异。结果 MTB-L和MTB对四种一线药物的单耐药率、多耐药率和耐多药率均不同；MTB-L初治始耐药率显著高于MTB初治始耐药率(46．7% vs 22．4%, P<0．05)；MTB-L复治耐药率略高于MTB复治耐药率,但差异无统计学意义(46．7% vs 33．3%, P>0．05)。结论 MTB-L感染可能与结核病患者耐药状况改变和耐药率增高有关,加强MTB-L感染监测和耐药分析是当前结核病防控的重要策略之一。
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结核分枝杆菌L型检测对比噬菌体D29在结核病诊断和治疗的价值
目的 结核分枝杆菌L型(MTB-L)检测对比噬菌体D29在结核病诊断和治疗上的价值.方法 用噬菌体D29生物扩增法和改良痰IK抗酸染色涂片法、BACTEC MGIT960培养法、结核分枝杆菌L型培养法,对206例活动性结核病患者和160例非活动性结核病患者的晨痰进行结核分枝杆菌L型检测.结果 与噬菌体D29生物扩增法相比较,改良痰IK抗酸染色涂片法和BACTEC MGIT960培养法在MTB-L检测上的灵敏度较低(P＜0.0167),噬菌体D29生物扩增法较之MTB-L培养法,特异度差异不大.噬菌体D29对非活动性结核病患者的MTB-L检出率为26.9％;对结核病复治患者的MTB-L检出率为78.8％,显著高于初治患者的检出率51.6％ (P ＜0.05);对耐药结核病患者的MTB-L检出率为83.8％,显著高于药敏患者检出率39.6％ (P ＜0.05).结论 噬菌体D29在结核分枝杆菌L型的检测上具有灵敏度高、特异性高、方便快捷的特点,适合在结核病诊断上推广.噬菌体D29具有开发成为对抗结核病复发和耐药药物的潜力.
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用聚合酶链反应单链构象多态性分析技术检测结核分枝杆菌L型的rpoB基因突变
目的:探索结核分枝杆菌L型的耐药基因rpoB突变与利福平耐药性的关系,以及聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术的临床应用价值.方法:收集结核分枝杆菌L型菌株52株,采用PCR-SSCP方法检测rpoB基因,与采用常规药敏试验法检测利福平耐药的结果进行对比分析.结果:采用常规法检测,52株临床分离株中有38株利福平耐药,耐药率为73.08%(38/52);PCR-SSCP方法对52株临床耐药株rpoB基因突变的检出率为65.38%(32/52),两种方法检测耐利福平的符合率为84.21%.结论:PCR-SSCP对利福平耐药的结核分枝杆菌L型菌株检出率较高,将其与常规药敏试验联合应用,是一种指导临床用药的好方法.
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3种方法检测结核分枝杆菌L型的诊断特性比较
目的:比较结核分枝杆菌L型的3种检测方法的诊断意义.方法:对103例耐多药肺结核患者的痰标本分别采用萋-尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法、聚合酶链反应(PCR)和结核分枝杆菌L型培养法进行检测.通过计算敏感度、特异度和阳性率指标,判断联合检测的准确程度和可靠程度.结果:结核分枝杆菌L型培养与抗酸染色法联合检测准确程度高于与PCR的联合检测,敏感度和特异度同时达到 100%;L型培养法重复检测一次Bayes阳性预告率也达 96.2%.结论:结核分枝杆菌L型培养与抗酸染色法联合检测准确程度高,重复性好.
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耐多药肺结核与结核分枝杆菌L型感染的临床研究
目的: 探讨结核分枝杆菌L型在耐多药肺结核形成及治疗过程中的变化规律,提高痰菌阴性肺结核的阳性诊断率.方法: 对60例耐多药肺结核,40例无耐药初治肺结核病人分别于治疗前,治疗1个月,治疗3个月做痰结核分枝杆菌培养和结核分枝杆菌L型检测.结果: 初治无耐药肺结核分枝杆菌L型阳性率(12.5%)明显低于耐多药肺结核(53.3%).随着耐药种类的增多,结核分枝杆菌L型阳性率增高;痰菌阴性的肺结核患者痰结核分枝杆菌L型仍可阳性.结论: 耐多药肺结核病人有较高的结核分枝杆菌L型感染率;复治,病情进展恶化,耐药病例与结核分枝杆菌L型感染有关.
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改良痰结核分枝杆菌L型涂片检测方法的建立和应用
目的 建立一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分枝杆菌L型的涂片染色检测方法.方法 对常规的抗酸染色法进行方法学改良,以特异性基因扩增诊断法为标准,分析评价改良方法的灵敏度、特异性和总有效检出率等统计学指标；分别采用本改良抗酸染色法(以下简称本改良法)、常规抗酸染色法和改良IK抗酸染色法检测468例临床标本,对三种方法的阳性检出率进行统计学比较.结果 本改良法阳性检出率与特异性基因扩增诊断法、改良IK抗酸染色法比较均无明显差异(x2=0.25,P=0.6171；U=0.155,P=0.4404),但明显高于常规抗酸染色法(U=3.713,P＜0.0010)；本改良法灵敏度、特异性和总有效检出率与改良IK抗酸染色法相似,但高于常规抗酸染色法.同时,本改良法所需时间少于改良IK抗酸染色法(5 min vs 24 h).结论 成功建立了一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分支杆菌L型的涂片染色检测方法,适合临床推广应用.
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煤工尘肺患者结核分枝杆菌L型感染状况分析
肺结核是煤工尘肺常见的并发症,煤工尘肺合并结核后两者互相促进,不仅尘肺进展很快,而且结核病也容易恶化,影响预后.
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改良痰结核分枝杆菌L型培养方法的建立和临床应用
目的 对改良TSA-L培养基进行改进,建立一种配方简单、成本低廉及适合结核分枝杆菌L型(Mycobacterium Tuberculosis L forms,MTB-L)快速生长的培养方法.方法 在改良TSA-L培养基中加入适比例的有利于分枝杆菌生长的卵磷脂(Lecithin)和胆固醇(Cholesterin),制备LC-MTB-L培养基;采用改良TSA-L培养基和LC-MTB-L培养基接种培养肺科门诊患者痰标本,比较两种培养基的MTB-L阳性检出率和培养阳性所需时间.结果 LC-MTB-L培养基中卵磷脂和胆固醇的适加入量均为0.6 g;LC-MTB-L培养基MTB-L阳性检出率显著高于改良TAS-L培养基(P＜0.05),同时其培养阳性所需时间显著低于改良TAS-L培养基(P＜0.05).结论 LC-MTB-L培养基配方简单、成本低廉、MTB-L生长快速,适合临床推广应用.
