首页 > 文献资料
-
北京市农村人群及家畜嗜吞噬无形体和查菲埃立克体感染状况调查
目的 调查北京市农村人群及家畜新发查菲埃立克体和嗜吞噬无形体感染状况.方法 按地理位置选择北京市西北(延庆)、东北(密云)及东南(通州)地区3个植被率较高的旅游县(区).按在册户籍随机以家庭为单位,调查并采集562人及90只山羊、71头牛和2只家犬血液标本,按WHO推荐间接免疫荧光方法(mIFA)检测血清IgG抗体.动物血球提取DNA扩增无形体16S rRNA基因并测序分析.结果 人群查菲埃立克体和嗜吞噬无形体抗体阳性率分别为16.5％和14.0％；山羊和牛嗜吞噬无形体抗体阳性率分别为2.3％和0；2只家犬未检测到相应抗体.山羊、牛无形体16S rRNA扩增阳性率分别为48.9％和23.9％.16S rRNA序列(228 bp)分析显示,3类优势流行株无明显地理分布特征.结论 北京市农村人群存在查菲埃立克体和嗜吞噬无形体感染,调查地区家畜存在无形体感染.
-
免疫荧光法检测杆状病毒滴度的建立及验证
目的 建立并优化生产用重组杆状病毒滴度间接免疫荧光检测方法,并进行初步验证.方法 将96孔板贴壁培养的SF9细胞,接种杆状病毒溶液共孵育一定时间后间接免疫荧光法显色.通过对细胞使用浓度、孵育时间及优化显色处理条件(固定液、封闭液、抗体种类及使用条件),建立杆状病毒滴度间接免疫荧光检测方法,进行特异性、准确性、重复性和中间精密度验证,并与杆状病毒滴度酶联检测试剂盒检测结果进行比较.结果 细胞使用浓度为0.6×106个/ml、共孵育时间为3d;显色条件优化后确定了冰冻甲醛-丙酮溶液为适固定溶液和5％的山羊血清封闭液,一抗和二抗稀释比例均为1:200、37℃温育1 h时显色效果佳.用该方法检测不同样品,仅杆状病毒组出现特异性荧光斑点.本方法与试剂盒酶联法检测结果趋势相同,其线性相关系数R2=0.996,表明两种方法具有良好的正相关性;重复性及中间精密度验证结果的变异系数CV均<10％.结论 建立了重组杆状病毒滴度的间接免疫荧光检测方法,该方法具有良好的特异性、准确性、重复性和中间精密度,可用于生产中病毒滴度的检测.
-
抗磷脂酶A2受体抗体检测在老年人特发性膜性肾病肾组织及血液中的表达
目的：探讨血液中抗磷脂酶A2受体抗体（anti－PLA2R）在老年人特发性膜性肾病（IMN）诊断中的意义。方法分别应用免疫组织化学方法和间接免疫荧光方法检测老年人IMN患者肾活检组织anti－PLA2R和血液中anti－PLA2R的表达情况，分析其相关性。结果肾活检组织中anti－PLA2R敏感性为75．0％，特异性为95．0％；血液中的anti－PLA2R敏感性为77．5％，特异性为95．0％；血液与肾活检组织中anti－PLA2R结果的相关性分析，阳性符合率96．9％，阴性符合率96．6％，总符合率98．3％；Kappa一致性检验，Kappa＝0．996，P＜0．001。结论间接免疫荧光方法检测血液中的anti－PLA2R水平与免疫组织化学方法检测肾活检组织中anti－PLA2R的表达呈正相关，可成为体外诊断老年人IMN的特异性指标。
-
DJ-1蛋白在喉鳞状细胞癌与Hep-2细胞系表达
[目的]探讨DJ-1基因在喉鳞状细胞癌组织及Hep-2细胞系中的表达特征.[方法]采用间接免疫荧光方法,检测15例喉鳞状细胞癌手术切除癌组织、癌旁组织、正常黏膜标本和Hep-2细胞系的DJ-1蛋白.[结果]喉鳞状细胞癌组织与Hep-2细胞系中DJ-1蛋白均有表达;DJ-1蛋白在喉鳞状细胞癌组织的表达水平分别高于癌旁组织、正常黏膜组织,差异有统计学意义(F=8.098,P=0.002);低分化喉癌较高分化喉癌的DJ-1水平增高,差异有统计学意义(t=3.099,P=0.008);喉癌的临床分期和年龄与DJ-1蛋白的表达没有相关性(t=0.476,P=0.642;t=0.019,P=0.985).[结论]喉鳞状细胞癌组织及Hep-2细胞系中均有DJ-1蛋白的表达,喉鳞癌组织内的表达高于癌旁组织和黏膜组织;DJ-1基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达可能提示它参与了喉癌的发生发展的有关过程,为基因治疗提供了理论基础.
-
两种方法检测抗dsDNA抗体结果比较
抗dsDNA抗体对诊断风湿免疫病(SLE)有较高的特异性,已成为SLE的重要诊断标准之一.其检测常用间接免疫荧光方法,需要荧光显微镜特殊仪器.
