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mxA基因多态性与SARS病毒易感性的病例对照研究
目的探讨黏病毒抗性蛋白1(MxA)基因多态性与人群严重急性呼吸综合征(SARS)发病间的关系.方法采用病例对照研究,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析检测mxA基因启动子-88位G/T多态性位点,对SARS传播的相关因素进行问卷调查,并用SPSS软件进行单因素和多因素分析.结果选取了66例SARS病例和64名对照进行研究.与GG基因型相比,含等位基因T的基因型(GT+TT)在病例中的构成比(81.3%)显著高于对照组(62.5%),OR值(95%CI)为2.700(1.208～6.037).多因素logistic回归分析结果表明,在调整了与SARS病例接触时戴口罩,穿防护服,戴眼罩等相关因素后,与GG基因型相比,含等位基因T的基因型(GT+TT)仍与SARS发病有显著性关联,调整OR值(95%CI)为2.911(1.027～8.250).结论 mxA基因启动子-88位G/T多态性可能与中国汉族人群SARS发病的基因易感性有关.
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MxA基因启动子多态性及替比夫定抗病毒治疗HBeAg血清学转换关系的研究
目的 对MxA基因启动子多态性及HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者应用替比夫定抗病毒治疗HBeAg,进一步分析遗传因子在乙肝病毒临床诊疗中发挥作用.方法 选取2013年3月-2016年9月于医院采取替比夫定治疗的135例C HB患者明确为研究对象,依据连续治疗的乙肝病毒学应答结果将患者分为完全应答(CR)组和非完全应答(NCR)组,并对两组患者的临床指标和人口学差异进行对比分析;根据M xA基因启动子的序列,扩增目的片段后直接测序进行基因分型,从而找出替比夫定抗病毒治疗HBeAg血清学转换相关联的阳性位点.结果 135例患者应用替比夫定治疗105周后,显示CR组为75例,NCR组60例;CR组患者的平均年龄低于NCR组(P=00.17);CR组患者在rs2071430位点的T等位基因频率比NCR组患者高(P=00.27);MxA基因启动子区rs2071430(-88G/T)次要等位基因频率为274.％,rs17000900(-123 C/A)次要等位基因频率为131.％,与Hardy-Weinberg平衡定律计算的预期值之间差异无统计学意义,分布均符合Hardy-Weinberg平衡.结论 M xA的基因启动子rs2071430与HBeAg阳性及替比夫定抗病毒治疗后血清学转换存在相关性;携带T等位基因的患者比携带G等位基因的患者HBeAg血清学转换更容易,T等位基因表现出更强的启动子活性.
关键词： 慢性乙型肝炎 mxA基因 HBeAg血清学转换 替比夫定 -
MxA基因多态性与病毒性疾病研究进展
粘病毒抗性蛋白A(Myxovirus Resistance Protein A,MxA)是干扰素(Interferon,IFN)诱导蛋白之一,该蛋白具有抗多种病毒的活性.研究发现,编码MxA蛋白的基因具有多态性,MxA基因启动子区的单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)能影响其转录及蛋白的表达,并且与病毒性疾病的发病和IFN治疗效果密切相关,本文对此进行综述.
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我国汉族人群MxA基因-88位点的基因多态性研究
[目的]研究我国汉族人群MxA基因-88位点的基因多态性.[方法]采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)方法进行MxA基因-88位点的基因多态性(SNP)分型.[结果]我国汉族人群MxA基因-88位点的GG、GT、TT基因型构成分别为47.3%、43.5%和9.2%,与越南和日本的基因型构成无差别(x2=1.56,P=0.816).同时,该位点的G和T等位基因构成分别为69%和31%,与越南和日本的人群该位点的等位基因构成相近(x2=0.49,P=0.783).[结论]我国汉族人群MxA基因-88位点的基因多态性与其他民族可能相同.
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MxA基因真核表达载体构建及体外抗HBV作用研究
目的 克隆人类MxA基因,探索其细胞内直接抗HBV作用,以便寻求HBV及其他病毒感染的新的基因治疗靶点.方法 以pHMG-MxA质粒载体为基础,构建人类MxA基因表达质粒,采用人HBV-DNA转染的2.2.15细胞株作为研究对象,以不同浓度的MxA基因转染进行干预培养,hmivudine(3TC)阳性对照,同时设立空白对照,观察对HBV表达和复制的影响.结果 经过酶切鉴定证明重组MxA基因表达质粒pcDNA-MxA构建正确,转染2.2.15细胞后呈现出明显抑制HBV复制和表达作用,且与转染剂量有关;3TC组也见MxA的表达增高.HBV-DNA复制受到明显抑制.结论 抗病毒基因MxA具有细胞内抗HBV的复制及抑制病毒抗原基因的表达作用.
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MxA抗病毒蛋白的研究进展
MxA 抗病毒蛋白是由I 型干扰素( IFNα/β) 诱导产生的分布于细胞质中的蛋白质,具有广谱的抗病毒作用,对多种RNA 病毒和部分DNA 病毒均有抑制作用.活化的MxA发挥对病毒核衣壳的水解作用,以阻止病毒对细胞的吸附与穿入.MxA 基因多态性对不同个体的病毒性疾病发病、IFN 的治疗效果及预后产生重要影响.MxA基因(蛋白)具有极大的临床应用价值和广阔的研究前景.
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人MxA基因重组腺病毒载体的构建及鉴定
目的:克隆中国人MxA基因并构建含有MxA基因的重组腺病毒载体,为下一步应用其进行抗乙型肝炎基因治疗研究奠定基础.方法:从健康中国人外周血中分离单个核细胞,用Trizol试剂提取总RNA.应用逆转录PCR(RT-PCR)方法,以自行设计的引物扩增全序列MxA基因,应用基因克隆技术将MxA基因克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack(携带有绿色荧光蛋白基因)中,将线性化的pAdTrack-MxA和腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共同电转化入新鲜感受态大肠杆菌BJ5183中,两者在其中完成同源重组,MxA重组腺病毒质粒经卡那霉素抗性鉴别和PacI酶切确证,验证正确的MxA重组腺病毒线性化转染入293细胞中包装成完整病毒颗粒,观察绿色荧光蛋白(GFP)表达并检测重组腺病毒的病毒滴度.结果:重组腺病毒穿梭质粒pAd-Track-MxA连接成功,测序结果表明克隆的MxA基因序列与GenBank中人MxA基因序列仅有5个核苷酸不同但所编码氨基酸仅1个发生改变,且此氨基酸位于非功能区.MxA重组腺病毒经PacI酶切后产生30kb和4.5kb大小2个片段表明同源重组成功.重组腺病毒经293细胞包装后可观察到绿色荧光,收获病毒并测感染滴度为1.59×108(pfu/m1),具有较高感染效率.结论:我们已成功克隆了中国人的MxA基因,并成功构建重组腺病毒质粒,为进一步应用此基因进行抗乙型肝炎基因治疗研究奠定了基础.
