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Pin 1基因单核苷酸多态性与阿尔茨海默病的关联研究
目的 探讨中国汉族人群中Pin 1基因单核苷酸多态性与阿尔茨海默病的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测107例阿尔茨海默病(AD)患者及110名正常对照的Pin 1基因rs2233678位点(-842)基因多态性,进行两组的比较并分析各基因型与年龄、性别、疾病严重程度的关系.结果 AD组和对照组基因型频率及等位基因频率差异均无统计学意义(P=0.098,P=0.10),进一步将样本按年龄和性别分层也未发现两组间的差异有统计学意义(P>O.05).不同基因型组间的简易智能状态检查(MMSE)评分的差异无统计学意义(P>O.05),提示其与AD疾病严重程度不相关.结论 未发现中国汉族人群中Pin 1基因rs2233678位点多态性与AD关联.
关键词： 阿尔茨海默病 pin 1基因 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性 单核苷酸多态性 -
Neurogenesin 1基因对脊髓损伤大鼠运动功能的影响及机制探讨
目的 观察Neurogenesin 1(Ng1)基因对大鼠脊髓损伤后功能恢复的影响,并初步探讨其可能机制. 方法 4月龄SPF级SD大鼠36只,体重约230 g,雌雄不限,随机分为实验组和对照组(n=18).采用改良Allen法制备大鼠T_(10)脊髓损伤模型,通过Alzet微渗透压泵分别向实验组和对照组持续转染重组Ng1质粒和空白质粒各5μg.术后1 d及1、2、3、4周采用BBB运动功能评分系统检测大鼠运动功能恢复情况;术后1周分别采用RT-PCR和Western blot方法检测Ng1 mRNA及蛋白的表达:并于术后2、4周采用免疫荧光双标染色和组织学观察Ng1基因对内源性神经干细胞增殖的影响以及脊髓组织病理变化情况. 结果 自术后1周起实验组BBB评分明显高于对照组(P＜0.05);术后4周实验组运动功能评分为(16.80±1.79)分,对照组为(9.60±1.67)分,差异有统计学意义(P＜0.01).RT-PCR和Western blot方法检测显示实验组大鼠脊髓组织均见Ngi mRNA与蛋白的表达,对照组无表达.组织学观察示实验组脊髓结构以及神经元形态恢复较好且逐渐趋于正常,且免疫荧光双标染色示实验组脊髓组织中新增殖的神经干细胞数较对照组明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 Ng1基因能够诱导脊髓损伤后内源性神经干细胞大量增殖,保护受损伤神经元,促进脊髓运动功能修复.
关键词： Neurogenesin 1基因 神经干细胞 脊髓损伤 大鼠 -
荧光定量PCR法检测不同状态下铜绿假单胞菌int I 1基因的表达
目的 检测铜绿假单胞菌I类整合酶基因(int I l基因)在生物膜状态和浮游状态表达水平的差异,探讨整合子的作用机制.方法 对3株I类整合酶阳性的铜绿假单胞菌分别进行液相培养和生物膜细菌培养,常规方法提取3株细菌两种生长状态的总RNA.采用荧光定量PCR(FQ-PCR) ,以细菌的16s rRNA为内参照,分别测定菌株SW07、R07和THl2的浮游细菌和生物膜细菌int I 1 mRNA的相对表达量,比较3株菌在两种状态下intI 1 mRNA的表达水平.结果 3株铜绿假单菌的生物膜细菌和浮游细菌都检测到int I l基因的表达.3株菌在两种状态下intI 1 mRNA的表达量不同,生物膜细菌inf I 1基因的表达水平较高,其中菌株R07、SW07和THl2的生物膜细菌int I 1 mRNA的表达量分别较浮游细菌高1.4、5.7和128倍.结论 在生物膜状态下,铜绿假单胞菌intI 1基因的表达上调,本实验结果提示整合子在生物膜细菌中可进行更加活跃的基因盒捕获和积累,整合子和细菌生物膜的形成是导致细菌对抗生素耐药的重要机制.
