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枸杞子提取液对RCS大鼠遗传性视网膜变性的作用
目的 观察枸杞子提取液(LBA)对RCS大鼠遗传性视网膜变性的治疗作用.方法 出生后RCS大鼠24只,随机分为对照组和治疗组,每组12只.治疗组RCS大鼠出生后10 d开始喂食1 mg/kg的LBA, 对照组正常饲养.两组大鼠分别在出生后25、35、45 d取眼球,制备组织切片,应用苏木精-伊红(HE)染色和TUNEL染色观察视网膜感光细胞坏死和凋亡情况,并应用免疫组化方法检测Caspase-2的表达.结果 治疗组大鼠出生后25 d 和35 d时TUNEL染色阳性细胞与对照组相比明显减少(t=3.33～6.72,P<0.05);治疗组和对照组大鼠生后25～45 d时Caspase-2在节细胞层和内核层均有表达,但在25 d时治疗组与对照组相比明显减少(t=6.33,P<0.05).结论 在RCS大鼠遗传性视网膜变性的早期,LBA通过抑制细胞凋亡及Caspase-2表达对神经元起保护作用.
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枸杞子提取液对体外培养小鼠早期胚胎发育的影响及机制探讨
目的 观察枸杞子提取液对小鼠早期胚胎发育的影响,探讨枸杞子治疗不孕不育的机制.方法 将枸杞子分别用水提法和醇提法提取,以2.5、5.0、10.0 μg/mL提取液作为培养液添加剂,以常规培养液为对照,与促排卵交配后雌性小鼠体内回收到的2细胞胚胎共培养;观察小鼠早期胚胎发育的变化,实时定量PCR法检测囊胚转录因子Oct4、Nanog、Klf4、Cdx2基因.结果 与常规培养液比较,5.0、10.0μg/mL枸杞子水提取液培养的小鼠8细胞卵裂率高(P均＜0.01),而10.0 μg/mL时囊胚形成率高(P＜0.05);5.0、10.0 μg/mL枸杞子醇提取液培养的小鼠8细胞卵裂率和囊胚形成率均高(P均＜0.01).与常规培养液比较,不同浓度枸杞子水提取液培养的囊胚Oct4、Klf4、Nanog基因表达降低,但仅Nanog在10.0 μg/mL时有统计学意义,5.0、10.0 μg/mL时Cdx2基因表达量升高(P均＜0.01);5.0、10.0 μg/mL枸杞子醇提取液培养的囊胚Oct4、Nanog、Klf4基因表达增高而Cdx2基因表达降低(P均＜0.01).结论 枸杞子水提取液和醇提取液均能促进体外培养小鼠早期胚胎的发育,可能与其提高胚胎质量和植入后胚胎的发育潜能有关.
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枸杞子提取液对单眼视觉剥夺性弱视大鼠视网膜的保护作用
目的:观察枸杞子提取液(LBA)对视觉剥夺性弱视大鼠视网膜的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法:新生Wistar大鼠21只,雌雄不限.随机分为空白对照组(5只)、治疗对照组(8只)及治疗组(8只).1周后,缝合治疗对照组及治疗组大鼠单侧眼睑,建立动物模型.4周后,拆除手术缝线,并给予治疗组大鼠LBA1 mg/kg治疗,每日一次.空白对照组及治疗对照组自由进食.6周后处死所有大鼠,摘取眼球.应用伊红-苏木素(HE)染色观察视网膜的改变;应用TUNEL检测视网膜细胞凋亡的状况;应用免疫组织化学检测Bcl-2蛋白(Bcl-2)、Bax蛋白(Bax)及caspase-3在视网膜细胞的表达.结果:与空白对照组相比,治疗对照组Bax及caspase-3的表达明显增强(P<0.05),Bcl-2的表达明显减弱(P<0.05);与治疗对照组比较,治疗组Bax及caspase-3的表达均明显减弱(P<0.05);而Bcl-2的表达明显增强(P<0.05).结论:LBA对视觉剥夺性弱视大鼠视网膜在视觉发育可塑期内可能具有保护作用,其机制可能与上调Bcl-2、下调Bax及抑制caspase-3的表达,减少细胞凋亡有关.
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枸杞子提取液对RCS大鼠遗传性视网膜色素变性的神经保护作用
为了观察枸杞子提取液(LBA)对RCS大鼠遗传性视网膜色素变性的治疗作用,将出生后的24只RCS大鼠,随机分为对照组和实验组,每组12只.在实验组RCS大鼠出生后10 d开始喂食1 ms/kg LBA,对照组正常饲养.对照组和实验组RCS大鼠分别在出生后25、35、45 d处死,应用HE染色和TUNEL检测观察视网膜感光细胞的坏死和凋亡,并应用免疫组化的方法检测Caspage-2的表达.结果显示:RCS大鼠实验组25 d和35 d时TUNEL检测阳性细胞数目与对照组相比明显减少(P＜0.05);实验组和对照组大鼠生后25 d和50 d时Caspage-2在节细胞层和内核层均有表达,但在25 d时实验组比对照组明显减少(P＜0.05).上述结果提示:在RCS大鼠视网膜变性的早期,LBA通过抑制细胞的凋亡对神经元起保护作用,可以使感光细胞得到更多存留,Cospage-2可促使视网膜变性,LBA则可通过抑制其表达对早期变性的神经无发挥保护作用.
