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HPLC测定六味地黄颗粒中马钱苷的含量
六味地黄颗粒系由熟地黄、牡丹皮、山茱萸等6位中药材制成的颗粒剂.为了控制六味地黄颗粒的质量,保证临床用药效果,对六味地黄颗粒的含量测定方法进行了研究.本文以马钱苷为指标,采用高效液相色谱法测定其含量,该方法灵敏、重现性好.
关键词： 六味地黄颗粒 马钱苷 高效液相色谱法(HPLC) -
HPLC法测定六味地黄颗粒中马钱苷的含量
目的:采用HPLC法测定六味地黄颗粒中马钱苷的含量.方法:色谱柱为Hypersil C18(4.6mm×25mm,5μm),流动相为四氢呋喃-乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液(1:8:4:87),检测波长为236nm,柱温40℃,理论板数按马钱苷峰计算应不低于4000,进样量10μL,外标法定量.结果:马钱苷在6.000～60.000μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=1.0000),平均回收率为99.3%,RSD=0.79%(n=9).结论:本法简便、快速、准确,可作为该制剂含量测定的方法.
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HPLC法测定六味地黄颗粒中熊果酸的含量
目的:建立HPLC法测定六味地黄颗粒中熊果酸含量的方法.方法:采用PhenomenexC18(250×4.6mm,5μm)色谱柱;乙腈-甲醇-水-醋酸铵(68:10:22:0.5)为流动相;柱温30℃;流速1.0ml·min-1;检测波长220nm.结果:该方法在0.11mg/ml～1.10mg/ml浓度范围内具有良好的线性关系,R=0.99985;平均回收率为95.94%,RSD(%)=0.75%.结论:该方法准确,可靠,重复性好,可作为六味地黄颗粒质量控制方法.
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HPLC测定六味地黄颗粒中马钱苷和丹皮酚含量
目的:建立六味地黄颗粒(熟地黄,山茱萸,牡丹皮,山药,等)中马钱苷和丹皮酚的HPLC含量测定方法.方法:采用DICINEX Acclaim色谱柱,马钱苷以乙腈-水(15:85)为流动相,检测波长为236 nm;丹皮酚以甲醇-水(70:30)为流动相,检测波长为274 nm.结果:马钱苷和丹皮酚的线性范围分别为2.34～234 μg/mL(r=0.999 99)、7.07～141.40μg/mL(r=0.999 6),平均回收率分别为100.06%(RSD为3.10%,n=9)、95.75%(RSD为0.65%,n=6).结论:该方法操作简便准确,重现性好,能有效控制六味地黄颗粒的质量.
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气相色谱法测定六味地黄颗粒中丹皮酚的含量
目的测定六味地黄颗粒中丹皮酚的含量.方法采用毛细管气相色谱法,以正十六烷为内标.结果丹皮酚在2.2 μg～11.0 μg范围内呈线性关系,测得平均回收率为102.14%,RSD为1.98%.结论该方法灵敏、准确、可靠,可用于该制剂质量控制.
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HPLC法测定六味地黄颗粒中丹皮酚的含量
六味地黄颗粒系收载于<中国药典>2005年版一部[1]的品种,为进一步提高并控制其药品质量,选择方中牡丹皮的有效成分丹皮酚的质控指标,进行了质量标准的研究工作.本文采用HPLC法建立了制剂中丹皮酚的含量测定方法,经方法学验证,本法排除了其它中药成分对丹皮酚测定的干扰,重现性良好,可作为本制剂质量控制方法.
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六味地黄颗粒对哮喘大鼠EGF及其受体影响的研究
目的 探讨六味地黄颗粒对哮喘大鼠肺组织EGF、EGFR蛋白表达量的影响.方法 以卵清白蛋白建立哮喘大鼠模型并分组,通过HE染色观察并检测大鼠支气管壁厚度;免疫组织化学法检测各组EGF、EGFR蛋白表达量.结果 HE染色显示哮喘模型对照组支气管壁厚度和支气管平滑肌厚度均明显高于空白对照组;空白对照组支气管壁厚度和支气管平滑肌厚度数值低,六味地黄颗粒辅助地塞米松组、六味地黄颗粒治疗组则介于空白对照组和哮喘模型对照组之间,且这四组的两两比较均有统计学意义;哮喘模型对照组的EGF蛋白表达明显高于其余各组,六味地黄颗粒辅助地塞米松组EGF表达量低,明显低于空白对照组;仅发现哮喘模型对照组EGFR表达明显高于其余各组,空白对照组分别与六味地黄颗粒辅助地塞米松组、地塞米松治疗组、六味地黄颗粒治疗组比较,均无统计学意义.结论 六味地黄颗粒可通过下调EGF、EGFR的表达量以拮抗气道重塑.
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六味地黄颗粒对哮喘大鼠转化生长因子-βⅠ、Ⅱ型受体影响的研究
目的 探讨六味地黄颗粒对哮喘大鼠肺部TGF-βR Ⅰ、TGF-βRⅡmRNA含量的干预作用;方法 逆转录-荧光实时定量PCR法检测大鼠肺组织TGF-βR Ⅰ、TGF-βRⅡmRNA含量,比较正常组、哮喘模型组、各用药组之间两个指标水平的差异;结果 联合用药组的大鼠肺组织TGF-βR Ⅰ、TGF-βRⅡmRNA接近,均接近于于正常组,且显著低于模型组;结论 六味地黄颗粒能够协同激素类药物,下调哮喘大鼠肺组织TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡmRNA的表达.
关键词： 六味地黄颗粒 哮喘 转化生长因子-βⅠ型受体 转化生长因子-βⅡ型受体 -
六味地黄颗粒对哮喘大鼠血清NO及肺组织NOS水平影响的研究
目的:探讨六味地黄颗粒在防治支气管哮喘过程中的抗炎机制及其作用靶位.方法:将健康雄性SPF级SD大鼠160只随机分为8组,即六味地黄颗粒组(A组)、六味地黄颗粒加地塞米松组(B组)、地塞米松组(C组)、六味地黄加布地奈德组(D组)、布地奈德组(E组)、模型组(F组)、生理盐水对照组(G组)及正常对照组(H组),每组20只.第1、8天除G、H组外,其余各组均以卵蛋白(OVA)辅以氢氧化铝注射致敏,G组以生理盐水腹腔注射代替;2周后除G、H组外,其余各组雾化吸入卵蛋白以激发建立哮喘模型,G组雾化吸入生理盐水代替,正常对照组不予任何处理.从实验第8天开始,除F、G、H组外,其余各组分别用药干预,G组及F组用生理盐水灌胃代替,H组不予处理,造模时间共28天.取材后采用EUSA法分别检测血清中NO浓度及肺组织匀浆液中NOS浓度.结果:在实验大鼠肺组织匀浆液NOS含量中,A、B、D组含量相对于F组明显偏低、且其差异存在统计学意义(P<0.05),在实验大鼠血清NO含量中,与F组比较:A、B组大鼠血清中NO的含量无明显偏低,差异不具有统计学意义(P>0.05);C、D组大鼠血清NO含量均明显偏低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:抑制哮喘肺组织NOS的合成与释放可能是六味地黄颗粒用于治疗哮喘并减轻气道炎症的重要机制之一.
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六味地黄颗粒干预下的哮喘大鼠模型肺组织中 TGF-β1的变化
目的：观察六味地黄颗粒干预下哮喘大鼠肺组织中 TGF-β1的变化，为研究中医药防治小儿哮喘提供实验依据。方法以卵清白蛋白建立哮喘大鼠模型并分组，通过 HE 染色观察大鼠肺组织变化；免疫组织化学法检测各组肺组织 TGF-β1蛋白表达量，并用 ELISA 法检测各组大鼠肺泡灌洗液 TGF-β1含量。结果 HE 染色显示哮喘模型对照组肺组织炎症细胞浸润，支气管黏膜皱襞增多，气道平滑肌明显增厚。免疫组化结果显示，与空白对照组相比，哮喘模型对照组 TGF-β1蛋白表达明显升高。与哮喘模型对照组相比，六味地黄颗粒组和阳性对照地塞米松组 TGF-β1均明显降低，且六味地黄颗粒组的 TGF-β1水平与空白对照组水平相比，差异无统计学意义。ELISA 检测结果显示，各组大鼠肺泡灌洗液中 TGF-β1含量变化与免疫组化结果一致。结论在六味地黄颗粒干预下，哮喘大鼠模型肺组织 TGF-β1的表达量下调。
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六味地黄颗粒对哮喘大鼠促上皮生长因子及其受体干预作用的研究
目的：探讨六味地黄颗粒对哮喘大鼠气道重塑过程中促上皮生长因子（EGF）及促上皮生长因子受体（EG-FR）可能的干预作用。方法用 ELISA 法检测哮喘大鼠肺泡灌洗液中的 EGF 及 EGFR 水平，比较空白对照组、哮喘模型对照组、各用药组之间两种蛋白水平的差异。结果哮喘模型对照组的肺泡灌洗液 EGFR 水平较其他各组明显增高（P<0.01）；六味地黄颗粒+布地奈德组、空白对照组及布地奈德组之间 EGFR 水平差异无统计学意义（P>0.05）；六味地黄颗粒治疗组的肺泡灌洗液中 EGFR 水平居于哮喘模型对照组和空白对照组之间。哮喘模型对照组 EGF 水平高，明显高于其他各组（P<0.01）；空白对照组与六味地黄颗粒+布地奈德组 EGF 水平差异不大（P>0.05），但均显著低于其他三组（P<0.01）；六味地黄颗粒治疗组 EGF 水平明显高于布地奈德组，差异有统计学意义（ P<0.01）。结论六味地黄颗粒能降低哮喘大鼠肺部促上皮生长因子及其受体的生成，但其降低作用不如布地奈德明显。
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2005年版《中国药典》中六味地黄丸与六味地黄颗粒定量标准商榷
目的:探讨 2005年版<中国药典>中六味地黄丸及六味地黄颗粒定量指标与测定方法存在的问题.方法:比较 2005年版<中国药典>中六味地黄丸及六味地黄颗粒的定量指标、测定方法以及含量标准,并与 2000年版<中国药典>相关内容进行纵向比较.结果与结论:<中国药典>中六味地黄丸和六味地黄颗粒的相关定量指标、测定方法以及含量标准横向与纵向比较不尽一致,建议再版<中国药典>时进行修订.
