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愈肾合剂对糖尿病模型大鼠肾脏细胞TGG-β1、PDGF-B表达的影响
目的 观察中药方剂愈肾合剂对糖尿病大鼠肾脏细胞转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板衍化生长因子B(PDGF-B)表达的影响,探讨其治疗糖尿病肾病的作用机制.方法 诱发糖尿病肾病大鼠模型,设假手术组、模型组、对照组、治疗组.采用免疫组织化学方法 检测肾脏细胞TCF-β1、PDGF-β的表达.结果 愈肾合剂可降低模型大鼠尿蛋白,改善肾功能,下调TGF-β1、PDGF-B的蛋白表达.结论 愈肾合剂可通过下调TGF-β1、PDGF-B的蛋白表达,进而改善肾功能,延缓疾病进展.
关键词： 方剂 中药 糖尿病肾病 转化生长因子β1 血小板衍化生长因子B -
纳米tPA基因和PDGF-B小干扰RNA预防兔实验性再狭窄
目的 探讨联合应用纳米组织型纤溶酶原激活物(tPA)基因质粒和血小板衍化生长因子B(PDGF-B)小干扰RNA预防血管再狭窄.方法 建立兔髂动脉再狭窄模型;构建壳聚糖纳米tPA基因载体和PDGF-B siKNA表达载体并在球囊损伤髂动脉同时在超声波的辅助下转染血管壁细胞和血管周围骨骼肌组织.实验分4组.对照组:单纯行内膜剥脱术;实验组A:内膜剥脱术+纳米tPA质粒;实验组B:内膜剥脱术+PDGF-B sigNA质粒;实验组C:内膜剥脱术+纳米tPA质粒+PDGF-B siRNA质粒.采用常规病理、免疫组织化学、原位杂交以及形态测量方法 观察对再狭窄血管血栓形成、血管内膜细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和PDGF-B mRNA表达以及血管病变的影响.结果 成功转染tPA基因和PDGF-B mRNA小干扰RNA;两种基因单独应用和联合使用均显著抑制血管内膜细胞表达PCNA和PDGF-B mRNA;显著减少内膜厚度、内膜面积;使吻合口狭窄率显著减少实验A组54.12%、B组74.08%和C组79.09%.转染tPA基因组血管内血栓形成显著减少.联合应用两种基因效果优于单独使用.结论 联合应用纳米tPA基因和PDGF-B mRNA小干扰RNA在一定程度上抑制实验性免髂动脉再狭窄.
关键词： 再狭窄 组织型纤溶酶原激活物 血小板衍化生长因子B 小干扰RNA -
转染组织型纤溶酶原激活物基因质粒预防狗冠脉搭桥术吻合口再狭窄
目的 探讨应用组织型纤溶酶原激活物(tPA)基因质粒预防冠状动脉搭桥术后吻合口再狭窄.方法 建立狗冠状动脉搭桥术吻合口再狭窄模型,构建tPA基因质粒并制备tPA基因缝线,在冠状动脉搭桥术同时以超声波辅助转染心肌细胞和吻合口血管平滑肌细胞,采用常规病理、免疫组织化学、原位杂交以及形态测量方法观察对吻合口局部血栓形成、血管内膜细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和PDGF-B mRNA表达以及内膜增生的影响.结果 成功转染tPA基因并显著抑制血管内膜细胞表达PCNA和PDGF-B mRNA,抑制率分别为75.16%和87.01%;显著减少局部血管内膜厚度、内膜面积和吻合口血栓形成,使吻合口狭窄率显著减少70.30%.结论 转染tPA表达质粒在可抑制猪实验性冠状动脉搭桥术后吻合口再狭窄,这为冠状动脉搭桥术后再狭窄的防治提供实验基础.
关键词： 冠状动脉搭桥术 再狭窄 组织纤溶酶原激活物 血小板衍化生长因子B -
解聚复肾宁对糖尿病大鼠肾脏PDGF-B和BMP-7的影响
目的 观察中药复方解聚复肾宁(JJFSN)对糖尿病(DM)大鼠肾脏血小板衍化生长因子B(PDGF-B)和骨形成蛋白7(BMP-7)的影响.方法 建立STz诱导的糖尿病SD大鼠模型,将成模大鼠随机分成4组,即模型组、JJFSN组、厄贝沙坦组、厄贝沙坦+JJFSN组,并设正常对照组.各组大鼠采用相应的干预措施处理12周.常规方法 检测各组大鼠尿白蛋白排泄率(UAER),免疫组化法检测大鼠肾PDGF-B和BMP-7表达,Western blot检测肾组织PDGF-B的表达.透射电镜观察肾脏超微结构.结果 模型组大鼠肾BMP-7表达显著减少.而两种检测方法 测得的PDGF-B表达均显著升高;JJFSN组、厄贝沙坦组和厄贝沙坦+JJFSN组两种检测方法 测得的肾脏PDGF-B均显著低于模型组(P＜0.05),而肾BMP-7则显著高于模型组(P＜0.05);厄贝沙坦+JJFSN组两项指标的改善情况明显优于其他三组(P＜0.05),但尚未达到正常对照组水平.结论 解聚复肾宁能够减少DM大鼠肾组织中PDGF-B的表达,增加DM大鼠肾组织中BMP-7的表达.
关键词： 解聚复肾宁 糖尿病 血小板衍化生长因子B 骨形成蛋白7 -
真核表达载体pIRES-EGFP-PDGF-B的构建及在293T细胞中的表达
目的:构建人基因血小板衍化生长因子B(PDGF-B)真核表达载体pIRES-EGFP-PDGF-B,并在293T细胞中进行瞬间表达.方法:采用PCR方法从购自美国典型培养物保藏中心含有PDGF-B基因全长cDAN序列的质粒中扩增出PDGF-B的cDAN片段,并与真核表达载体pIRES-EGFP连接双酶切鉴定,后采用Lipofectamine 2000将重组质粒转入293T细胞中,利用荧光显微镜和Western blot进行表达鉴定.结果:真核表达栽体pIRES-EGFP-PDGF-B被成功构建,双酶切鉴定正确,载体能在293T细胞内正确地表达成熟的PDGF-B蛋白,并可分泌到细胞外.结论:成功构建了PDGF-B真核表达载体,为进一步利用PDGF-B对脊髓损伤进行基因治疗奠定基础.
关键词： 脊髓损伤 血小板衍化生长因子B 真核表达
