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急性马尾神经压迫模型的脊髓组织病理变化
背景：动物实验发现，压迫马尾神经可导致腰骶段脊髓前角运动神经元发生凋亡。
目的：观察急性马尾神经压迫后家犬相应脊髓节段组织的病理变化。
方法：将27只犬随机分为9组，每组3组，其中1组为正常对照，7个实验组在L6椎板下硬膜外脂肪上方置入空水囊，进行注水压迫，压迫时间分别设置为4，8，12，24，48，72，168 h；假手术组只置入空水囊，不进行注水压迫。达到压迫时间后，取马尾神经发出段脊髓及相邻头端脊髓，进行组织病理学检查。
结果与结论：①光镜观察结果：压迫4-48 h，脊髓前角前运动神经元未见明显改变；压迫72 h后，观察到运动神经元体积减小，细胞膜皱缩，与周围组织分离，细胞均质浓染；压迫168 h可见运动神经元消失，但相邻头端脊髓切片未见脊髓前角运动神经元形态异常；②电镜观察结果：压迫12 h，脊髓组织开始肿胀，随压迫时间的延长，脊髓组织肿胀加重，胶质细胞肿胀明显，至168 h时髓鞘板层结构溶解，轴突空泡化，轴浆外溢，有炎性损伤特征样改变；③前角运动神经元凋亡检测结果：压迫12 h开始出现凋亡，随后逐渐增多，至168 h仍呈增高趋势。 -
急性马尾神经压迫后脊髓前角运动神经元细胞凋亡相关蛋白的表达规律
背景：马尾综合征往往遗留有会阴区皮肤感觉减退，尿便控制功能降低，甚至出现男性功能受损。实验研究发现外周神经纤维损伤后，神经元胞体会发生凋亡，这与损伤的性质、神经元种类、动物种属、年龄、与神经元距离等因素有关。目的：探讨急性马尾神经压迫后脊髓前角运动神经元细胞凋亡及相关蛋白的表达规律。方法：27只家犬随机分为3组，压迫组及对照组制备马尾神经压迫模型，正常组不造模。压迫组又分为水囊压迫持续4，8，12，24，48，72，168 h组，每组3只；对照组只置入水囊，不注水。采用TUNEL标记法检测脊髓前角运动神经元凋亡情况，免疫组化SABC法检测 Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达，用Qwin550Cw型图像采集与分析系统检测 Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达阳性细胞灰度值。结果与结论：急性马尾神经压迫后脊髓前角运动神经元细胞发生凋亡，压迫12 h即有阳性细胞检出，72 h神经元凋亡达到高峰。Bax、Bcl-2蛋白在正常组即有少量表达，Caspase-3蛋白在正常组、对照组无表达。Bax、Bcl-2蛋白表达于压迫持续8 h开始显著增加，72 h达高峰，168 h降至正常；Bax蛋白表达增幅较Bcl-2大。Caspase-3蛋白于压迫持续12 h开始表达，72 h达高峰，168 h仍有少量表达；Bax、Caspase-3蛋白表达在72 h达高峰，Bcl-2蛋白表达则无明显上升。提示急性马尾神经压迫后脊髓前角运动神经元发生凋亡；Bax、Bcl-2蛋白表达呈相互拮抗作用，在Bax/Bcl-2复合体中，Bax蛋白占优势时促进凋亡，诱发Caspase-3蛋白表达，导致神经元凋亡发生。
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成年大鼠急性压迫性脊髓损伤模型音猬因子的表达
背景：在神经系统的发育中，音猬因子信号通路的主要作用为诱导整个中枢神经系统形成背腹两侧分区,当这一信号通路受到破坏时，将导致整个中枢神经系统腹侧表型神经元的完全丧失。目的：制造成年大鼠急性压迫性脊髓损伤模型，检测脊髓急性压迫性损伤后与发育相关的重要分子音猬因子的表达，探讨其在神经再生过程中所发挥的作用。方法：将30只同龄SD大鼠置入后路压迫装置，制作成急性压迫性脊髓损伤模型。随机分为椎板钻孔组5只和急性脊髓损伤组25只。应用原位杂交检测方法，分别于脊髓损伤后1，3，5，7，14 d对损伤区行音猬因子mRNA检测。结果与结论：脊髓损伤后7 d，音猬因子表达水平达到大值，在损伤区至远端10 mm处的灰质和白质中都有表达。音猬因子在室管膜细胞的表达明显低于在灰质和白质中的表达；其在室管膜区域的表达仅限于损伤区域周围5 mm的范围内，分布范围明显小于在灰质和白质中的表达。提示激活急性压迫性脊髓损伤模型音猬因子的表达，可能和损伤脊髓神经的再生有关。
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兔颈2后侧急性颈髓压迫模型的建立
目的 测量兔颈2椎管解剖学数据并建立急性后侧颈髓压迫模型,为脊髓损伤机制研究提供实证参考.方法 对8只日本大耳兔做第2颈椎解剖学研究,测量颈2椎管矢状径、后壁和棘突后缘的距离.将32只日本大耳兔随机分为4组,每组8只.无菌条件下显露颈2棘突,各组拧进椎管内螺钉0 mm(A组)、1.0mm(B组)、1.5 mm(C组)、2.0 mm(D组),致脊髓急性压迫,观察其不同受压程度下影像学、改良Tralov运动评分、神经电生理及病理学变化.结果 影像学显示:B、C、D组椎管侵占率分别为(23.21±0.02)％、(33.61±0.01)％、(46.57±0.02)％.病理学显示:压迫组神经元细胞损伤数目越多,白质纤维脱髓鞘越重.术中颈髓施压后皮层体感诱发电位(cortical somatosensory evoked potential,CSEP)示:B、C、D组脊髓损伤兔分别为1、5、8只,脊髓损伤样本量与压迫程度呈现同趋相关.Tralov评分中脊髓损伤兔均有行走缓慢、步态异常等运动功能障碍,D组为严重.结论 本实验中建立兔急性颈髓压迫模型的方法简单、规范,可为研究急性脊髓损伤病理生理机制及临床治疗提供模型.
