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  • 聚左旋乳酸/壳聚糖电纺丝纳米纤维支架与兔内皮祖细胞的生物相容性

    作者:王炜;李坤

    背景 电纺丝技术能够使许多高分子材料制备出与细胞外基质相似的三维纳米纤维支架.聚乳酸/壳聚糖纳米纤维复合支架材料能够克服材料的不足,提高组织工程支架生物相容性.目的 评价聚左旋乳酸/壳聚糖电纺丝纳米纤维支架与兔内皮祖细胞的生物相容性.方法 电纺丝技术制备聚左旋乳酸,壳聚糖,聚左旋乳酸/壳聚糖的纳米纤维支架,扫描电镜观察其形貌结构.纳米纤维支架与内皮祖细胞进行复合培养后,观察细胞在不同材料上的黏附率、一氧化氮分泌,生长特征和在聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维支架上的细胞表型特征.结果 与结论 聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维支架比聚左旋乳酸、壳聚糖具有更合适的纤维直径,具有与细胞外基质相似的纳米纤维三维多孔结构.聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维支架能够促进内皮祖细胞黏附率和细胞的一氧化氮分泌(P < 0.05,P <0.01).内皮祖细胞能够在聚左旋乳酸/壳聚糖复合材料膜上融合成片,保持了细胞的完整形态和分化功能,显示了内皮细胞特异性的vWF 表型.提示聚左旋乳酸/壳聚糖电纺丝纳米纤维支架与兔内皮祖细胞具有良好的生物相容性.

  • β-磷酸三钙/聚-L-乳酸复合材料的骨内降解

    作者:王晓;刘玉杰;陈旭

    背景:调控聚乳酸类可吸收材料的降解速率,使材料降解与新生骨爬行替代速度更同步,加入羟基磷灰石或β-磷酸三钙等无机粒子是目前的主流选择.目的:对比观察β-磷酸三钙/聚-L-乳酸复合材料和聚-L-乳酸在松质骨内的降解速度及诱导成骨能力.方法:将β-磷酸三钙/聚-L-乳酸复合材料及聚-L-乳酸材料分别植入12只新西兰大白兔双侧股骨内髁及外髁后,于术后6,12,24周3个时间点取材,测定其各个时间点的生物吸收率,扫描电镜和光学显微镜观察其在松质骨内的形态学变化,周围新骨爬行替代及异物反应情况.结果与结论:各个时间点β-磷酸三钙/聚-L-乳酸与周围骨质贴合比聚-L-乳酸材料更紧密,未见明显异物反应.6周时β-磷酸三钙/聚-L-乳酸材料生物吸收率小于聚-L-乳酸材料,12周后生物吸收率增速加快,同时材料表面出现均匀分布的微孔及裂隙;术后24周内两种材料均未见新生骨爬行替代.结果表明β-磷酸三钙/聚-L-乳酸复合材料早期降解较聚-L-乳酸材料慢,有利于移植物植入早期的坚强固定;6周后降解加快,24周内未见诱导成骨现象.

  • 结晶聚-L-乳酸片层粒子的制备及其对人甲胎蛋白表位肽的吸附研究

    作者:李雄伟;曹伟民;黄键

    用沉淀法制备了结晶聚-L-乳酸片层粒子(片粒),考察了片粒对人甲胎蛋白CTL表位肽的吸附携载,吸附效率可达70%以上,是一种有前景的抗原蛋白佐剂载体,可望用以制备抗肝癌疫苗,开创肝癌免疫治疗新方法.

  • 晚期内皮祖细胞在纳米聚-L-乳酸支架膜表面的粘附和增殖

    作者:卢辉俊;冯章启;顾忠泽;刘长建

    目的 通过比较晚期内皮祖细胞在纳米无序及有序聚-L-乳酸支架膜表面粘附、增殖情况,为优化组织工程材料提供一种新途径.方法 通过静电纺丝技术制备纳米聚-L-乳酸纤维支架,行低温等离子体技术改性及Ⅰ型胶原表面涂覆,与晚期内皮祖细胞复合培养,并进行细胞双荧光染色鉴定,通过不同时间点两组材料晚期内皮祖细胞粘附和增殖率的测定比较及光镜、荧光显微镜和扫描电镜观察支架材料对种子细胞形态特征等方面的影响.结果 制得的纳米聚-L-乳酸纤维孔径在300~400 nm之间,孔隙率>90%;细胞粘附12 h基本完成;各时间点有序膜组增殖率明显高于无序膜组(P<0.05).细胞在支架膜上生长良好,无序膜组细胞生长较散在、杂乱;有良好空间定向效果的有序纤维支架有利于细胞沿纤维定向附着、伸展、增殖,分泌胞外基质.结论 晚期内皮祖细胞是理想的组织工程种子细胞来源;纳米聚-L-乳酸有序膜支架能促进种子细胞在材料表面的粘附、增殖,并能较好地保持细胞形态.是一种理想的血管组织工程支架材料.

  • 载α-干扰素的聚-L-乳酸片层粒子的制备研究

    作者:李雄伟;陈晓理;刘佳林;曹伟民

    采用结晶性聚-L-乳酸(PLLA)以非溶剂沉淀技术制得粒径均匀的片层粒子(简称片粒), 其粒径为3~5 μm,呈菱形或阶梯状不规则外形.PLLA 片粒在无任何表面活性剂、分散剂的条件下制得,表面清洁,不含有任何杂质,十分有利于以吸附方式携载蛋白,从而避开有害的有机溶剂环境及机械搅拌,有效地保护蛋白分子.以α-干扰素(IFN-α)为模型蛋白,发现当IFN与PLLA 片粒的质量比小于1%时,IFN的吸附效率可超过95%.所携载IFN的释放可延续10 d以上, 释放的IFN完好地保留了原有的生物活性.PLLA 片粒具有易被巨噬细胞吞噬的特性,该特性对于激活巨噬细胞的免疫功能,进一步增强人体的免疫特性具有重要的作用.

  • 纳米PLLA膜复合内皮生长晕细胞的相容性研究

    作者:卢辉俊;冯章启;顾忠泽;刘长建

    目的 通过观察内皮生长晕细胞(EOCs)与纳米聚-L-乳酸(PLLA)有序纤维膜体外复合培养的生物相容性及黏附、增殖情况,为构建组织修复材料提供理论依据.方法 通过静电纺丝技术制备的纳米PLLA纤维支架,行低温等离子体技术改性及 Ⅰ 型胶原表面涂覆,与EOCs复合培养,测定细胞黏附率及增殖率,观察细胞生长曲线,荧光显微镜及扫描电镜下观察支架材料与种子细胞EOCs形态特征和生物相容性.结果 制备的纳米PLLA膜孔径在300~400 nm之间,孔隙率>90%.各组(单纯细胞组、无序膜组、有序膜组及超级有序膜组)吸光度(A)值均随共培养时间的增加而逐步升高; 从第5天起,有序膜和超级有序膜组A值与无序膜和单纯细胞组比较,差异有统计学意义(P<0.05); 单纯细胞组和无序膜组各检测时间点A值差异无统计学意义(P>0.05 ).复合培养12 h及24 h后有序膜组和超级有序膜组黏附率则明显高于无序膜组,差异有统计学意义(P<0.01).复合培养1 d、3 d及7 d后,有序膜组和超级有序膜组的增殖率明显高于无序膜组(P<0.05,P<0.01).细胞在支架膜上生长良好,纳米无序膜的细胞生长较散在、杂乱; 有良好空间定向效果的有序膜及超级有序膜支架有利于细胞沿纤维定向附着、伸展、增殖,以超级有序膜更有利于保持其结构.结论 EOCs是理想的组织工程种子来源细胞; 纳米PLLA有序及超级有序膜支架能促进种子细胞在材料表面的黏附、增殖,并能较好地保持细胞的形态,是一种理想的组织修复材料.

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