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硒和锌对人食管癌细胞株Eca109生长增殖影响的血清生理学研究
目的 观察不同剂量硒、锌灌胃大鼠血清对人食管癌细胞株Eca109生长增殖的影响.方法 将SD大鼠随机分为7组(基础饲料组、低硒组、高硒组、低锌组、高锌组、低硒低锌组、高硒高锌组),每组8只.喂养30天后取大鼠血清培养人食管癌细胞株Eca109和人正常肝上皮细胞株HL7702.用AAS法分别测定各组大鼠血清硒、锌;采用MTT法、3H-TDR掺入实验研究不同浓度硒、锌灌胃大鼠血清对两株细胞生长增殖的影响.结果 (1)基础饲料组血清硒、锌水平低,高锌组血清锌高;高硒高锌灌胃组大鼠血清硒水平高,低硒低锌灌胃组血清硒水平次之,均明显高于基础饲料组;而此两组大鼠血清锌与基础饲料喂饲组大鼠血清锌水平差异无统计学意义(P＞0.05);(2)与小牛血清对照组相比,只有高硒高锌灌胃组大鼠血清从第72h起抑制癌细胞生长(P＜0.05),其余各组均促进食管癌细胞的生长;且该组大鼠血清也抑制肝细胞生长(P＜0.05);(3)高硒高锌灌胃组大鼠血清明显抑制食管癌细胞DNA合成(p＜0.05),其余各组与对照组作用相近,但该组对肝细胞DNA合成的抑制作用也强.结论 硒、锌在吸收、代谢等方面可能存在相互抑制作用;血清硒、锌含量较低会促进人食管癌细胞的增殖,而增加硒、锌的摄入可提高血清硒、锌的含量且可能抑制癌细胞的增殖.
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高脂膳食对人肺腺癌细胞SPCA1增殖活性影响的血清生理学研究
目的探讨用血清生理学方法直接在细胞水平上研究高脂膳食对人肺腺癌细胞系SPCA1增殖活性的影响.方法在探讨合适的血清生理学实验条件后,将20只SD雌性大鼠按体重随机分为高脂组和对照组,对照组自由进食普通饲料,高脂组自由进食高脂饲料(猪油:普通饲料=1:9),喂养7周后取血分离血清,用大鼠血清代替细胞培养液中小牛血清培养人肺腺癌细胞系SPCA1,用MTT比色法、3H-TdR掺入法、流式细胞术检测方法从细胞生长曲线、细胞DNA合成以及细胞周期分布等方面观察高脂膳食喂养的雌性大鼠血清对癌细胞增殖活性的影响.结果(1)加入细胞培养液中血清浓度为15%时,人肺癌细胞生长较好,并且未灭活组好于灭活组.(2)从MTT比色法、3H-TdR掺入实验以及流式细胞术结果来看,高脂膳食喂养的大鼠血清(RSTHFD)能促进肺腺癌细胞SPCA1的增殖和癌细胞DNA的合成,并能促使细胞进入活跃的有丝分裂状态.结论(1)用血清生理学方法可以直接在细胞水平上研究膳食因素对人肺腺癌细胞系SPCA1增殖活性的影响.(2)高脂膳食能促进人肺腺癌细胞SPCA1的增殖.
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盐亭食管癌高发区饮食对人食管癌细胞增殖的影响
目的 采用血清生理学方法,观察盐亭食管癌高发区饮食嚷饲大鼠血清对人食管癌细胞Eca-109生长增殖的影响. 方法 将24只雄性SD大鼠分为3组,分别喂饲大鼠常规饲料、健康成人饮食及盐亭饮食7天,每天定时记录采食量及体重.用MTT法探讨用大鼠血清培养人食管癌细胞的适宜条件;分别以人正常肝上皮细胞HL7702及10%灭活小牛血清作为对照,采用细胞生长曲线、细胞群体倍增时间、3H-TDR掺入实验研究盐亭饮食喂饲大鼠血清对人食管癌细胞生长增殖的影响. 结果 喂饲健康成人饮食与常规饲料的大鼠其采食量及体重无差异;用5%未灭活大鼠血清取代10%灭活小牛血清适合人食管癌细胞培养;盐事食管癌高发区饮食喂饲大鼠血清可明显促进人食管癌细胞生长,却不利于人正常肝上皮细胞生长,且与其他3个组均有统计学差异(P＜0.05). 结论 盐亭食管癌高发区饮食具有促进人食管癌细胞Eca-109生长增殖的作用.
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食管癌高发区饮食对Eca-109细胞周期调控因子表达的影响
目的 采用血清生理学方法,观察食管癌高发区饮食喂饲大鼠血清对人食管癌细胞Eca-109细胞周期调控因子表达的影响.方法 将SD大鼠随机分为3组,分别喂饲大鼠常规饲料、盐亭食管癌高发区饮食(盐亭饮食)及低发区饮食(成都成人饮食).喂饲30天后取大鼠血清培养Eca-109细胞.为避免大鼠空白血清本身活性对实验结果的影响,设置小牛血清对照,采用 RT-PCR、细胞免疫荧光法从mRNA及蛋白水平探讨不同饮食处理的大鼠血清对Eca-109细胞周期调控因子表达的影响.结果 与小牛血清对照相比,喂饲盐亭饮食的大鼠血清处理Eca-109细胞后,细胞中原癌基因cyclinD_1及CDK4在mRNA及蛋白水平均异常高表达,同时还伴有抑癌基因p16及Rb低表达.盐亭饮食组Eca-109细胞中cyclinD_1、CDK、p16及Rb在mRNA水平的表达量分别是小牛血清对照组的3.6倍、1.7倍、0.2倍及0.22倍.而喂饲常规饲料及成都饮食的大鼠血清对这4个基因表达影响均与小牛血清对照无明显差异.结论 盐亭饮食喂饲大鼠血清使Eca-109细胞中细胞周期调控因子cyclinD_1、CDK_4表达上调,同时下调p16及Rb的表达.
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盐亭饮食及维生素对人食管癌细胞株生长增殖的影响
目的 采用血清生理学方法,观察添加维生素的盐亭食管癌高发区饮食喂饲大鼠血清对人食管癌细胞株Eca-109生长增殖的影响.方法 将SD大鼠随机分为6组,每组10只.分别喂饲大鼠常规饲料、盐亭饮食、盐亭饮食添加两组维生素[组合Ⅰ:维生素A、E、叶酸,组合Ⅱ:维生素A、E、叶酸、维生素B2(核黄素)、C;两组合均设高、低两个剂量].喂饲30 d后取大鼠血清培养人食管癌细胞株Eca-109和人正常肝上皮细胞株HL7702.采用MTT、3H-TDR掺入实验及流式细胞术研究不同饮食喂饲大鼠血清对两株细胞生长增殖的影响.结果 与小牛血清对照相比,大鼠常规饲料喂饲大鼠血清对两株细胞生长增殖作用相近(P＞0.05);盐亭饮食喂饲大鼠血清可促进Eca-109细胞生长增殖,但抑制HL7702细胞生长增殖;添加维生素后,高剂量维生素组抑制Eca-109细胞增殖和促进HL7702细胞增殖的作用均强于低剂量组(P＜0.05);高剂量组引起Eca-109细胞生长周期G1期阻滞,但可促进HL7702细胞进入S期及G2期(P＜0.05).结论 盐亭饮食可促进人食管癌细胞Eca-109 生长增殖,而添加维生素可逆转该作用,细胞生长周期G1期阻滞可能是维生素抑制癌细胞生长增殖的机制之一.
