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内质网蛋白29在肾小管上皮细胞转分化中的作用
目的:观察TGF-β1诱导的正常大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)转分化过程中内质网蛋白29(ERP29)表达变化及上调表达ERP29蛋白对TGF-β1诱导NRK52E细胞极性蛋白Par-3的影响.方法:应用TGF-β1(10 ng/ml)刺激NRK52E细胞,采用Western印迹和免疫荧光方法分别检测内质网蛋白29、Par-3mRNA及蛋白的表达;应用Lipofect-mine2000将ERP29质粒瞬时转染NEK52E细胞,采用Western印迹方法检测细胞极性蛋白Par-3表达变化.结果:TGF-β1刺激后,NRK52E细胞内质网蛋白29表达呈时间依赖模式逐渐下调,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).脂质体转染外源性质粒pcDNA/ERP29上调表达ERP29可显著上调表达细胞极性蛋白Par-3.结论:TGF-β1诱导NRK52E细胞转分化进程中内质网蛋白29表达显著下调,基因转染上调表达ERP29可显著提高细胞极性蛋白Par-3表达,提示ERP29在维持细胞极性、阻抑转分化进程中发挥重要作用.
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内质网蛋白29在维持肾小管上皮细胞极性中作用
目的 观察内质网蛋白(ERP)29在大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型中表达变化及对细胞极性蛋白Par-3表达的影响.方法 选取清洁级雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组(n=6)与模型组(n=18).假手术组打开腹腔及分离输尿管,未进行结扎;模型组打开腹腔,双结扎左侧输尿管后缝合切口,造模为UUO模型大鼠.模型组于术后第3、7、14天各处死6只大鼠,假手术组6只大鼠于第14天处死.取两组大鼠肾组织,Western印迹、免疫荧光、免疫组化法进行病理染色及检测E-钙粘素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Par-3蛋白和ERP29蛋白表达情况.结果 Masson染色显示,模型组大量肾小管萎缩消失,广泛纤维化,且肾间质的纤维化程度逐渐加重.Western印迹及间接免疫荧光/免疫组化结果显示,模型组E-cadherin表达、细胞极性Par-3蛋白、ERP29表达下调;α-SMA表达上调.模型组14 d的E-cadherin蛋白表达与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05);模型组各时点α-SMA表达均较假手术组上调,差异有统计学意义(P<0.05);模型组14 d时Par-3蛋白表达下调显著,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05);模型组各时间点ERP29蛋白表达与假手术组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 UUO大鼠模型中发生肾小管上皮细胞转分化过程中,肾小管上皮细胞中ERP29表达下调,可能通过减少细胞极性蛋白的表达而致上皮细胞极性丧失,提示ERP29在维持肾小管上皮细胞极性中发挥重要作用.
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Yes相关蛋白1和内质网蛋白29在结直肠癌组织的表达及临床意义
目的 探讨检测Yes相关蛋白1(YAP1)和内质网蛋白29(ERp29)在结直肠癌组织中的表达水平,以及两者与结直肠癌临床病理因素的关系.方法 应用免疫组织化学法检测85例结直肠癌组织和癌旁组织中YAP1和ERp29表达,分析两者与结直肠癌各临床病理因素的关系.结果 YAP1在结直肠癌组织中的阳性表达率为61.18％ (52/85),明显高于癌旁组织中YAP1阳性表达率17.65％(15/85),两者差异有统计学意义(t=43.731,P＜0.01),YAP1表达水平与与结直肠癌TNM分期、淋巴结转移呈明显相关(分别为t=6.632、5.273,P＜0.05);ERp29在结直肠癌组织中的阳性表达率为42.35％(36/85),明显低高于癌旁组织中ERp29阳性表达率95.29％(81/85),两者差异有统计学意义(t =55.515,P＜0.01),ERp29表达水平与结直肠癌TNM分期、浸润深度、淋巴结转移呈明显相关(分别为t=5.058、5.472、5.908,P＜0.05).结论 YAP1和ERp29的异常表达与结直肠癌的发生发展有关,检测YAP1和ERp29表达水平有助于判断结直肠癌浸润转移潜能及评估结直肠癌患者的预后.
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内质网蛋白29和Jagged1在胃癌组织中的表达及其临床意义
目的 探讨内质网蛋白29(ERp29)和Jagged1在胃癌组织中的表达及两者与胃癌临床病理特征间的关系.方法 收集广东医科大学附属医院2016年8月至2018年10月病理科归档的资料完整的95例胃癌组织标本,采用免疫组织化学方法检测ERp29和Jagged1在胃癌患者手术切除的癌组织和胃癌癌旁组织中的表达水平.结果 ERp29在胃癌组织的表达率明显低于胃癌癌旁组织(43.16％比84.21％,t=34.614,P＜0.01),ERp29表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t=4.876、5.350、P＜0.05);Jagged1在胃癌组织的表达率明显低于胃癌癌旁组织(40.00％比78.95％,t=29.894,P＜0.01),Jagged1表达水平与胃癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t =5.982、4.498、4.787,P＜0.05).结论 ERp29和Jagged1在胃癌组织中低表达,ERp29和Jagged1可能参与胃癌的发生、发展.
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内质网蛋白29在大鼠脑出血继发性脑损伤中的作用研究
目的观察大鼠脑出血后脑组织中内质网蛋白29(ERp29)的表达变化，进而探讨其在脑出血继发性脑损伤中的作用。 方法将60只SD大鼠按随机数字表法分为2组：对照组(10只，不做处理)和实验组(50只，在脑立体定位仪下采用自体血注入尾状核法制备脑出血模型)。实验组再分为术后6h、12h、18h、24 h、48 h5个时相点，对各个时相点的模型鼠分别采用RT-PCR和Western blotting方法检测脑组织中ERp29和内质网伴侣蛋白Bip/GRp78 mRNA及蛋白的表达。结果在脑出血大鼠模型中，BiP/GRp78 mRNA及蛋白表达在术后12h开始升高，并随着时间的推移在术后18h、24h、48 h继续逐渐升高，于术后48 h达顶峰，与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。ERp29 mRNA及蛋白表达在术后6h、12h无明显变化，与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)；而在术后18h、24h、48h ERp29 mRNA及蛋白表达明显升高，与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。 结论大鼠脑出血后18h时血肿周围脑组织细胞中发生了内质网应激反应，而ERp29在此过程中表达升高，推测其有可能作为一种保护因子并以与BiP/GRp78相互作用形成复合物的形式来抵抗细胞内质网应激反应，进而减轻血肿对周围脑组织造成的损害。
