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小鼠胚胎干细胞(mESCs)文献资料
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应用胚胎干细胞试验(EST)评价邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的胚胎毒性
目的 利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的胚胎毒性.方法 采用悬滴悬浮法培养小鼠胚胎干细胞(mESCs),观察受试物对mESCs分化能力的影响,结合CCK-8法判断受试物对mESCs及小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)的细胞毒性结果,预测受试物的胚胎毒性.用已知强胚胎毒性化合物5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)、无胚胎毒性化合物青霉素-G(P-G)对模型进行有效性验证,并将经过验证的EST模型用于评价受试物DEHP的胚胎毒性.结果 利用建立的EST模型对5-FU、P-G胚胎毒性进行评价,结果表明5-FU为强胚胎毒性,P-G为无胚胎毒性,与文献报道一致;DEHP对mESCs和3T3的半数抑制浓度分别为IC50 mESCs=315 μmol/L(126 μg/ml),IC50 3T3=307 μmol/L(122.8 μg/ml),mESCs的半数抑制分化浓度为ID50 mESCs=323 μmol/L(129.2 μg/ml),经EST模型判断公式计算得出该化合物为弱胚胎毒性化合物.结论 建立的EST模型的有效性验证结果与ECVAM的结论一致,可用于胚胎毒性的筛选和评价;经EST模型评价DEHP的胚胎毒性为弱胚胎毒性.
