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BrdU-ELISA局部淋巴结实验对3种香料皮肤致敏性的评价
变应性接触性皮炎是常见的一种免疫源性皮肤反应,通常由皮肤接触致敏性化学物引起,因此进行致敏性检测是对化学物安全性评价的重要内容之一.
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BrdU-ELISA局部淋巴结实验对DATF小鼠皮肤致敏性的评价
目的 通过溴脱氧核苷尿嘧啶-酶联免疫吸附测定(BrdU-ELISA)局部淋巴结实验,评价3,4-双(4’-氨基呋咱基-3’)氧化呋咱(DATF)对小鼠皮肤的致敏性.方法 选择SPF级BALB/C小鼠30只,随机分为5组,即高、中、低剂量DATF组、阳性对照组和溶剂对照组,每组6只.高、中、低剂量DATF组分别给予50％、25％、10％(0.50、0.25、0.10 g/ml)的DATF溶液,阳性对照组给予1％2,4-二硝基氯苯(DNCB)溶液,溶剂对照组给予丙酮/橄榄油(4∶1).给药结束后,取耳后淋巴结并制备细胞悬液;采用ELISA法检测BrdU掺入测定细胞增殖水平,计算BrdU标记指数(LI)和刺激指数(SI)为1.6时的受试物浓度(EC1.6).结果 各组小鼠耳廓厚度差异无统计学意义(P＞0.05),DATF无皮肤刺激性;与溶剂对照组比较,高剂量DATF组和阳性对照组小鼠淋巴结重量明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.05);与溶剂对照组比较,其他各组BrdU LI明显增大,差异均有统计学意义(P＜0.01);低、中、高剂量DATF组SI分别为6.1、8.8、12.1,DATF的EC1.6为2.2％,可确定DATF为极强致敏物质.结论 根据经济合作与发展组织第442 B项(OECD TG442B)实验指导原则判定,DATF对小鼠皮肤具有极强的致敏性.
关键词： 3 4-双(4’-氨基呋咱基-3’)氧化呋咱 小鼠 局部淋巴结实验 皮肤致敏 -
BrdU掺入法评估化学物皮肤致敏性的实验研究
目的 探讨BrdU掺入法在检测和评价化学物对小鼠皮肤接触致敏性的应用.方法 选择24只雌性BALB/C小鼠随机分为6组,受试物为2,4-二硝基氯苯(DNCB)和三氯乙烯(TCE),对照组受试物为AOO溶剂.将受试物连续3d涂抹于小鼠双耳背,第4天腹腔注射BrdU标记液,第5天摘取小鼠耳部淋巴结,称重,然后制备淋巴细胞悬液,用ELISA检测技术测定BrdU掺入淋巴细胞的水平,将实验组的小鼠耳部淋巴结重量和BrdU标记指数分别与对照组进行方差分析比较.结果 溶剂对照组的小鼠淋巴结重量为(0.0060±0.0015)g,0.10、0.25、0.50、1.00%浓度的DNCB实验组的淋巴结重量为(0.0120±0.0014)、(0.0137±0.0006)、(0.0156±0.0017)、(0.0241±0.0035)g,20%TCE实验组的小鼠淋巴结重量为(0.0155±0.0017)g;溶剂对照组的BrdU标记指数为0.157±0.023;各浓度的DNCB实验组的BrdU标记指数分别为0.349±0.009、0.412±0.013、0.445±0.009、0.536±0.026;20%TCE实验组的BrdU标记指数为0.433±0.025.DNCB各浓度组、TCE组的淋巴结重量和BrdU标记指数与对照组比较差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 BrdU掺入法作为一种改良的局部淋巴结实验方法,它具有评估化学物皮肤接触致敏性的能力.
