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高效液相色谱-荧光检测法测定红景天苷的含量
目的:建立高效液相色谱-荧光检测法测定红景天苷的含量.方法:色谱柱为Eclipse XDB-C8柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为水-甲醇(85∶ 15),流速为1.0 mL*min-1,柱温为25 ℃,荧光检测波长λEX=220 nm,λEM=315 nm.结果:该方法的线性范围为1.00～500 ng(r=0.999 9).平均加样回收率为99.2%,RSD 为1.4%(n=5).低检测限为 1.5 pg.结论:本方法快速,简单,灵敏度极高.
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反相高效液相色谱法测定人血浆中氯雷他定浓度
目的:建立测定人血浆中氯雷他定的反相高效液相色谱法.方法:血浆样品碱化后用乙醚萃取.色谱柱为C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为50 mmol*L-1磷酸盐缓冲液(磷酸调pH4.0)-乙腈 (62∶ 38),流速为1.50 mL*min-1,荧光检测波长:Ex 290 nm,Em 460 nm.外标法峰面积定量.结果:测定方法在1. 0～100.0 μg*L-1范围内具良好的线性关系,萃取回收率为86.0%～99.7%,方法回收率为85.0%～100.4%,日内、日间RSD小于15%,低定量浓度为1.00 μg*L-1.结论:本测定方法具灵敏、准确、快速的优点,适用于氯雷他定片剂的药代动力学和生物利用度等的研究.
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梯度洗脱HPLC法测定人血浆中阿昔洛韦的浓度
目的:建立一种快速、灵敏、准确的高效液相色谱测定人血浆中阿昔洛韦浓度的方法.方法:以硫酸沙丁胺醇为内标,采用Shimadzu LC-10AD液相色谱仪,以Shimadzu C18为分析柱(100 mm×3 mm,3 μm),柱温35 ℃;流动相采用梯度洗脱法,A泵为乙腈,B泵为0.1 mol*L-1磷酸溶液,流速为A泵:0.005 mL*min-1,B泵0.600 mL*min-1;进样量20 μL;荧光检测器:Ex=285 nm,Em=370 nm.结果:色谱峰分离良好,无干扰.测定数据进行回归,线性方程为:Y=0.001 604X + 0.022 30,r=0.999 7.检测范围:20～1 500 ng*mL-1.结论:本法是一种可靠的、快速灵敏的检测方法,适用于包含阿昔洛韦前体药物的药动学的研究.
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反相高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中阿呋唑嗪浓度
目的:建立血浆中阿呋唑嗪的反相高效液相荧光检测方法.方法:采用Shimadzu LC-6高效液相色谱仪,Shimadzu C18柱(150 mm×4.6 mm),0.02 mol*L-1磷酸盐缓冲液(pH 2.5)-乙腈(40∶ 60)为流动相,激发波长 374 nm,发射波长 378 nm,流速:1 mL*min-1.结果:血浆中阿呋唑嗪能得到较好的分离,无明显的干扰峰.本方法专属性好,可信度高.低检测浓度为0.78 ng*mL-1,低检测限是39 pg,线性范围0.78～50 ng*mL-1,标准曲线:Y=8 648.7X+767.8(r=0.999,P<0.05),回收率高于70%,日间、日内RSD均在10%以下.结论:符合生物样品的分析要求.
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高效液相色谱-荧光检测法测定贯叶连翘中金丝桃素的含量
目的：建立高效液相色谱-荧光检测法测定贯叶连翘中金丝桃素的含量。方法：色谱柱为C18柱(5 μm,4.6 mm×200 mm),流动相为甲醇-pH 6.5的磷酸盐缓冲液(55∶45)，流速为1.0 mL.min-1，柱温为30 ℃，荧光检测波长λEX=580 nm,λEM=600 nm。结果：该方法的线性范围为2.55～102 ng(r=0.999 9)。平均加样回收率为101.1%，RSD为1.4%(n=5)。低检测限为80 pg。结论：本方法快速，简单，灵敏度极高。
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离子对高效液相色谱荧光法测定人血浆中顺式阿曲库铵的浓度
目的:建立反相离子对高效液相色谱荧光法测定人血浆中顺式阿曲库铵浓度.方法:酸化的血浆样品采用乙腈沉淀蛋白处理,取上清液进样分析.色谱柱为Agilent Eclipse C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为1.5%三氟乙酸-乙腈(55:45),流速0.5 mL·min-1,荧光的激发波长为280 nm,发射波长为320 nm.结果:顺式阿曲库铵在12.4~4960.0 ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998),检测限为1.24 ng·mL-1,平均提取收率为85.1%-88.5%,平均方法回收率为98.3%～102.1%,日内、日间RSD均<3.4%.结论:本方法操作简便、灵敏度高、专一性强、结果可靠,可满足临床检测和药代动力学研究的需要.
关键词： 顺式阿曲库铵 血药浓度 离子对高效液相色谱法 荧光检测 -
柱后衍生化高效液相色谱法测定注射用硫酸阿米卡星
目的:建立柱后衍生化高效液相色谱法测定硫酸阿米卡星含量的方法.方法:色谱柱为Waters SunFire C18(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相为含戊烷磺酸钠和冰醋酸的硫酸钠溶液-甲醇(97:3);柱温25℃,流速1.0 mL·min-1.柱后衍生化试液为邻苯二甲醛溶液,流速0.5 mL·min-1,衍生化反应温度45℃,荧光激发波长360 nm,测定波长440 nm.结果:硫酸阿米卡星在2.09～41.81 mg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率(n=9)为98.6%.结论:该方法简便快速,结果准确可靠,可用于注射用硫酸阿米卡星的含量测定.
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腹腔注射L-丝氨酸后大鼠梗死侧脑皮质L-丝氨酸与D-丝氨酸含量的测定
目的:制作大鼠永久性脑梗死模型,腹腔注射L-丝氨酸,测定梗死侧大脑皮质L-丝氨酸与D-丝氨酸含量的变化,为应用L-丝氨酸辅助治疗脑梗死提供方法学上的依据.方法:利用邻苯二甲醛及N-乙酰半胱氨酸柱前衍生,高效液相色谱荧光检测法测定脑组织中L-丝氨酸与D-丝氨酸含量.结果:流动相A为82％ 0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液,流动相B为18％甲醇条件下,L-丝氨酸与D-丝氨酸得到很好的分离;腹腔注射L-丝氨酸1h后,梗死侧脑皮质L-丝氨酸含量迅速增加,2h即达高峰[(6.85±0.30)μmol·g-],为正常脑组织的4倍以上,12h时仍是正常的2倍以上水平[(3.56±0.22)vs (1.52±0.04)μmol·g-1]；D-丝氨酸水平升高缓慢,升高幅度低,6h时达高峰,为正常的2倍多[(0.75±0.05)vs(0.32±0.01) μmol·g-1].结论:腹腔注射L-丝氨酸能快速升高梗死侧大脑皮质L-丝氨酸水平,对D-丝氨酸影响相对较小.
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测定生物样本中神经酰胺含量的HPLC-FLD法
目的:建立高效液相色谱-荧光检测器分析生物样本中的神经酰胺.方法:神经酰胺及预处理样本在1 mol·L-1氢氧化钾乙醇溶液中沸水浴反应2h脱酰基,再与邻苯二甲醛衍生试剂反应60 ～90 s,采用Kromasil C18(250 mm×4.5 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.02 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(90∶10),流速1.0 mL·min-1,荧光检测器的激发波长和吸收波长分别为340 nm和455 nm,进样量50 μL.结果:神经酰胺浓度在0.05～ 6.4 μg·mL-1范围内与衍生物峰面积呈良好的线性关系(r =0.9999),回收率为93.2％ ～ 107.5％,RSD＜ 7.6％.结论:本方法具有快速、准确、灵敏度高、稳定性好等优点,适用于生物样品中微量神经酰胺的检测.
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高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中替米沙坦浓度及其应用
目的:建立高效液相色谱荧光检测人血浆中替米沙坦浓度的方法,并用于研究替米沙坦片的人体药代动力学.方法:采用固相萃取方法提取血浆中的替米沙坦,色谱柱为Diamonsil C18柱(5μm,4.6 mm×150 mm),以乙腈-磷酸二氢钾缓冲液(61:39,磷酸调pH=3.74)为流动相,流速1.0 mL·min-1,坎地沙坦为内标,荧光检测波长λEx=305 nm,λEm=365 nm.结果:本法测定替米沙坦的线性范围为0.5-144 ng·mL-1,r=0.9998,绝对回收率在79.62%-85.69%(n=5),相对回收率在101.9%-109.0%(n=5),日内和日间RSD分别为4.23%-9.80%和4.03%-9.95%(n=5).结论:本法灵敏、准确,操作简捷,适用于替米沙坦的血药浓度测定及药代动力学研究.
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HPLC-荧光检测法测定人血浆中的替米沙坦
目的:建立一种测定人血浆中替米沙坦的HPLC方法.方法:1 mL血浆样品中加入15%EDTA-K2溶液100μL,混匀后用乙酸乙酯4 mL提取.采用Diamonsil C1s(150 mm ×4.6 mm,5 μm)分析柱,以乙腈-甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(4:3:3,pH 6.7)为流动相,流速1 mL·min-1.荧光法检测,激发波长305 nm,发射波长365 nm.内标为甲磺酸多沙唑嗪.结果:本方法的线性范围为2～500ng·mL-1,低定量限2 ng·mL-1;方法回收率为1∞.6%～105.3%,日内RSD＜7%,日间RSD＜12%.结论:本法操作简便,选择性好,灵敏度高,适用于替米沙坦的人体药代动力学研究.
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高效液相色谱-荧光法测定人血浆中西酞普兰含量
目的:建立快速灵敏的高效液相色谱-荧光检测法测定西酞普兰的血药浓度.方法:血浆样品加入内标(右美沙芬)后用乙醚提取,乙醚层经空气流吹干后用流动相定容,以40μL进样.色谱柱为Kromasil KR100-5 C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相采用0.05 mol·L-1,pH=4.23的磷酸二氢钠缓冲液-乙腈(63:37),流速为0.6 mL·min-1,荧光激发波长为240 nm,发射波长300 nm,内标法定量.结果:本法的低定量浓度为1.3 ng·mL-1,在1.3～260 ng·mL-1浓度范围内线性良好,r=0.9999.日内精密度为1.1%～2.3%,日间精密度为1.7%～4.0%,萃取回收率为84.4%～88.3%,准确度为86.2%～95.6%,整个分析过程在15 min内完成.结论:该法准确、精密度高、重现性好,适用于人血浆中西酞普兰的动力学研究和生物等效性研究.
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HPLC-荧光法测定氨磺必利血药浓度及其药动学研究
目的:建立测定人体血浆中氨磺必利高效液相色谱法,测定健康志愿者口服氨磺必利片48 h内血药浓度,进行药动学研究.方法:采用10％三氯醋酸直接沉淀提取血浆,固定相为C18,()烷磺酸钠醋酸溶液(pH 4.85)-乙腈(80∶ 20)为流动相,荧光检测波长为λex=280 nm,λem=370 nm.结果:氨磺必利线性范围为5～ 800 ng·mL-1(r=0.9997),低、中、高3个浓度平均方法回收率分别为105.1％、105.4％、101.3％,日内、日间精密度RSD均＜4％;AUC0～∞为(3545.74±1199.58)ng·h·mL-,AUC0～t为(3348.50±1161.27)ng·h·mL-1,Cmax为(457.69±232.62) ng·mL-,Tmax为(4.15±1.31)h,t1/2为(10.77±5.77)h.结论:本法简便、快速、经济、准确,可用于测定人血浆中氨磺必利的浓度及药动学研究.
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固相萃取结合HPLC-荧光法测定人血浆中维生素B2含量
目的:建立固相萃取结合HPLC-荧光法测定人血浆中维生素B2含量的方法.方法:采用SiroccoTM96孔蛋白沉淀板和正压固相萃取装置处理样品,采用SymmetryshieldTMRP-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L-1乙酸铵(35:65),流速为0.6 mL·min-1,荧光检测器检测(激发波长:450 nm,发射波长:520 nm).结果:维生素B2线性范围为0.2～10ng·mL-1(r=0.9937).定量下限为0.17 ng·mL1,日内精密度(RSD)为2.0％～4.8％,日间精密度(RSD)为3.8％,方法回收率为101.5％～116.0％(n=3),提取回收率为91.8％ ～ 115.1％.结论:所建方法采用96孔蛋白沉淀装置自动处理样品,高效液相色谱-荧光法测定,可用于临床血浆样品中维生素B2含量的测定.
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马来酸氟吡汀缓释片在Beagle犬体内的药动学和生物等效性研究
目的:建立测定Beagle犬血浆中马来酸氟吡汀浓度的高效液相色谱-荧光检测方法,研究马来酸氟吡汀缓释片在Beagle犬体内单剂量和多剂量的药动学和生物等效性.方法:以替米沙坦为内标,血浆样品加二氯甲烷萃取,Diamonsil C18为色谱柱,0.005 mol ·L-1磷酸氢二钠缓冲液(pH =6.7)-甲醇-乙腈(42∶ 14.5∶43.5)为流动相,流速为1.0 mL· min-1,进样量10μL,荧光检测波长λex=320 nm,λem=370 nm.采用随机双交叉自身对照试验设计,6只Beagle犬口服单剂量、多剂量马来酸氟吡汀缓释片参比制剂、受试制剂后测定血药浓度,计算药动学参数,评价两制剂的等效性.结果:马来酸氟吡汀的浓度在0.06～15.00 μg·mL-1范围内线性关系良好(r=9984),准确度和精密度符合生物样品分析要求；单剂量给药后,参比制剂和受试制剂主要的药动学参数:t1／2分别为(6.97 ±-3.71),(6.39 ±2.29) h;Cmax分别为(3.83 ±0.73),(3.81±1.13) μg·mL-1；Tmax分别为(3.17 ±0.42),(3.67±0.52)h；AUC0 ～48分别为(27.23 ±6.31),(27.17 ±9.33)μg·h·mL-1；AUC0→∞分别为(28.44±7.47),(28.04± 9.37) μg·h·mL-1.多剂量给药后,参比制剂和受试制剂主要药动学参数:t1/2分别为(6.50±2.09),(7.94±1.70)h；Tmax分别为(2.08±0.80),(1.83 ±0.26) h;C88max分别为(4.89 ±0.76),(5.14 ±0.65) μg·mL-1,C88min分别为(0.23±0.19),(0.38 ±0.22) μg·mL-1；AUC88分别为(29.00±8.32),(30.58±4.33) μg·h· mL-1.结论:本测定方法可用于马来酸氟吡汀Beagle犬药动学研究,且两制剂在Beagle犬体内具有生物等效性.
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糖类物质的色谱分析
综述了糖类化合物的色谱分离和检测的方法,包括气相色谱、高效液相色谱和毛细管电泳,主要对糖类化合物衍生方法进行了较为详细的介绍.
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荧光漂白恢复,荧光共振能量转移和荧光相关光谱检测的技术特点
荧光漂白恢复(FRAP)、荧光共振能量转移(FRET)和荧光相关光谱(FCS)是三种以荧光为基础的检测技术,常用来研究分子间相互作用.对三种技术的特点做以比较和讨论.
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高效液相色谱荧光法测定水产品中四环素类残留量
[目的]建立应用高效液相色谱荧光法测定水产品中四环素类药物残留量方法.[方法]通过对水产样品的提取、净化研究及仪器条件的选择和优化,采用荧光检测器一次测定痕量土霉素、四环素和金霉素.[结果]方法的检出限:土霉素(OTC):0.005 mg/kg;四环素(TC):0.005 mg/kg;金霉素(CTC):0.010 mg/kg.加标回收率:土霉素(OTC):61.0%～78.2%;四环素(TC):81.4%～83.0%;金霉素(CTC):69.0%～73.8%.[结论]本方法样品前处理简单,灵敏度高,能满足各国对水产品中四环素类药残检测低限的要求.
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二组分混合DNA样品STR图谱解释
对混合样品STR图谱的结果进行解释.实验模拟二组分DNA混合样品,复合扩增荧光检测10个基因座,比较混合样品谱带,计算等位基因峰面积比.结果发现:二组分DNA混合样品的等位基因数增加,样品的混合比例不同就出现峰面积的不平衡.在等位基因峰面积比值与样品组分混合比例接近时,可由峰面积比值推断混合样品的混合比例.在混合比例为1:20时,基本上检测不到来自少量混合成分的等位基因,表现为单一组分图谱;在混合比例为1:10时,含量低的组分的等位基因峰面积接近与主要组分的"Stutter"峰面积,与来自主要组分的等位基因峰面积差异很明显.能检出混合样品中少量成分等位基因的高混合比例为1:10.
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深圳地区汉族人群13个STR基因座的遗传多态性
运用荧光标记、复合扩增、ABI3100型基因分析仪电泳、自动荧光检测分型,对居住深圳地区的205个汉族无关个体的D3S1358、vWA、FGA、D8S1179、D21S11、D18S51、D5S818、D13S317、D16S539、TH01、TPOX、CSF1PO、D7S820等13个STR基因座进行了群体遗传多态性分析,获得上述13个STR基因座的频率分布资料,得到多项群体遗传学参数,现报道如下.
