首页 > 文献资料
-
RP-HPLC法测定人血浆中血管紧张素Ⅱ的浓度
目的:建立以反相高效液相色谱(RP-HPLC)-荧光法检测人血浆中血管紧张素Ⅱ浓度的方法.方法:采用固相萃取法纯化血浆样本,以荧光胺柱前衍生后进样测定.以乙腈-10 mmol·L-1三羟甲基氨基甲烷盐缓冲液(pH 8.5)作为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL·min-1,色谱柱为LunaC5,激发波长为273 nm,发射波长为476 nm.结果:血管紧张素Ⅱ血药浓度在10～200 ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9995),低栓出限(S/N=3)为5 ng·mL-1,日内、日间RSD分别为1.65％和4.20％.结论:本方法快速、灵敏、准确、重复性好,可用于血浆中血管紧张素Ⅱ浓度的检测.
-
高效液相色谱-荧光法测定大鼠血清中睾酮含量
目的 采用高效液相色谱一荧光法测定大鼠血液中睾酮的含量.方法 色谱柱为Alltech C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-乙醇(90:10),荧光检测器,检测波长为λ=360 nm和λem=420 nm.结果 血睾酮质量浓度在108~1 620 ng/mL范围内与峰面积线性关系良好,低检出限为10.8 ng.高、中、低3个质量浓度平均回收率分别为93.14%(RSD=3.00%),85.99%(RSD=9.90%),80.14%(RSD=4.04%).日内精密度的RSD为4.34%.结论 高效液相色谱-荧光法可用于血液中血睾酮的含量测定.
-
免疫亲和柱净化光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法测定动物类药材中黄曲霉毒素
目的 建立动物类药材中黄曲霉毒素B1,B1,G1,C2的免疫亲和柱净化光化学衍生高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)法.方法 样品经甲醇-水(80∶20)提取后,通过免疫亲和柱净化、柱后光化学衍生、高效液相色谱-荧光检测器测定.结果 在优化条件下,黄曲霉毒素G2,G1,B2,B1的检出限分别为0.15,0.25,0.1,0.2 μg/kg,回收率为78.8%～106.7%,RSD均低于7.1%.结论 所用方法简便快速、灵敏度高、重现性好,可满足动物类药材中黄曲霉毒素检测的需要.
-
高效液相色谱-荧光检测法测定大气细颗粒物(PM2.5)中的双酚A
目的 建立大气细颗粒物(PM2,)中双酚A的高效液相色谱-荧光测定法,并用于成都市大气细颗粒物(PM2.5)中BPA的测定.方法 以玻璃纤维滤纸为滤料,用中流量PM2.5采样器以100 L/min的流速连续采样24 h.滤纸样品经0.1％盐酸-甲醇超声提取后经C18小柱固相萃取,用0.1％氨水-甲醇洗脱,洗脱液调pH 2 ～3后,C18色谱柱(250mm ×4.6 mm,5μm)分离,荧光法检测(λex=227 nm,λem=310 nm).结果 在0.001μg/rnl.0.020 μg/ml范围内回归方程为y =5.39×106x+ 5146,相关系数大于0.997;方法检出限为3.0×10Jμg/ml,定量限为1.1×10-4 μg/ml,低检出含量为200 pg/m3(取样1/8分析),加标回收率为94.9％～104.8％,RSD为2.84％ ～9.23％.利用本法检测了20个成都市大气细颗粒物样品,测得双酚A含量范围在＜ 200.4654 pg/m3,平均含量为1 455 pg/m3.结论 本法灵敏度高,准确度好,检出限低,适用于大气中细颗粒物中双酚A的检测.成都市大气细颗粒物中双酚A的含量高于日美等发达国家以及我国北京、广州、香港,但低于印度的报道值.
-
超高效液相色谱-二极管阵列-荧光检测器串联测定全血中的4种杀鼠剂
目的 建立一种测定人体全血中4种杀鼠剂的超高效液相色谱法.方法 取0.2 ml全血用1ml乙酸乙酯提取后,以BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)为色谱柱,1％乙酸+甲醇(15+85)为流动相,流速为0.3 ml/min,进行超高效液相色谱分析.结果 4种杀鼠剂分离效果良好,线性范围为0.05～ 5.00 mg/L,方法检出限为0.01 ～ 0.04 mg/L,平均加标回收率为70.28％ ～ 113.67％,相对标准偏差为1.54％～10.7％.结论 本方法样品前处理简单、色谱分离速度快、定性准确,可用于突发公共卫生事件的中毒原因诊断.
-
柱前衍生高效液相色谱-荧光检测/质谱联用测定青藏高原产沙棘果实中的5种三萜酸成分
目的 采用柱前衍生高效液相色谱-荧光检测/质谱联用(HPLC-FLD-APCI/MS)分析青藏高原沙棘果实中的三萜酸.方法 选择2-(7H-二苯并[a,g]咔唑)乙基对甲苯磺酸酯作为HPLC柱前荧光衍生标记试剂,采用Hypersil BDS C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为5％乙腈(A)-乙腈(B),流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,进样量10 μL,检测波长为λex=300 nm、λem=395 nm.结果 5种三萜酸衍生物均具有较好的线性、精密度、回收率和较低的检测限,其r均大于0.9994,检测限为1.21～1.54 ng·mL-1.结论 青藏高原产沙棘果实中富含三萜酸,尤其是熊果酸和齐墩果酸,还含有少量的桦木酸;不同产地沙棘果实中所含三萜酸的种类相同,但含量存在一定的差异.
-
柱前衍生HPLC分析石榴皮中的脂肪酸
目的 采用HPLC-FLD-MS法分析石榴皮中的脂肪酸.方法 用2-(11H-苯[a]咔唑)乙基对甲苯磺酸酯作为柱前荧光衍生试剂,选择Hypersil BDS C8液相色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相A、B分别为100％、5％乙腈,流速1.0mL· min-1柱温35℃,进样量10μL,检测波长荧光激发λex 279 nm、发射λem 380 nm.结果 所有脂肪酸衍生物均有较好的线性、灵敏度、回收率和精密度,r均大于0.9991,检测限为0.38 ～1.95 ng·mL-1.结论 石榴皮中富含饱和与不饱和脂肪酸,尤其是油酸和棕榈酸.该方法可为石榴皮的药理应用研究和质量控制提供依据.
-
柱前衍生-HPLC测定大鼠海马组织中的谷氨酸和瓜氨酸
目的 采用HPLC法测定大鼠脑内海马组织中谷氨酸和瓜氨酸的浓度.方法 取20只大鼠的海马组织,经低温匀浆处理,利用邻苯二甲醛柱前衍生,采用Diamonsil RP-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.05mol· L-1乙酸钠(乙酸调pH6.0)水溶液进行梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,柱温30℃,荧光检测λex=334 nm、λem 456 nm,内标为β-丙氨酸.结果 0.5～100 μmol·L-1谷氨酸和瓜氨酸与峰面积的线性关系良好(r2分别为0.998、0.991),低检测限均为0.1μmol· L-,低、中、高浓度谷氨酸和瓜氨酸的加样回收率分别为90.6％、96.9％、98.8％和95.3％、97.9％、91.5％.日内和日间精密度的RSD ＜8.0％.结论 所用方法准确简便,可用于大鼠海马组织中谷氨酸和瓜氨酸的浓度分析.
-
罐疗提高盐酸维拉帕米透皮吸收的研究
目的:研究中医传统付罐疗法促进盐酸维拉帕米(Ver)穴位透皮吸收.方法:应用RP-HPLC荧光检测色谱法,流动相组成为甲醇-水-三乙胺=∶68∶32∶0.4,冰醋酸调pH为6.5,荧光检测波长Ex=275nm,Em=320nm.结果,罐疗能显著提高Ver的透皮吸收,初步建立了一种新的物理促进药物透皮渗透的方法.
-
豚鼠脑在体微透析液氨基酸AccQ·Tag HPLC荧光测定法
目的 建立柱前6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)衍生高效液相色谱(HPLC)脑在体微透析液中痕量氨基酸的检测方法.方法 采用AQC为柱前衍生剂,氨基酸专用分析柱,二元梯度洗脱,荧光检测方法分析样品中的氨基酸.结果 该法对脑微透析液中17种氨基酸分离较好,相关系数为0.902 5～0.999 5,平均回收率为94.24%～98.34%,平均CV小于5%.在50 min内可完成微透析液中17种氨基酸的测定.结论 该方法稳定性好、敏感性和准确性较高,适用于豚鼠脑在体微透析液中痕量氨基酸水平的测定.
-
浦东新区大团镇小型医疗机构环境荧光检测量化评估
目的：研究浦东新区大团镇小型医疗机构环境荧光检测量化评估情况。方法选择2016年4月~2016年9月间东新区大团镇16所村卫生所等小型医疗机构的诊室、治疗室、卫生间以及医疗器械的的1743个清洁接触面进行荧光标记定向环境清洁评价，同时对保洁员实施现场指导和培训，比较实施干预前后的清除率。结果通过对16所卫生所诊室、治疗室、卫生间，1037个接触清洁面进行检测，清除率仅仅达到36.3%，通过实施干预培训教育后，接触清洁棉清除率达到65.0%，实施前后差异有统计学意义（P<0.05）。基线调查医疗器械清洁面的清除率42.0%，病床为40.2%，卫生间为15.9%；实施干预措施后，分别为73.1%，68.9%，42.6%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论对小型医疗机构实施环境荧光检测量化评估能够充分反映出保洁人员的操作质量，同时还能够有效提升诊室、治疗室、卫生间等环境，达到要求的清洁水平。
-
HPLC -荧光法测定α-细辛醚热熔压敏胶贴剂的相对生物利用度
目的:建立家兔血浆内α-细辛醚的HPLC -荧光测定法,研究α-细辛醚热熔压敏胶贴剂在家兔体内的相对生物利用度.方法:家兔给予α-细辛醚混悬液或α-细辛醚贴剂后于不同时间点采血,血浆样品处理后以甲醇-水( 75∶25)为流动相,使用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(250 nm×4.6mm,5μm)进行分离,流速1.0 mL· min-1,荧光检测器激发波长为265 nm,检测波长为365 nm,测定血浆药物浓度,计算药物动力学参数和相对生物利用度.结果:α-细辛醚在浓度0.01～1μg·mL-1(r =0.9998)范围内线性关系良好,检测限为0.005 μg·mL-1,方法学回收率为96.2％～102.0％,日内与日间RSD均＜4.5％.家兔口服α-细辛醚混悬液后的AUCo→t为(0.53±0.23) μg·h·mL-1,贴剂给药的AUCo→t为(7.86±2.15) μg·h·mL-1,贴剂的相对生物利用度为1494％.结论:该法简便准确,可用于家兔血浆内α-细辛醚浓度的测定；α-细辛醚热熔压敏胶贴剂的相对生物利用度高.
-
凝胶渗透色谱-柱后衍生高效液相色谱法测定中药材中13种N-甲基氨基甲酸酯农药残留
目的:建立了中药材中13种N-甲基氨基甲酸酯农药残留量的高效液相分析方法.方法:样品用丙酮提取,经凝胶渗透色谱净化,通过柱后衍生,荧光检测器测定农药残留量.结果:除涕灭威和涕灭威亚砜外,3个水平回收率均在75.7%～102.3%,相对标准偏差为0.4%～7.0%.方法检测限为0.01 mg·kg-1,定量限为0.03 mg·kg-1.在7种中药材中均未检出农药残留.结论:本方法灵敏,准确,适用于中药材中13种N-甲基氨基甲酸酯农药残留的检测.
关键词： 凝胶渗透色谱 柱后衍生 荧光检测 N-甲基氨基甲酸酯农药 中药材 -
高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中多沙唑嗪的浓度
目的:建立人血浆中多沙唑嗪浓度的高效液相色谱-荧光检测方法.方法:以特拉唑嗪为内标.血浆样品经碱化后用乙醚萃取.采用Supelcosil ABZ+PLUS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),20 mmol·L-1磷酸盐缓冲液-乙腈(67:33)为流动相,流速为1.20 mL·min-1,荧光检测波长为λex=335 nm,λem=390nm,进样量为50μL.结果:在1.0～50.0 μg·L-1浓度范围内,测定方法具良好的线性关系,线性方程为:A:0.1639C-0.0253(r=0.9998),准确度和精密度符合生物样品分析要求,低定量浓度为1.0 μg·L-1.结论:本测定方法具灵敏度高、准确和快速的优点,可用于甲磺酸多沙唑嗪人体药代动力学和生物等效性研究.
-
高效液相色谱法测定人血浆中盐酸倍他洛尔的含量
目的:建立人血浆中盐酸倍他洛尔浓度的高效液相-荧光检测方法.方法:10名受试者口服单剂量(40 mg)盐酸倍他洛尔片,采用高效液相-荧光色谱法测定不同时间血药浓度.采用依利特Hypersil-ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),0.2%磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇(60:37:3)为流动相,流速1.0 mL·min-1,荧光检测波长为λex=227 nm,λem=301nm.结果:倍他洛尔浓度在2.5～80μg·L-1范围内,线性良好(r=0.9998),低检测限达0.5 ng·mL-1(S/N＞3),绝对回收率大于66%,符合生物样品分析要求.受试者口服倍他洛尔片剂,达峰时间Tmax为(4.4±1.1)h,峰浓度Cmax为(52.39±11.14)μg·L-1,T1/2ke为(15.78±2.43)h,T1/2ka为(1.07±0.66)h,V/F=(821.5±146.7)L,AUC0-t=(1088±178)μg·h·L-1,AUCo-∞=(1219±241)μg·h·L-1.结论:此分析方法准确、灵敏度高、重现性好,可用于盐酸倍他洛尔人体药代动力学研究和生物等效性研究.
-
RP-HPLC荧光检测法测定大鼠血浆中甲磺酸二氢麦角毒碱浓度
目的:建立测定大鼠血浆中甲磺酸二氢麦角毒碱的反相高效液相荧光检测方法.方法:血浆样品预处理采用乙腈直接沉淀法去除蛋白质.采用L-7000型高效液相色谱仪,Phenomenex C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为水-乙腈-三乙胺(32:18:1),流速为1.1 mL·min-1;荧光检测波长:λEx=290 nm,λEm=348 nm;柱温:30℃;进样量:50 μL.外标法峰面积定量.结果:血浆中甲磺酸二氢麦角毒碱能得到较好的分离,无明显的干扰峰.测定方法在1.0～200.0ng·mL-1范围内具有良好的线性关系,方法回收率为96.2%～100%,日内、日间RSD均小于15%,低检测浓度为1.0ng·mL-1,低检测限为50pg.结论:本法灵敏、准确、快速,适用于甲磺酸二氢麦角毒碱鼻腔喷雾剂的药物动力学和生物利用度的研究.
-
反相高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中坎地沙坦浓度
目的:建立血浆中坎地沙坦的反相高效液相荧光检测方法.方法:采用Agilent 1100高效液相色谱仪,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm);以磷酸缓冲液(含0.1%磷酸,0.15%三乙胺)-乙腈(69:31)为流动相,流速1.0mL·min-1;柱温40℃;激发波长254 nm,发射波长380 nm.以厄贝沙坦作为内标.结果:血浆中坎地沙坦能得到较好的分离,血浆中杂质不干扰测定.坎地沙坦血浆线性范围为2.04～510 ng·mL-1,标准曲线:Y=0.0048C+0.0006(r=0.9999),检测限为2.04ng·mL-1,方法回收率均接近100%.结论:本方法专属性强,灵敏度高,符合生物样品的分析要求.
-
HPLC-荧光检测法测定人血浆中的奥美沙坦
目的:建立一种测定人血浆中奥美沙坦浓度的HPLC-FLD方法.方法:血浆样品用适量甲醇涡旋混匀后用OASISHLB小柱进行萃取.采用Diamonsil C18(150 mm ×4.6 mm,5 μm)分析柱,以乙腈-甲醇-水-冰醋酸(25:40:35:0.1)为流动相,流速1 mL·min-1.荧光法检测,激发波长260 nm,发射波长370 nm.内标为替米沙坦.结果:本方法的线性范围为0.05～3μg·mL-1,低定量限0.05μg·mL-1,相对回收率为98.7%～101.7%,日内RSD＜7%,日间RSD＜10%.结论:本法样品处理简单、选择性好,适用于奥美沙坦酯制剂的人体药代动力学研究.
-
大鼠血清中单胺类递质的高效液相色谱-荧光检测法分析
目的:用HPLC-FLD分离测定大鼠血清中单胺类递质,研究其与PMS肝气逆证的内在关系.方法:采用Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm,Agilent公司),流动相为甲醇-0.02 mmol·L-1柠檬酸三钠水溶液(1:99,用盐酸调pH5.0),流速1.0 mL·min-1,激发波长280 nm,发射波长315 nm.血清样品经5%(体积分数)高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液进样,测定血清中单胺类递质含量.结果:大鼠血清中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的回收率分别为97.6%,98.0%,96.4%,103.0%;RSD为1.1%～1.2%,重复性较好.结论:结果表明,该方法操作简便、快速、准确,为血清中单胺类递质检测的一种理想方法,并适用于临床相关研究.
-
RP-HPLC法测定人血浆中扎来普隆浓度
目的:建立测定人血浆中扎来普隆浓度的反相高效液相色谱法.方法:血浆样品中加入内标β-萘酚后用乙酸乙酯提取.固定相为Supelcosil C8色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为0.04mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(6:5,含三乙胺0.3%,磷酸调至pH 5.0),流速为1.0 mL·min-1.荧光检测:荧光激发波长345 nm,发射波长460 nm.结果:本方法线性范围为1-128 ng·mL-1(r=0.9995),低检测浓度为0.2 ng·mL-1,提取回收率为87.4%-91.9%,方法回收率为98.8%-100.8%,日内RSD为2.9%-5.4%,日间RSD为3.8%-13.3%.结论:本法简便、准确,适用于扎来普隆药代动力学的研究.
