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阻断PI3K/PKB通路对卵巢癌OVACA-3细胞株增殖和凋亡的影响
目的 采用PI3K/PKB信号传导通路特异性抑制剂LY294002作用于人卵巢癌OVACA-3细胞,观察阻断PI3K/PKB信号传导通路对卵巢癌细胞增殖和凋亡等生物学特性的影响,揭示阻断PI3K/PKB信号传导通路治疗卵巢癌的机理和可行性.方法 不同浓度的PI3K抑制剂LY294002作用于人卵巢癌OVACA-3细胞后,运用Western Blotting检测P-AKT及细胞核内NF-K Bp65表达情况;MTT法、Annexin v-FITC流式细胞技术检测不同浓度的LY294002对卵巢癌OVACA-3细胞增殖及凋亡的影响.结果 LY294002可抑制人卵巢癌OVACA-3细胞中通路效应蛋白AKT、NF-κBp65的激活,且呈浓度及剂量依赖性.LY294002对细胞增殖抑制作用具有时间依赖性(F=10.398,P=0.001)和剂量依赖性(F=9.801,P=0.002).LY294002可使卵巢癌细胞S期比例显著减少,G0/G1期比例增多,提示LY294002促使细胞在细胞周期G0-G1期受到阻滞.终,抑制卵巢癌细胞增殖,促使其发生细胞凋亡,使细胞周期停滞在G1期.结论 PI3K/PKB信号传导通路阻断剂LY294002有可能成为治疗卵巢癌的新药,阻断PI3K/AKT信号传导通路可作为治疗卵巢癌的新切入点.
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PI3K-AKT-Bcl-2抗凋亡途径与瘢痕癌癌细胞凋亡相关性探讨
目的:探讨PI3K/AKT信号传导通路中PI3K、AKT及其下游靶基因编码的Bcl-2蛋白与瘢痕癌癌细胞凋亡的相关性.方法:以15例病理性皮肤瘢痕被覆上皮和20例皮肤瘢痕癌组织为研究对象,以10例正常皮肤表皮组织为对照.这些标本均为石蜡包埋组织,源于遵义医学院附属第一和第五医院病理科2006-01-01-2011-12-30的外检标本.1)采用免疫组织化学技术(SP法)分别检测以上3组组织中PI3K、AKT和Bcl-2蛋白的表达.2)采用核酸分子原位杂交技术检测PI3K mRNA、AKT mRNA的表达.3)以原位末端标记法(Tunel法)检测细胞的凋亡水平.4)免疫组化和原位杂交图像运用图像分析软件计算其平均光密度和阳性面积,Tunel图像计算其凋亡指数,所得数据运用SPSS 16.0软件包进行统计学分析.结果:1)PI3K蛋白和PI3K mRNA在正常皮肤表皮、病理性瘢痕上皮和瘢痕癌组织中分别呈阴性、弱阳性和阳性表达.瘢痕癌组PI3K表达水平为0.172±0.039,表达强度为0.301±0.045,与正常皮肤组0.004±0.003和0.185±0.021,病理性瘢痕组0.011±0.009和0.203±0.034比较,差异有统计学意义,P＜0.01;瘢痕癌组PI3K mRNA表达水平为0.137±0.037,表达强度为0.379±0.054,与正常皮肤组0.008±0.007和0.265±0.016,病理性瘢痕组0.027±0.012和0.293±0.031比较,差异有统计学意义,P＜0.01;但正常皮肤组与病理性瘢痕组比较,差异无统计学意义,P＞0.05.2)AKT蛋白在瘢痕癌组表达水平为0.168±0.052,表达强度为0.388±0.081,与正常皮肤组0.005±0.005和0.218±0.036,病理性瘢痕组0.028±0.025和0.282士0.049比较,差异有统计学意义,P＜0.01;AKTmRNA在瘢痕癌组表达水平为0.144±0.032,表达强度为0.345±0.031,与正常皮肤组0.017±0.004和0.244士0.025,病理性瘢痕组0.037±0.019和0.257±0.027比较,差异有统计学意义,P＜0.01;正常皮肤组与病理性瘢痕组比较,差异无统计学意义,P＞0.05.3)Bcl-2在3组组织中均呈阴性表达.其表达水平、表达强度在正常皮肤组(0.006±0.003和0.168士0.019)、病理性瘢痕组(0.008±0.005和0.175±0.027)和瘢痕癌组(0和0.167±0.015)之间比较,差异无统计学意义,P=0.136.4)正常皮肤组和病理性瘢痕组AI分别为(8.48±0.78)％和(8.14±0.53)％,高于瘢痕癌组(6.41±0.60)％,且差异有统计学意义,P=0.01;但正常皮肤组与病理性皮肤瘢痕组比较,差异无统计学意义,P=0.129.结论:PI3K/AKT信号传导通路的抗凋亡途径,可能是通过Bcl-2以外的其他效应分子来实现的.
关键词： 瘢痕癌 PI3K/AKT信号传导通路 Bcl-2 凋亡 -
SDF-1和PI3K/Akt通路对卵巢癌CAOV3细胞增殖和侵袭能力的影响研究
目的:探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)通过磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号传导通路对卵巢癌CAOV3细胞增殖和侵袭能力的影响及其作用机制.方法:将卵巢癌CAOV3细胞分为对照组(未给药),实验组1(100 ng/ml SDF-1),实验组2(50 μmol/L PI3K/Akt信号传导通路抑制剂LY294002)和实验组3(50 μmol/L LY294002,作用0.5h后加入100 ng/ml SDF-1).采用MTT法检测卵巢癌CAOV3细胞经不同药物处理后24、48和72 h的细胞增殖能力.采用Transwell体外细胞侵袭实验和Western Blot法检测经不同药物处理48h后卵巢癌CAOV3细胞的侵袭能力、Akt磷酸化程度和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平.结果:SDF-1可以明显促进卵巢癌CAOV3细胞的增殖和侵袭(P＜0.05),LY294002可以抑制卵巢癌CAOV3细胞的增殖和侵袭(P＜0.05);实验组3卵巢癌CAOV3细胞的增殖和侵袭能力与实验组2比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:SDF-1能够通过PI3K/Akt信号传导通路诱导MMP-9蛋白表达上调,增强卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力;应用LY294002阻断PI3 K/Akt信号传导通路可显著抑制SDF-1对人卵巢癌CAOV3细胞增殖和侵袭的促进作用.
关键词： 卵巢肿瘤 基质细胞衍生因子-1 PI3K/AKT信号传导通路 细胞增殖 细胞侵袭 -
PI3K/Akt信号传导通路及其在结直肠癌中的研究进展
结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一,近十年来,结直肠癌在我国的发病率呈逐年上升的趋势.已有研究表明,PI3K/Akt信号传导通路是与细胞增殖和细胞凋亡关系密切的信号传导通路之一.随着PI3K/AKt信号通路在结直肠癌发生、发展中的研究不断深入,该通路对结直肠癌发生、发展及治疗药物的研发具有十分重要的价值.本文就PI3K/Akt信号传导通路在结直肠癌发生、发展和治疗中的作用以及机制的研究进展作一综述.
关键词： PI3K/AKT信号传导通路 结直肠癌 -
PI3K/AKT信号传导通路与鼻咽癌侵袭转移关系的探讨
目的：观察PI3K/AKT信号传导通路与鼻咽癌侵袭转移之间的对应关系。方法选择我院及遵义医学院所收集的存档石蜡标本共计50例作为分析对象，25例标本为无淋巴道转移的鼻咽癌组织，25例标本为有淋巴道转移的鼻咽癌组织，分别设置为对照组以及观察组。所有标本均进行HE染色以及免疫组化染色处理，对处理结果进行观察分析。结果对照组患者P13K与E-cad表达呈负相关关系，AKT与E-cad表达呈负相关关系，P＜0.05，具有统计学意义；观察组患者P13K与E-cad表达呈负相关关系，P＜0.05，具有统计学意义。 AKT与E-cad表达无明显相关性关系，P＞0.05，无统计学意义。结论 PI3K/AKT信号传导通路的激活与鼻咽癌侵袭转移之间存在相关关系，值得临床重视。
关键词： PI3K/AKT信号传导通路 鼻咽癌侵袭转移 关系 -
膀胱尿路上皮癌中PTEN甲基化与PI3K/Akt信号通路的关系
目的 探讨膀胱尿路上皮癌中PTEN基因启动子甲基化与PI3 K/Akt信号传导通路的关系.方法 应用甲基化特异性PCR MSP、Western Blot方法,检测41例膀胱尿路上皮癌和18例正常膀胱组织中PTEN基因启动子甲基化状态,并进一步分析其与PI3 K/Akt信号转导通路的相关性.结果 膀胱尿路上皮癌中PTEN基因启动子甲基化率为53.66％(22/41),明显高于正常膀胱组织的0％ (0/18),2组间差异有统计学意义(P＜0.01);在41例膀胱尿路上皮癌组织中,PTEN甲基化阳性组P-Akt的相对表达量为(1.86 ±0.13),显著高于阴性组(0.92±0.11),二者差异有统计学意义(P＜0.05),而2组间Akt的相对表达量则无明显差异.结论 膀胱尿路上皮癌中PTEN基因启动子存在高甲基化状态,且与PI3K/Akt信号转导通路蛋白表达呈正相关.
关键词： 膀胱尿路上皮癌 PTEN甲基化 PI3K/AKT信号传导通路 -
淫羊藿苷调控急性淋巴细胞白血病PI3K/Akt信号传导通路的实验研究
目的 观察淫羊藿苷对近交系DBA小鼠急性淋巴细胞白血病磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号传导通路的影响并分析其机制. 方法 近交系DBA/2小鼠60只,采用皮下注射急性淋巴细胞白血病细胞系L1210细胞以建立L1210白血病模型, 然后随机均分为模型对照组、阳性对照组和淫羊藿苷2.5 mL/kq组、淫羊藿苷5 mL/kq组和淫羊藿苷10 mL/kq组(n=12只),1周后 淫羊藿苷2.5 mL/kq组、5 mL/kq组和10 mL/kq组灌胃给予对应剂量的淫羊藿苷,模型对照组灌胃给予等体积0.9%氯化钠注射液对照,阳性对照组灌PI3K/Akt抑制剂LY294002对照. 治疗3周后采用人工法计数尾静脉血细胞分类及血象;取小鼠肝、脾组织,采用Westem blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及磷酸化蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达,实时定量PCR(RT-PCR)检测组织同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN) mRNA和Akt mRNA的表达. 结果 与模型对照组比较,淫羊藿苷2.5 mL/kq组、5 mL/kq组和10 mL/kq组尾静脉血细胞淋巴细胞、白细胞和L1210细胞总数均明显降低,而中性粒细胞升高(P＜0.05);小鼠肝、脾组织Bcl-2、p-Akt蛋白和Akt mRNA蛋白表达水平显著降低,PTEN蛋白和PTEN mRNA则高表达(P＜0.05);且上述指标中,淫羊藿苷 5 mL/kq 组与2.5 mL/kq组比较(P＜0.05);淫羊藿苷10 mL/kq与5 mL/kq组和2.5 mL/kq组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 至治疗结束时淫羊藿苷2.5 mL/kq组、5 mL/kq组和10 mL/kq组小鼠存活数、体质量、肝脾和皮下瘤重与模型对照组比较(P＜0.05),差异有统计学意义.结论 淫羊藿苷可能通过阻断PI3K/Akt信号传导通路而实现抑制L1210细胞增殖效应,且这种作用呈剂量依赖性.
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磷脂酰肌醇3激酶/Akt在溃疡性结肠炎中的表达
[目的]探讨PI3K/Akt信号传导通路在溃疡性结肠炎(UC)和小鼠DSS结肠炎发病中的作用.[方法][1]收集UC患者40例,20例结肠癌旁正常组织作为对照,采用体外组织培养观察P13K/Akt信号传导通路抑制剂Wortmannin对UC肠黏膜活检组织磷酸化Akt (p-Akt)表达的影响.[2]32只Balb/C小鼠随机分成4组:正常对照组、DSS模型组、DMSO载体组和Wortmannin干预组,以5%DSS溶液构建DSS小鼠结肠炎模型,观察各组小鼠的疾病活动指数(DAI)、组织学评分和Wortmannin对小鼠肠黏膜组织p-Akt表达的影响.[结果][1]与未用Wortmannin处理的UC组比较,Wortmannin处理后UC肠黏膜组织p-Akt的表达明显降低(P<0.05).[2]Wortmannin干预组小鼠的DAI评分、组织学评分及肠黏膜p-Akt的表达明显低于DSS模型组和DMSO载体组,高于正常对照组(P<0.05),而DSS模型组和DMSO载体组小鼠之间无统计学差异(P>0.05).[结论][1]PI3K/Akt信号转导通路参与了溃疡性结肠炎的发生发展.[2]PI3K的抑制剂Wortmannin能阻断PI3K/Akt信号转导通路,减轻炎症反应.
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鸦胆子油乳注射液对胶质瘤细胞侵袭性的影响及其可能机制
目的 探讨鸦胆子油乳注射液降低胶质瘤细胞侵袭性的作用与hosphatidylinositol 3 kinase/protein kinasc B(PI3K/AKT)信号通路之间的关系.方法 采用鸦胆子油乳注射液处理培养的C6胶质瘤细胞,MTT法检测胶质瘤细胞的抑制率,Western blot法检测胶质瘤细胞内PI3K、AKT及核因子(NF)-kB蛋白的表达水平,结晶紫染色法观察透过Transwell下室面的胶质瘤细胞数.结果 鸦胆子油乳注射液可以抑制PI3K、AKT及NF-kB的蛋白表达水平,且分别于鸦胆子油乳注射液作用30 min、60 min和120 min时抑制程度高.而鸦胆子油乳注射液作用180 min时对C6胶质瘤细胞增殖的抑制作用强,且此时Transwell下室面的胶质瘤细胞数少.结论 鸦胆子油乳注射液可能是通过抑制PI3K/AKT信号传导通路抑制胶质瘤细胞的增殖,进而降低胶质瘤细胞的侵袭性.
关键词： 胶质瘤 鸦胆子油乳注射液 PI3K/AKT信号传导通路 肿瘤侵袭性 -
结肠癌组织中PTEN蛋白表达与PI3K/AKT信号通路的关系
目的 探讨抑癌基因PTEN与结肠癌发生发展的关系及其与PI3K/AKT信号传导通路的相关性.方法 应用Western blot蛋白印迹技术和免疫组织化学方法检测 32例结肠癌及癌旁正常组织中 PTEN和p-AKT蛋白的表达.结果 PTEN蛋白在结肠癌中表达的阳性率 (31.25%)低于癌旁正常组织 (96.87%) (P＜0.01);而p-AKT蛋白在结肠癌中表达的阳性率(87.5%)高于癌旁正常组织 (15.62%) (P＜0.01);两种蛋白的表达呈负相关(r=-0.872,P＜0.01),且表达水平与肿瘤的分化程度、Duke's分期、有无淋巴结转移及远处器官转移有关(P＜0. 05).结论 PTEN蛋白表达缺失导致AKT信号传导通路持续活化可能在结肠癌的发生发展过程中起着重要作用.
关键词： 结肠癌 PTEN PI3K/AKT信号传导通路 -
皮肤瘢痕癌PI3K/AKT信号通路中PI3K,Akt,Bcl-2的表达
目的 检测瘢痕癌中PI3 K/A KT信号通路中PI3K,AKT及其下游靶基因Bcl-2的表达,分析该通路靶向治疗靶点及靶向治疗的可行性.方法 研究对象为瘢痕癌组织,以正常皮肤表皮为对照.免疫组织化学(SP法)技术检测PI3K,AKT,Bcl-2蛋白的表达;原位杂交技术检测PI3K mRNA,AKT mRNA的表达.结合图像分析,分别计算被检组织中所检各项指标的平均光密度和阳性面积,所有数据运用SPSS16.0软件进行统计学分析.结果 PI3K蛋白及其mRNA在正常皮肤表皮呈阴性表达,在瘢痕癌组织中呈阳性表达.瘢痕癌组表达水平、表达强度与正常皮肤组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).AKT蛋白及其mRNA在正常皮肤表皮呈阴性表达,在瘢痕癌组织呈强阳性表达.瘢痕癌组表达水平、表达强度与正常皮肤组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).Bcl-2在正常皮肤表皮和瘢痕癌组织中均呈阴性表达.其表达水平、表达强度两组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PI3K,AKT可能是瘢痕癌的致癌位点,实施靶向治疗的可行性存在.Bcl-2可能具有致癌位点的多样性,是否是瘢痕癌的致癌位点有待进一步探讨.
关键词： 瘢痕癌 PI3K/AKT信号传导通路 Bcl-2 靶向治疗 -
甲状腺癌侵袭性相关的分子生物学研究进展
甲状腺癌是头颈部常见的恶性肿瘤,明确可预测和判定其预后的特异性肿瘤分子标记物对于甲状腺癌的诊断、治疗及预后判断具有重要意义.本文将对与甲状腺癌侵袭性相关的信号传导通路、抑制性细胞因子、肿瘤微环境的分子生物学新研究进展予以综述.
