丁酸盐通过调控酸性鞘磷脂酶缓解烫伤诱导的T细胞损失的小鼠实验研究

目的 探讨丁酸盐调控烫伤诱导的T细胞变化的作用机制.方法 将小鼠随机分为3组:对照组(腹腔注射灭菌的生理盐水1.5 ml)、烫伤组(烫伤模型)和丁酸组(烫伤模型+腹腔注射1 g/kg的丁酸注射).采用高效液相色谱于烫伤模型建立后第1、2、3、4、5、6、7和8天检测对照组和烫伤组小鼠粪便中丁酸盐浓度.平板培养法检测3组中肠道菌群,试剂盒法检测酸性鞘磷脂酶(Asm)活性,流式细胞术检测T淋巴细胞各细胞亚型的表达.采用Ficoll-Paque梯度离心法从小鼠脾脏中分离T淋巴细胞.将细胞分为3组:对照组(不处理)、Asm抑制组(10μM的Asm抑制剂地昔帕明)和Asm抑制+丁酸组(Asm抑制剂+100μM的丁酸),检测各组细胞中Asm活性及T淋巴细胞各细胞亚型的表达.结果 与对照组相比,烫伤后第3、5、6、7和8天小鼠粪便中丁酸浓度均显著降低(P<0.05).丁酸盐可显著增加烫伤后小鼠粪便中乳酸杆菌属、双歧杆菌属、普拉梭菌和罗氏菌属的含量(P<0.05),降低硫酸盐还原菌的含量(P<0.05).丁酸盐可促进烫伤后Asm激活,增加烫伤后脾脏CD4 T细胞、CD4初始T细胞、CD8 T细胞及CD8初始T细胞的数量(P<0.05).Asm抑制组中Asm的活性显著低于对照组,而Asm抑制+丁酸组高于Asm抑制组(P<0.05).Asm抑制组CD4 T细胞、CD4初始T细胞、CD8 T细胞及CD8初始T细胞的数量均低于对照组,而Asm抑制+丁酸组高于Asm抑制组(P<0.05).结论 丁酸盐可通过激活Asm修复烫伤诱导的肠道菌群失衡,缓解烫伤诱导的T细胞丢失.

补充β-羟基-β甲基丁酸盐(HMB)在运动训练中的生理效应

β-羟基-β甲基丁酸盐(β-hydroxy-β-methyl butyrate,HMB或HMβ)既可作为功能饲料添加剂,促进动物生长,减少脂肪,增加瘦肉,又可用于运动营养补剂,在力量、速度、耐力训练中发挥重要作用,还可作为减肥食品的有效成分[1].目前,大量研究主要集中在HMB在运动训练中的生理作用效果方面[2,3],并从中推测HMB作用的机理.本文就HMB的来源和代谢、生理作用机制和效应做一综述,为进一步深入研究提供参考.

γ-羟基丁酸盐纳入药品滥用条例的管理

丁酸盐抗大肠肿瘤作用的探讨

近年来,大肠癌在我国的发病率呈现逐年增高的趋势.随着20世纪80年代肿瘤化学预防的兴起,人们一直在寻求高效、低毒的化学预防药物.大肠是研究化学预防的理想靶器官.饮食因素对大肠癌发生的影响越来越受重视.丁酸(Butyrate)是某些膳食纤维经结肠细菌(主要是厌氧菌)发酵形成的一种短链脂肪酸.近年来,丁酸的抗肿瘤作用逐渐成为肿瘤学研究的热点之一.本文对近年来在大肠肿瘤方面的研究作一综述.

中枢GABA系统与全身麻醉

GABA系统与麻醉的联系虽早已被医学界发现，γ-氨基丁酸盐作为麻醉药之一用于临床也已有很长的历史，但对GABA系统的结构与功能，以及其在麻醉中所起作用的认识，直至近十年内才取得明显进展。据报道：GABA受体不仅能被GABA及其变构体激活，同时也受多种全身麻醉药的间接调节或直接激活；当剂量增大时，这些麻醉药能完全模拟GABA诱导的抑制性效应，表明中枢GABA系统在全身麻醉药的药理活性中起着重要作用。

丁酸对小鼠骨髓源树突状细胞的免疫调节作用

目的：观察肠道细菌代谢产物丁酸对体外培养小鼠骨髓源树突状细胞（Bone marrow derived dendritic cells，BMDCs）表型及功能的影响，并探讨其可能的机制。方法：利用丁酸盐对GM－CSF 和IL－4体外诱导的BMDCs 细胞进行处理，采用流式细胞术检测BMDCs 细胞表面分子CD80、CD86、MHCⅡ、B7－DC 的表达及其对T 细胞增殖的影响；用实时荧光定量PCR（RT－PCR）检测其细胞因子IL－6、IL－12的表达；用格里斯反应（Griess reaction）和免疫印迹法（Western blot）分别检测DC细胞产生NO2－的生成和Toll 样受体－4（TLR4）信号通路中ERK 分子的磷酸化。结果：丁酸可下调LPS 诱导的成熟BMDCs 细胞CD80、CD86、MHCⅡ、B7－DC 分子的表达。同时，丁酸也可抑制IL－6和IL－12的分泌，并抑制树突状细胞对OVA257－264抗原特异性T 细胞的增殖。进一步的Western blot 检测结果显示丁酸可抑制DC 细胞TLR4信号通路中ERK 分子的磷酸化。结论：丁酸可通过抑制DC 细胞TLR4信号通路中ERK 分子的磷酸化，下调DC 细胞的免疫功能。

丁酸盐与NSAIDs对大肠腺瘤和腺癌的作用

丁酸盐和NSAIDs特别是选择性COX-2抑制剂,作为大肠癌化学预防剂已越来越受到人们的关注.本文对大肠癌的发病现况及上述化学制剂可能的作用机制作一综述.

结肠癌分子治疗的靶:DNA甲基化和组蛋白乙酰化

DNA甲基化和组蛋白乙酰化是哺乳类动物重要的两种基因表达的后生调节方式.甲基化主要是指位于胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷(CpG)中的胞嘧啶为甲基基团所修饰.基因组中CpG积聚的区域谓之"CpG岛".生理情况下,多数基因的CpG岛是非甲基化的,而孤立的CpG则多半处于甲基化状态.基因的5′端(启动子区等)含有丰富的CpG岛,其甲基化则基因表达受抑制.甲基化是由甲基化酶(DNA methyltransferase,DNMT)1、3a和3b催化形成的.DNA和组蛋白共同构成染色质.组蛋白主要有H3、H4、H2A和H2B等.其乙酰化状态由组蛋白乙酰化酶(histone acetvlases,HATs)和去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)调控.一些转录因子如p300等具有HAT活性;同时丁酸盐和Trichostatin(TSA)等具HDAC的拮抗作用.两类物质都可使乙酰化水平上调,使染色质处于开放状态,便于DNA中的基因转录与表达.通常,甲基化的基因伴同相应的组蛋白去乙酰化;反之亦然.

丁酸盐激活CaMKK促进紧密连接重组装的研究

目的 探讨丁酸盐激活AMPK从而调节紧密连接的重组装的途径.方法 使用丁酸盐、CaMKK特异抑制剂(STO-609)处理上皮屏障模型Caco-2细胞,在转钙过程中检测电阻(TER)值、细胞内ATP水平以及CaMKK和AMPK的磷酸化状况,从而判断丁酸盐促进紧密连接重组装的上游信号通路.结果 丁酸盐处理Caco-2细胞后,其TER值显著增高(P＜0.05),CaMKK和AMPK均被磷酸化激活,而上述作用可被STO-609部分减弱.结论 丁酸盐可通过钙离子途径磷酸化激活CaMKK,继而活化AMPK促进紧密连接的重组.

丁酸钠对小鼠大肠癌的防治作用及其对甲基化酶的影响

目的 通过观察丁酸钠(NaBu)对二甲肼(DMH)诱发小鼠大肠癌的防治作用及其对抑癌基因p21WAF1和甲基化酶的影响,探讨乙酰化酶抑制剂防治肿瘤的分子机制.方法 80只S-ICR小鼠随机均分4组:空白对照组、DMH造模组、NaBu对照组、DMH+NaBu组.记录小鼠一般情况,分别于造模后18周、20周、22周每组处死小鼠2只,24周时全部处死.大体及镜下观察肠道肿瘤发生情况和组织学变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测p21WAF1mRNA表达,定量PCR检测Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b基因的表达.结果 NaBu对小鼠无毒副作用;DMH+NaBu组小鼠大肠癌发生率(25%)较DMH造模组(95%)明显降低(P＜0.05),肿瘤大小和数目亦显著低于造模组,且大肠癌的病理进展慢.DMH造模组肿瘤组织中较正常对照组甲基化酶水平升高3～4倍,抑癌基因p21WAF1低表达;与造模组比较NaB组p21WAF1表达增加,并伴有甲基化酶Dnmt1和Dnmt 3b mRNA降低(P＜0.05).结论 NaBu对DMH诱发的小鼠大肠癌具有一定防治作用,这与激活抑癌基因p21WAF1表达、降低甲基化酶Dnmt1和Dnmt3b表达有关.

丁酸盐抑制恶性肿瘤的作用研究进展

恶性肿瘤是世界范围内主要的死亡原因之一,已严重危害人类健康.近年来,我国的恶性肿瘤的发病率和死亡率总体呈上升趋势,但是目前对恶性肿瘤的发病机制尚未完全阐明,治疗效果也需进一步优化.因此,寻找新的预防和治疗恶性肿瘤的方案刻不容缓.丁酸盐(butyrate)是肠道微生物酵解膳食纤维产生的一种短链不饱和脂肪酸,对肠道微生物及肠道上皮细胞的能量供应、保持肠道上皮细胞的完整性、抑制肠道炎症和肠道肿瘤等方面具有非常重要的作用.近年来,丁酸盐在恶性肿瘤中的作用不断被人们所揭示,除结直肠癌外,许多研究发现丁酸盐对多种恶性肿瘤都有抑制作用,提示丁酸盐很可能是潜在有效的治疗肿瘤的药物.本文将综述近些年丁酸盐在不同恶性肿瘤的作用研究的新进展.

丁酸钠对小鼠大肠组织抑癌基因表达的影响

目的:观察大肠癌变过程中不同类型腺体组织抑癌基因p21waf1、bax、gadd45的表达及丁酸钠对其表达的影响.方法:利用二甲基肼(DMH)制作昆明小鼠大肠癌模型,通过免疫组化和RT-PCR分别检测大肠癌变过程中,小鼠大肠粘膜不同病理状态下3种抑癌基因的表达与变化.结果:在正常粘膜发展至腺瘤的过程3种基因的表达水平逐渐升高,而癌组织中3种抑癌基因的表达不同程度的降低.丁酸钠灌肠组各基因表达明显高于对照组和DMH组,其中以p21waf1的升幅大.结论:大肠粘膜癌变与抑癌基因p21waf1、bax、gadd45的表达有关,丁酸钠可以通过调控3种抑癌基因的表达发挥抗肿瘤作用.

膳食纤维、肿瘤干细胞和Wnt信号活性的连续谱:结肠直肠癌预防和治疗的可能性

Wnt信号转导参与了人类结肠直肠癌(colorectal cancer, CRC)的发生.尽管Wnt信号转导活性与细胞增殖间的关系已经明了,但也有研究表明,高水平的Wnt活性与细胞凋亡间存在关系.我们分析了10种人类CRC细胞系,结果发现组蛋白去乙酰酶抑制剂(inhibitors of histone deacetylass, HDACis),例如丁酸盐,可通过过度诱导Wnt信号转导而促使CRC细胞凋亡;因此,通过HDACis过度活化Wnt信号转导可作为结肠直肠癌新的预防和治疗措施.我们的研究结果可以解释膳食纤维及其产物丁酸盐对于CRC保护作用的研究结果和丁酸盐的抗肿瘤作用为何相互矛盾.我们认为,体外研究中观察到的Wnt活性水平和CRC细胞凋亡水平的变化表明体内存在CRC细胞亚型,它们对于丁酸盐的反应程度不同.Wnt活性与肠道干细胞的更新和CRC干细胞的转移潜能相关,本文在此基础上讨论HDACis介导的Wnt信号转导调节作为CRC干细胞治疗方法的可能性,认为对Wnt阳性的CRC干细胞进行靶向治疗可作为CRC的基因疗法.

丁酸盐不同给药方式诱导K562细胞向红系分化的比较研究

目的研究丁酸盐对血红蛋白合成的诱导作用和不同给药方式对丁酸盐诱导的K562细胞向红系分化的影响.方法以K562细胞为体外模型,采用联苯胺染色定性技术检测细胞内血红蛋白,比较丁酸盐不同浓度、不同给药方式诱导K562细胞前后的阳性细胞率;测量波长为414nm的D(λ)值和醋酸纤维膜电泳检测药物诱导的血红蛋白含量的变化.结果不同浓度的丁酸盐诱导后联苯胺染色阳性细胞率(BZ%)增加4～6倍,细胞平均血红蛋白较用药前增加9～14倍:丁酸盐选择性地刺激HbF合成;单次脉冲式给药BZ%在72 h达高峰,峰值在19%～28%之间,之后迅速下降,约在7～9d接近用药前水平.孵育时间的长短与BZ%上升以及上升后持续时间的长短无关;丁酸盐持续诱导的BZ%变化与一次脉冲式用药总体趋势相似;间断脉冲式用药BZ%在72 h达到峰值后持续保持在20%～30%之间的水平,直至3个周期的用药结束.结论丁酸盐可诱导珠蛋白基因表达,促进血红蛋白的合成,尤其能够选择性地刺激胎儿血红蛋白的合成增加;间断脉冲式用药能够持续诱导K562细胞向红系分化,可作为丁酸盐治疗β-珠蛋白基因缺陷疾病的理想给药方式.

丁酸钠对人脑胶质瘤细胞系SHG-44增殖分化的影响

目的研究丁酸钠对培养人脑胶质瘤SHG-44细胞的增殖抑制和分化诱导.方法以2 mmol/L丁酸钠处理SHG-44细胞,用MTT比色、核仁组成区银染观察细胞增殖抑制,用流式细胞术、电镜观察超微结构、免疫组织化学染色、凝集试验鉴定细胞分化.结果 SHG-44细胞经丁酸钠处理后:①细胞增殖受到明显抑制,并具有时间、剂量依赖性;②细胞周期受阻,S期细胞比例减少;③电镜观察发现细胞核变规则,异染色质增多,胞浆中线粒体、粗面内质网等细胞器增多并趋于正常;④胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein, GFAP)表达增强,改型蛋白(Vimentin)表达减弱;⑤细胞凝集度明显变低.结论丁酸钠能抑制人脑胶质瘤SHG-44细胞的增殖,2 mmol/L丁酸钠能诱导SHG-44细胞发生明显分化.

丁酸盐在炎症反应中作用机制的研究进展

丁酸是由食物中的膳食纤维在肠道中被微生物发酵分解而成的一种短链脂肪酸.丁酸盐能够增强肠黏膜免疫屏障作用,从而阻止细菌及其代谢产物等进入血液引起炎症反应.丁酸钠是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACi),可以促进调节性T细胞(regulatory T-cell,Treg细胞)的增殖活化,对机体免疫调节有着重要的作用.另外,丁酸盐能够通过调控G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPRs)以及NF-κB、JAK/STAT等炎症相关通路的活性,减少促炎细胞因子的释放,抑制肠道的炎症反应,维持肠道免疫平衡.本文拟对丁酸盐在炎症反应中的作用机制进行概述,为炎症性疾病的预防提供理论依据.

丁酸盐与非甾体抗炎药对大肠腺瘤和腺癌细胞的抗增殖作用

目的观察丁酸盐和两种非甾体药物(NSAIDs)阿斯匹林和高选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对原代培养的大肠腺瘤细胞和HT-29腺癌细胞抗增殖作用的影响,并探讨其可能的作用机制.方法用MTT法检测各药物对两种细胞的抗增殖作用.结果三种药物均可起到抑制细胞增殖的作用;丁酸盐和两种NSAIDs的联用可不同程度的增强其作用.结论单用丁酸盐和两种NSAIDs均有抗增殖的作用,两者联用可使其疗效增强.

丁酸钠对结肠癌细胞凋亡活性的影响

目的:观察丁酸钠对结肠癌细胞凋亡活性的影响.方法:采用流式细胞术(FCM)和DNA末端原位标记染色法(TUNEL)检测细胞凋亡.结果:实验48小时检测,对照组和2.5mM、5mM和10mM各浓度丁酸钠作用后的Lovo细胞凋亡率分别为11.71%、21.62%、34.40%和47.83%,各组之间有显著性差异(P＜0.01);对照组和5mM丁酸钠组的HT-29细胞,培养24、48、72小时,其凋亡率分别为6.22%、12.00%、14.31%和30.68%、34.60%、41.88%.差异有显著性(P＜0.01);本研究中用二倍体的人胚肾293细胞作了对照研究,未发现丁酸钠对293细胞的生长抑制和凋亡有影响.结论:一定浓度的丁酸钠可以选择性抑制两种结肠癌细胞增生,诱导凋亡,显示出浓度、时间依赖性.在预防肿瘤发生的过程中发挥重要的作用.