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  • 一株HIV1变异株的发现

    作者:吴虹;傅继华;王斌;刘传新;方荣;苏生利

    我们在进行序列分析过程中发现一株不同于以往国内外报道的新型HIV1的变异毒株。现报道如下:1 材料和方法1.1 前病毒DNA的提取某HIV1感染者300μLEDTA抗凝血,使用Promega公司的DNA提取试剂盒(Wizard GenomicDNA Purification Kit)提取HIV1前病毒DNA。1.2 HIV env基因c2-v3区的套式PCR扩增 以所提的HW1前病毒DNA为模板,利用一对外侧引物EP1,EP2(序列为,EP1:5'-GGCAGTCTAGCA-GAAGAAGAGG-3':EP2:5'-CCTACTTC-C TGCCACATG-3')和一对内侧引物EP3,EP4(序列为,EP3:5'-GATCTGA-CAATTTCACGAACAAT TGC-3';EP4:5'-C TGGGTCCCCTCCTGAAGGATG-3')进行nested-PCR反应。反应条件为94qC30s,55℃30s,72℃30s,35个循环;72℃C5min结束扩增。1.3 PCR扩增片段的克隆P CR扩增的特异性片段经Promega公司的PCR产物纯化试剂盒(WizardPCRprepsDNA pu-rification system)纯化后,与PGEM-T载体连接克隆于JM109宿主菌中

  • 血清HBV NRAg的临床应用探讨

    作者:张华;罗振元;黄圣文;刘强;叶震璇;刘广宣;费蓉;许泽华;李贵芳;王树辉

    目的 探讨乙型肝炎病毒核酸相关抗原(HBV NRAg)用于临床乙型肝炎诊断的实验价值及与乙型肝炎病毒DNA定量的相关性.方法 收集门诊及住院患者标本432份,ELISA法检测血清HBV NRAg、HBV血清标志物,FQ-PCR检测HBV DNA,同时进行肝功能生化检测.结果 HBV NRAg与HBV DNA的总符合率为90.70%;86例HBV DNA阳性样本中,HBV NRAg阳性率为95.35%,显著高于PreS1(79.06%)和HBeAg(51.16%),差异有统计学意义(P<0.05).结论 HBV NRAg与HBV DNA具有很好的一致性,可作为临床HBV感染的筛选及判断HBV复制的有意义的补充项目.

  • 高复制YIDD变异毒株乙型肝炎一例报告

    作者:于德奎;李玉华;荆慧;姜明东

    患者 男,30岁.因乏力、ALT升高,于2001年5月15日以慢性乙型肝炎收治,当时化验结果为ALT 122U/L、AST 44U/L,HBsAg(+)HBeAg(+)抗-HBc(+)、HBVDNA 1.12×107拷贝/ml,(PCR).经拉米夫定100mg/日、保肝降酶药物治疗4个月后;ALT、AST达正常范围,HBVDNAA在1×105拷贝/ml以下,HBeAg转阴.治疗9个月后,患者自行停用拉米夫定,停药后2个月,感觉乏力、食欲不振,化验ALT 247U/L、AST 107U/L、HBVM为HBBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性、HBVDNA 1.37×109拷贝/ml,再用拉米夫定150mg/日和甘利欣等药物治疗,一个月后HBVDNA降至1×105拷贝/ml以下,而ALT高达589U/L、AST 362U/L,加用肝炎灵治疗后转氨酶逐渐下降,到第8个月时ALT、AST又继续上升;ALT279U/L、AST 114U/L,HBVDNA 2.52×107拷贝/ml.

  • 科学应对甲型H1N1流感(二)

    作者:姜昌富

    3. 甲型H1N1流感可控、可防、可治甲型H1N1流感是一种具有高度传染性的人与动物共患的急性呼吸道传染病,其发病率高,死亡率低(1%~4%).因为甲型H1N1流感为一种新型变异毒株所致,人群普遍缺乏相应免疫力,人群普遍易感.但是甲型H1N1流感可控、可防、可治,不可怕.具体诊断、防控及治疗方案可遵循中华人民共和国卫生部颁布的关于甲型H1N1流感相关文件执行.

  • 轮状病毒感染的免疫防治进展

    作者:莫武桂

    轮状病毒( RV) 是世界各地婴幼儿感染性腹泻的重要病原.根据其基因结构和抗原上差别,RV可以分为 A、 B、 C、 D、 E、 F、 G七组,其中主要是 A组在人类中广泛流行.A组 RV根据结构蛋白抗原性差异分为 G和 P两种血清型,G血清型至少存在 14个血清亚型,P血清型至少存在 18个血清亚型,A组具有 I、 II组,在巴西还发现了非 I和非 II亚组变异毒株 [1]; 其基因组为 11个片段的双股 RNA( dsRNA) 编码 6种结构蛋白( VP1- 4 VP6- 7) 和 5种非结构蛋白( NSP1- 5),基因组共有 18525个碱基对,其中指令性 RNA多达 4500个,是迄今为止在病毒结构中所观察到的大的二十面体指令性 RNA, 人群对 RV普遍易感,有症状感染以 6月龄~ 2岁婴幼儿为多见,年龄愈小,病情愈严重,首次感染后不能阻止下一个流行季节由同型病毒引起再感染,甚至可在同一季节内发生两次 RV临床感染.近年来应用 RV特异性免疫球蛋白和研制 RV疫苗防治 RV感染取得了进展.

  • 血清HBV-NRAg的检测及与HBV DNA的相关性分析

    作者:黄建炜;袁权;葛胜祥;牛建军

    [目的]了解HBV携带者血清HBV-NRAg的检出情况,探讨HBV感染后HBV-NRAg与HBYM、HBVDNA载量的相关性.[方法]连续收集了从业人员的体检标本(n=4 968),ELISA法检测血清HBV-NRAg和HBVM,同时以FQ-PCR检测核酸指标并辅以分区套式PCR和DNA测序作为证实检测,统计分析HBV-NRAg与HBVM、 HBVDNA的相关性.[结果]HBV-NRAg的阳性率7.5%,略低于HBsAg的8.3%,略高于HBV DNA的6.8%.在HBV携带者中HBV-NRAg检测与HBVDNA的符合率87.4%,高于HBsAg或HBeAg,其S/CO值与HBVDNA载量线性相关(R2=0.927).通过HBV-NRAg的检测筛选到6例HBV隐匿性感染,其中3例存在S区"a"基因突变.[结论]对于HBV感染后病毒复制状态和传染性的评价,HBV-NRAg可以替代HBV DNA作为良好的评判指标,而且可以用于变异毒株的筛选.

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