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  • 人类免疫缺陷病毒1型RNA定量参考品的研制

    作者:张春涛;宋爱京;李秀华;李娟;王佑春

    目的研制人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)RNA核酸国家参考品及制定相应标准.方法收集各地HIV感染者阳性血浆和HIV非感染者血浆,应用HIV、HCV抗体和HBsAg检测试剂进行筛选,对HIV抗体筛查阳性者用新加坡Genelabs公司的HIV BLOT 2.2确证试剂进行确证.以世界卫生组织(WHO)推荐的HIVRNA标准品对国家HIV核酸参考品中定量样品进行标定,并对其稳定性进行研究.结果经过筛选,选出8份样品为阴性参考品,8份样品为阳性参考品,3份为定量参考品,6份为灵敏度参考品,5份为线性参考品.几次独立标定,得到定量参考品HIV RNA的国际单位(IU),其中b1~b3的国际单位的对数值在-x±s以内,表明结果可靠.稳定性实验数据表明,该核酸参考品在4℃以下可存放4 d.结论初步建立了HIV核酸参考品,这将对HIV核酸诊断试剂的质量评价提供重要依据.

  • 下咽癌相关血清蛋白质分子标志物的初步研究

    作者:程磊;周梁;陶磊;项翠琴;贾晓东;陆晔;廖萍

    目的筛选下咽癌血清蛋白质分子标志物,并建立决策诊断模型.方法48例下咽癌病人血清,其中36例为建模组,12例为盲法验证组.52例正常对照的血清,其中36例为建模组,16例为盲法验证组.应用弱阳离子交换芯片(WCX2)及固定金属亲和芯片(IMAC3),经表面加强激光解析电离飞行时间质谱测定得到蛋白质谱,分析下咽癌和正常人血清的蛋白质谱差异,建立分类树模型并进行肓法验证.结果在质荷比(M/Z)2~50范围内,WCX2芯片共检测出11个差异蛋白峰.IMAC3 芯片共检测19个差异蛋白峰(P值以10-5为界).自动选用7796、4216、5927、5361(M/Z)建立决策树模型,灵敏性为94.44%(34/36),特异性为88.89%(32/36).盲法验证的灵敏性为91.67%,特异性为81.25%.结论应用该方法可以从病人血清中筛选出下咽癌相关的标志蛋白.建立的决策树模型可能对早期发现早期诊断下咽癌具有重要的临床意义.

  • 神经上皮来源脑肿瘤中肿瘤干细胞的分离培养与鉴定

    作者:方加胜;邓永文;李茗初;陈风华;王延金;卢明;方芳;伍军;杨转移;周向阳;王飞;陈诚

    目的 建立人神经上皮来源脑肿瘤中肿瘤干细胞的体外分离、培养体系,观察其分化现象,鉴定其特异性标志物,为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础.方法 将26例脑肿瘤手术中取出的脑肿瘤细胞,以2×105/ml的密度接种于含生长因子的无血清培养基培养,使其中的脑肿瘤干细胞增殖,并进行单克隆形成实验及溴脱氧尿苷掺入实验;然后将增殖形成的脑肿瘤干细胞球接种于无生长因子的含血清培养基诱导分化;利用免疫荧光和免疫组化法检测脑肿瘤干细胞在细胞培养和组织切片中CD133和巢蛋白的表达.结果 各类肿瘤标本中仅有少数肿瘤细胞能够在无血清培养基中存活并悬浮生长,并增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球,传代后脑肿瘤干细胞保持很强的自我更新和增殖能力;在含血清培养基中脑肿瘤干细胞贴壁分化;体外培养中脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物CD133和巢蛋白,在肿瘤组织切片中存在CD133阳性细胞,其阳性表达率为(21.0±6.2)%~(38.0±7.0)%.结论 人神经上皮来源脑肿瘤组织中存在少量具有自我更新和增殖能力、表达CD133和巢蛋白的脑肿瘤干细胞,并能在体外将其分离、培养和诱导分化;脑肿瘤干细胞有可能成为脑肿瘤基础研究的新平台和临床治疗的重要靶细胞.

  • 不同分类技术联合肿瘤标志在诊断和预测肺癌方面的研究

    作者:聂广金;冯斐斐;吴拥军;吴逸明

    目的 探讨何种统计分类模型适于建立多肿瘤标志肺癌预测诊断模型.方法 采用放射免疫分析法(RIA)、双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)、分光光度法(SP)、高效液相色谱法(HPLC)及原子吸收分光光度法(AAS)分别测定肺癌患者、肺良性疾病患者和健康对照者血清中的癌胚抗原(CEA)、糖链抗原.125(CAl25)、胃泌素(gastrin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、β2-微球蛋白(β2-MG)、可溶性白细胞介素-6受体(sIL-6R)、唾液酸(sialic acid,SA)、一氧化氮(NO)、Cu、Zn、Ca及尿样中的伪尿核苷/肌苷(pseud/trop)含量,并分别建立logistic回归分析、决策树分析以及人工神经网络的数据挖掘分类预测模型.结果 logistic回归分析、决策树分析和人工神经网络模型联合12项肿瘤标志诊断肺癌的总敏感性分别为94.00%、100.00%、100.00%;特异度分别为100.00%、98.89%、100.00%;总准确性分别为94.29%、95.00%、90.00%.结论 12项肿瘤标志的3种分类模型对肺癌分类预测和诊断结果 均比较理想,尤其是C5.0决策树模型和人工神经网络模型更适于解决职业性肺癌的预测和辅助诊断.

  • 29329例调查人群乙型肝炎病毒检测结果分析

    作者:李庆平;明辉;孙晓红;张旭

    乙型病毒性肝炎是我区重点防治的传染病之一,1999年我们对29 329例不同人群进行了乙型肝炎病毒感染标志监测.现将结果报告如下.

  • 炎症性肠病的诊断标志

    作者:

    目前炎症性肠病(IBD)的诊断是基于临床、内镜、组织学和放射学检查的结果.终诊断为功能性肠道疾病的患者常因怀疑IBD而作广泛检查.寻找非侵入性IBD筛选方法的研究仍在进行中,其目的是要找到一种特异、敏感的标志或标志组合,以替代现有昂贵的侵入性诊断方法.对临床医师而言,另一个问题是预测复发和观察疾病活动程度时遇到的困难.本文就应用非侵入性诊断标志监测IBD活动性、鉴别克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)及区分IBD和肠功能紊乱方面的研究进展作一介绍.(牛凤丽摘译自Dubinsky MC, Seidman EG. Diagnostic markers of inflammatory bowel disease. Current Opinion in Gastroenterology, 2000, 16: 337~342.刘文忠校)

  • 外周血glypican-3 mRNA的检测及其临床意义

    作者:岳惠芬;曹骥;班克臣;苏建家;李瑗;欧超;段小娴

    目的:寻找肝细胞癌微小转移的标志物.方法:用巢式逆转录聚合酶链反应(nested-RT-PCR)技术检测60例肝细胞癌、20例非肝癌的恶性肿瘤、20例慢性乙型肝炎、20例肝硬化患者和20例健康志愿者外周静脉血中的glypican-3 mRNA.结果:Glypican-3 mRNA在健康志愿者、非肝癌恶性肿瘤、慢性乙型肝炎、肝硬化组患者的外周血中均为阴性;在肝细胞癌组外周血中glypican-3的检出率为80%(48/60).Glypican-3检出率与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移明显相关(P<0.05).在12例血清AFP<25μg/L的肝癌患者血中,8例(66.7%)可检出glypican-3.结论:Glypican-3可作为血循环中有肝癌细胞的标志物,在肝癌患者中阳性预示有血源性转移的可能;并且glypican-3对血清AFP阴性或低值的肝癌患者能起到辅助诊断作用.

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