首页 > 文献资料
-
幽门螺杆菌感染、P16基因甲基化与胃癌
P16基因是细胞周期负调控基因,其甲基化与胃癌的发生有关.幽门螺杆菌感染是胃癌主要危险因素之一.幽门螺杆菌感染与P16基因的甲基化有关,使P16表达缺失,从而促使胃癌发生发展.
-
乳腺癌发展过程中的bcl-2甲基化及其与蛋白表达的关系
目的 建立bcl-2基因甲基化特异的PCR(MSP)检测方法,检测乳腺癌发展过程中的bcl-2甲基化,并探讨Bcl-2甲基化与蛋白表达的关系.方法 设计bcl-2基因MSP引物,采用MSP方法检测30例正常、25例不典型增生(癌前病变)、40例腋窝淋巴结阴性(癌症初期)和45例腋窝淋巴结阳性(癌症后期)乳腺组织的bcl-2基因5'端启动子CpG岛甲基化状态.另外采用免疫组织化学S-P法检测bcl-2的蛋白表达.结果 正常、不典型增生、淋巴结阴性和淋巴结阳性乳腺组织的bcl-2甲基化率分别为10.0%、32.0%、40.0%和53.3%.乳腺癌发展过程中的bcl-2甲基化率渐增(P＜0.01),bcl-2蛋白表达率渐减(P＜0.01).不典型增生较正常乳腺组织的bcl-2甲基化水平显著提高(P＜0.05).在乳腺癌发展过程中的4个阶段,bcl-2甲基化与蛋白表达两者之间均呈显著负相关性(P＜0.01).结论 该研究建立了bcl-2基因MSP检测方法,bcl-2基因MSP引物的设计是合理的.bcl-2启动子甲基化可能成为乳腺癌前病变的分子指标之一.在乳腺癌发展过程中,bcl-2 5'端调控区CpG岛甲基化可能是下调bcl-2表达的因素.
-
小鼠大脑亚硝酸盐暴露与DNA甲基化和组蛋白去乙酰化
目的 观察慢性亚硝酸盐暴露对小鼠大脑皮质炎症损伤的影响及其探讨DNA甲基化和组蛋白去乙酰化等相关机制.方法 选取8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠,随机分为对照组(生理盐水)、低剂量亚硝酸盐组(3g/L)和高剂量亚硝酸盐组(6g/L),建立亚硝酸盐暴露模型,收集各组小鼠大脑皮质,利用免疫荧光染色法和Western blotting法分析大脑皮质炎症损伤,组蛋白去乙酰化酶和DNA甲基化相关酶的表达情况.结果 慢性亚硝酸盐暴露后小鼠大脑皮质炎症损伤因子环氧化酶2(COx2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、离子钙接头蛋白分子1(Iba1)、c-Fos、IL-6表达量明显多于对照组(P＜0.01),同时高剂量暴露组DNA甲基化相关酶5-甲基胞嘧啶(5-mC)、DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3a、和组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)表达明显低于对照组(P＜0.01)且都呈亚硝酸盐剂量依赖性.结论 亚硝酸盐暴露可通过促进细胞免疫炎症对小鼠大脑皮质造成损伤,并且DNA甲基化和组蛋白去乙酰化可能参与了慢性亚硝酸盐暴露过程中的应答过程及其调控机制.
-
缺血、缺氧对小鼠海马DNA甲基化的影响
目的 建立缺血、缺氧脑片模型,探讨缺血、缺氧对小鼠海马的损伤及其机制.方法 利用C57BL/6J小鼠建立海马脑片缺血、缺氧性脑损伤(HIBD)模型,采用免疫组织化学染色法和Western blotting法分析正常对照组海马脑片与HIBD实验组海马脑片炎症损伤、DNA甲基化相关酶的表达情况.结果 HIBD实验组海马脑片氧化应激、炎症损伤细胞明显多于对照组(P＜0.01),诱发海马应激损伤;同时HIBD实验组海马脑片DNA甲基化水平高于对照组(P＜0.01).结论 脑片缺血、缺氧可促发炎症反应对海马组织造成损伤,DNA甲基化水平升高,提示DNA甲基化可能参与缺血、缺氧组织损伤过程;机制可能是HIBD影响DNA代谢活动,诱导DNA甲基化水平升高,DNA甲基化调控相关基因表达产生氧化应激,促发炎症反应,对海马造成损伤.
-
Reelin在阿尔茨海默病小鼠发病中的作用
目的 探讨阿尔茨海默病(AD)小鼠病理改变、Reelin和Notchl的表达变化及DNA甲基化状态的改变,为深入了解阿尔茨海默病的发病机制提供理论依据.方法 以淀粉样蛋白前体(APP)/早老素-1(PS1)双转基因小鼠为AD模型、同窝野生型小鼠为对照组,两组小鼠共计184只,利用高尔基染色、透射电子显微镜、免疫荧光染色、免疫印迹等技术检测AD模型鼠病理改变、Reelin和Notchl的表达变化及DNA甲基化状态的改变.结果 AD小鼠在约6个月时开始出现淀粉样斑沉积、神经元纤维出现缠结等病理改变;AD小鼠发病后,星形胶质细胞和小胶质细胞在淀粉样斑周围聚集增多,随病情加重逐渐增加;Reelin在淀粉样斑周围聚积形成斑块,随病情加重逐渐增多;全长Notchl受体和其活性Notch细胞内片段(NICD)在AD鼠脑部表达减少;AD小鼠脑部甲基化状态减弱,淀粉样斑中有DNA片段,但甲基化状态消失,DNA甲基转移酶1(Dnmt1)和Dnmt3a在AD小鼠中表达减少.结论 AD小鼠脑内淀粉样斑沉积,促使胶质细胞聚集、Reelin聚积形成斑块、Notchl受体表达下降及甲基化状态减弱,进一步加剧AD神经功能紊乱.
-
亚硝酸盐暴露致雄性小鼠生殖毒性的探讨
目的 探讨亚硝酸盐暴露对雄性小鼠生殖毒性的分子机制.方法 36只2月龄健康雄性小鼠,随机分为对照组(生理盐水)、低剂量组(60 mg/kg)和高剂量组(120 mg/kg),每组12只进行亚硝酸盐灌胃3个月,观察小鼠的生长状况,HE染色法观察睾丸组织病理变化,免疫荧光和Western blotting方法分析检测睾丸组织细胞增殖与凋亡情况及DNA甲基化、组蛋白去乙酰化相关酶的表达情况.结果 亚硝酸盐暴露组小鼠较对照组小鼠体重增加缓慢,睾丸指数降低(P＜0.01),形态发生病理性改变;亚硝酸盐暴露组小鼠睾丸组织细胞增殖较对照组明显减少,细胞凋亡较对照组明显增加(P＜0.01);同时DNA甲基化和组蛋白去乙酰化水平高于对照组(P＜0.01),且均具有剂量依赖性.结论 亚硝酸盐暴露通过抑制雄性小鼠生长发育及睾丸生精细胞增殖,诱导睾丸生精细胞凋亡,造成雄性生殖毒性;DNA甲基化及组蛋白去乙酰化水平升高,提示表观遗传学可能参与了亚硝酸盐暴露对雄性生殖系统的损伤过程及调控机制.
-
心血管系统表观遗传学机制的新认识
表观遗传学研究的是除遗传密码序列改变以外的,在基因表达过程中产生的可遗传的改变.在复杂疾病中,基因与环境的相互作用为表观遗传学机制包括组蛋白乙酰化和DNA甲基化所调控.本文总结并讨论了DNA甲基化和组蛋白修饰在高血压病、冠状动脉粥样硬化性心脏病、心肌肥大和心力衰竭的角色和作用机制.
-
DNA甲基化作用对细胞癌变的影响
5-甲基胞嘧啶的形成引起自发脱氨是真核生物中一种普遍存在的内源突变过程.DNA甲基化酶具有突变诱导物作用并在癌变中表达增加.癌细胞基因组呈现DNA甲基化不足而影响基因组的稳定性;组织特异性基因的启动子区域出现从头甲基化;癌基因多为不充分甲基化导致重新开放或异常表达;抑癌基因多为过度甲基化从而形成突变靶点.DNA甲基化效应物可改变癌变相关基因的表达.
-
组蛋白乙酰化/脱乙酰化与DNA甲基化的关系
组蛋白乙酰化和脱乙酰化与DNA甲基化有密切的关系.本文介绍了DNA甲基化对组蛋白乙酰化/脱乙酰化影响,组蛋白乙酰化/脱乙酰化对DNA甲基化的影响,以及组蛋白乙酰化/脱乙酰化和DNA甲基化协同效应.
-
细胞色素P450药物代谢酶系表观遗传调控机制研究进展
细胞色素P450药物代谢酶基因多态性已被公认是导致临床上个体间药物反应差异的重要原因,然而这一理论无法完全解释个体间某些P450酶亚型的基因型和表型不一致的现象.表观遗传学调控因素为解决上述问题提供了新的思路和方法.本文综述了DNA甲基化,组蛋白修饰,miRNA的调节等表观遗传机制对P450药物代谢酶基因表达影响的研究进展.关于这方面的研究将为揭示个体间P450酶差异性表达的实质提供新的视角,并有望为指导临床个体化用药提供更充分的依据.
-
DNA 甲基化在中枢神经系统发育中的研究进展
DNA甲基化是早被发现的表观遗传修饰之一。近年来，大量的研究显示DNA甲基化在中枢神经系统（CNS）发育中发挥了重要作用。不同种类的DNA 甲基转移酶（Dnmt）和DNA 甲基结合蛋白（ MBD）在CNS发育的不同阶段发挥不同的作用。 DNA甲基化促进神经干细胞向神经元方向分化，抑制其向胶质细胞分化。 Dnmt和MBD主要在神经元中表达，而在胶质细胞不表达或表达较少。 DNA甲基化调节神经发生和突触的形成，参与学习记忆。星型胶质细胞的标志物GFAP去甲基化促进早期神经上皮分化为星型胶质细胞。少突胶质细胞相关基因MAG和Sox10等也受甲基化的调节。本文主要从以上方面综述了DNA甲基化在中枢神经系统发育中的作用。
-
抑癌基因甲基化在肝癌发生机制中的作用
肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一,由多因素、多阶段共同作用引起.其中DNA甲基化异常是表观遗传学上研究为深入的一种致癌机制.在肝癌的发生发展过程中,抑癌基因的甲基化异常,特别是高甲基化起着重要作用.本文通过全面深入阐述抑癌基因DNA甲基化异常在肝癌发生发展的作用机制,为进一步了解肝癌的特性,优化早期诊断,改善预后提供了新的视野.
-
表观遗传学与阿尔茨海默病
阿尔茨海默病(Alzheimer§disease,AD)是一种常见的神经退行性疾病.AD患者脑内以老年斑及神经纤维缠结形成为主要病理特征.近年来研究发现,表观遗传修饰在AD病理过程中起重要作用.本文重点综述了DNA甲基化、组蛋白修饰以及miRNA干扰对AD病理发生发展的影响,并讨论了调节这些变化的潜在治疗作用.这为AD的治疗提供新的思路和策略.
-
运动和饮食对老年人认知功能的影响及其表观遗传学机制探讨
我国正步入老龄化社会，研究如何有效延缓衰老，维护老年人的认知功能已成为当今老年医学亟待解决的问题之一。近年来，生活方式影响老年人认知功能的作用倍受关注。因此，本文综述运动和饮食干预对老年人认知发展的影响，并重点探讨其表观遗传学机理研究进展，有助于今后合理、有效地对认知功能衰退进行干预与研究。未来相关的研究应进一步严格研究设计，拓宽多因素的综合，形成更有解释力的、统一的、完整的理论体系。
-
DNA甲基化与炎症反应相互作用的研究进展
DNA甲基化转移酶催化基因CpG岛并选择性添加甲基,引起DNA甲基化,使某些区域DNA构象变化,阻止转录因子与启动子结合,并进而抑制基因转录.DNA甲基化与炎症反应密切相关.本文总结DNA甲基化对炎性因子和炎性信号通路的调控机理,以及炎性因子对DNA甲基化转移酶的活化机制.概述炎症反应中DNA甲基化尚待解决的问题,展望DNA甲基化在揭示人类疾病机制,新型药物开发等方面的发展前景.
-
谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚单位基因甲基化而非多态性与慢性阻塞性肺疾病相关
目的 探讨谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚单位(GCLC)基因多态性和甲基化与慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感的相关性.方法 收集166例COPD患者为COPD组,同期与上述COPD患者相似的非COPD人群166例为对照组.使用基因测序法检测两组人群GCLC基因启动子区域的单核苷酸多态性(SNP),分析各SNP位点的单倍体型与COPD发病的关系.使用甲基化DNA免疫共沉淀芯片(MeDIP-chip)检测两组人群GCLC启动子区域甲基化水平,进行两组人群GCLC mRNA表达水平和血谷胱甘肽(GSH)浓度的比较.结果 通过直接测序法在GCLC启动子区域鉴定出12个SNP,其中4个SNP,即-2137MT、-129C/T、+27591C/G和+37764MG在COPD组和对照组人群中的发生率超过10％.-129C/T与-2137MT、+27591C/G、+37764MG均处于连锁不平衡.COPD组和对照组人群上述4个SNP的等位基因频率和基因型频率差异均无统计学意义(均P＞0.05).MeDIP-chip检测显示COPD组GCLC启动子区域甲基化水平明显高于对照组(P＜0.001).COPD组肺组织标本GCLC mRNA表达水平明显低于对照组(3.71±0.48比5.16±0.39,P＜0.05),血谷胱甘肽(GSH)水平也低于对照组[109.72±32.38)mg/L比(179.87±46.23) mg/L,P＜0.05].结论 中国人群GCLC启动子区域甲基化而非GCLC基因多态性与COPD相关.
关键词： 肺疾病 慢性阻塞性 疾病遗传易感性 DNA甲基化 谷氨酰半胱氨酸连接酶 -
甲基化特异性PCR联合显微检测技术研究DNA甲基化及微核形成对肝细胞癌发生风险的影响
目的 探讨肝细胞癌(HCC)患者CDH1 、GSTP1和RASSF1A基因启动子区域异常甲基化以及淋巴细胞微核对肝细胞癌发生风险的影响.方法 应用甲基化特异性PCR(MSP)技术对32例HCC患者肿瘤组织和癌旁组织的CDH1、GSTP1和RASSF1A基因启动子区域进行甲基化检测.未经治疗前抽取HCC患者外周血进行体内淋巴细胞微核试验,比较HCC自发微核率和健康人群对照组(n=50)的差异.结果 32例HCC组织中,CDH1、GSTP1和RASSF1A基因甲基化检出率分别是43.8％(14/32)、68.8％ (22/32)和43.8％ (14/32),均高于相应的癌旁组织[25％(8/32)、46.9％(15/32)、15.6％(5/32)].只有RASSF1A基因在HCC组织和癌旁组织中的甲基化检出率差异有统计学意义(43.8％比15.6％,P＜0.05).81.3％(26/32)的HCC和65.6％(21/32)的癌旁组织中有1个或1个以上基因发生了甲基化.3个基因的甲基化程度与患者年龄、性别、肿瘤型、分化程度等临床病理参数均无统计学关联.HCC组微核率与对照组差异有统计学意义(1.38‰比0.47‰,P＜0.05);同时HCC患者自发微核率随着病理分化变差而呈现逐渐增高的趋势,高中、中、中低分化HCC患者微核率分别为1.30‰、1.33‰和1.64％‰.结论 CDH1、GSTP1和RASSF1A基因启动子区域异常甲基化和染色体不稳定存在于HCC的发生发展中.基因启动子区域异常甲基化可能与HCC发生早期密切相关.甲基化检测对于HCC高危人群筛选以及HCC早期辅助诊断具备一定的应用价值.
-
A20基因甲基化对弥漫性大B细胞性淋巴瘤的影响
目的 检测弥漫性大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)中A20基因甲基化状况,探讨其对DLBCL临床过程及预后的影响.方法 通过组织学观察及免疫表型检测筛选104例DLBCL,收集其临床病理资料及随访;并以甲基化特异性PCR(MSP)法检测A20基因启动子区5CpG岛甲基化的情况;以免疫组化SP法检测肿瘤细胞P糖蛋白(PgP)和Ki-67蛋白的表达.结果 104例DLBCL中,A20基因甲基化率为26％ (27/104),活化后B细胞样(ABC)-DLBCL组甲基化率(35.4％)高于生发中心B细胞样(GCB)DLBCL组(10.2％) (P ＜0.05);PgP阳性率65.4％ (68/104),A20基因甲基化组PgP阳性率(85.2％)明显高于无甲基化组(58.4％)(P＜0.05);A20基因甲基化与非甲基化组之间Ki-67高表达病例与低表达病例均无明显差异(P＞0.05);A20基因甲基化病例的复发率明显高于无甲基化病例(P＜0.05);生存分析发现,两组病例的生存状况差异不显著.结论 DLBCL部分病例存在A20基因甲基化,以ABC-DBLCL病例多见.A20基因甲基化与DLBCL的复发有关,且可能通过NF-κB异常活化而促进肿瘤细胞PgP蛋白表达,从而影响DLBCL的化疗效果.
-
结直肠锯齿状病变中p16基因甲基化状态和蛋白表达的研究
目的 检测锯齿状病变组织中p16基因启动子区异常甲基化改变和p16蛋白的表达情况,探讨其在锯齿状癌变通路中的作用和临床病理意义,同时探讨p16基因在不同年龄层段甲基化程度.方法 采用Taqman探针实时定量PCR (Methylight)方法检测225例锯齿状病变(包括96例HP、61例SSA/P和68例TSA)、54例TA、69例CRC和42例正常结直肠黏膜组织中的p16基因甲基化状态,并通过测序法验证扩增的目的片段;同时应用免疫组化方法检测其中随机抽取的116例锯齿状病变(包括52例HP、41例SSA/P、23例TSA)、20例TA、24例CRC和24例正常结直肠黏膜组织中p16蛋白的表达.结果 p16基因启动子甲基化状态和p16蛋白异常阳性程度在锯齿状病变和对照组中均有显著差异(P＜0.05),两者比较呈负相关(P ＜0.05);p16基因启动子甲基化频率与不同年龄层段的相关性比较有显著差异(P＜0.05),两者呈正相关.结论 结直肠锯齿状病变组织中p16基因甲基化可能是诱导其蛋白表达下调的主要原因,且在结直肠“增生性息肉-锯齿状腺瘤-癌”的锯齿状癌变通路中起重要作用;同时p16基因甲基化又可能与年龄相关,随年龄增长甲基化程度越高.
-
结直肠癌微卫星不稳定性检测的临床病理意义及方法
结直肠癌微卫星不稳定性(MSI)检测具有多重临床病理意义.MSI是指DNA甲基化或基因突变致错配修复基因缺失,从而导致微卫星重复序列长度的改变.散发性MSI结直肠癌多位于近端结肠,易伴发肠内及肠外其他器官多发性肿瘤,预后较好但对化疗药物5-氟尿嘧啶疗效欠佳.同时,MSI检测可用于诊断Lynch综合征.此外,免疫组化法也可作为检测肿瘤细胞中错配修复蛋白缺失的一种辅助方法.MSI检测是结直肠癌分子分型的基础,可以从分子遗传学角度加深对结直肠癌及癌前病变的认识了解.本文对结直肠癌MSI检测的临床病理意义、检测指征及检测方法进行简要介绍,以促进这一检查技术在临床及病理学实践中的应用.
