从神经科学角度分析脱髓性疾病-免疫细胞，神经胶质细胞，神经细胞三者之间的相互作用

小胶质细胞（Microglia ）对炎症性脱髓鞘性病变-多发性硬化症（MS）的发展起到至关重要的作用。作为抗原呈递细胞，小胶质细胞会对炎性淋巴细胞发挥作用，并产生炎性细胞因子，谷氨酸和活性氧。现在大家普遍认为神经退行性疾病是一种脱髓鞘病变，它会影响到多发性硬化症的预后表现。在神经退行性疾病-多发性硬化症的早期阶段，神经树突和轴突的串珠状肿胀的出现是神经病理学的标志。由小胶质细胞产生的谷氨酸和活性氧能启动串珠形成。近我们的研究表明，当多发性硬化症发症时，小神经胶质细胞能减少细胞死亡及诱导神经营养因子分泌，而且产生抗炎症细胞因子和抗氧化剂酶来发挥神经保护作用。神经细胞被认为是小胶质细胞的被动目标，同时它也能够通过各种通路来控制小胶质细胞的活性，包括：细胞因子和趋化因子。受损的神经细胞一方面能分泌可溶性不规则趋化因子（sFKN；CX3CR1）并促进小胶质细胞吞噬神经细胞的碎片，同时也诱导小胶质细胞产生抗氧化血红素加氧酶-1（HO-1）。另外，我们还发现神经细胞分泌的 IL-34可以诱导小胶质细胞的神经保护作用，同时也发现星形细胞也具有神经保护作用。由星形细胞产生的IL-33能诱导小胶质细胞的活化，但是，星形细胞的受体-Toll样受体却会诱导神经毒性分子分泌。因此，进一步探讨神经胶质细胞和神经细胞之间的良性互动的平衡关系，将来对于探讨神经退行性疾病的治疗策略来说是至关重要的。

岩藻糖环境对胶质细胞Aβ42蛋白内化过程的影响

目的 探讨岩藻糖环境对胶质细胞内化不同形态 Aβ42蛋白过程的影响.方法 分别测定岩藻糖富集及缺失两种环境中小鼠小胶质细胞及大鼠星型胶质细胞对单体及寡聚体 Aβ42蛋白的摄取量,检测被岩藻糖活化后小胶质细胞的 MAPK 激酶磷酸化程度变化,探明清道夫家族 SRA 受体及 SRB 受体在两种胶质细胞中的表达差异.结果 小鼠小胶质细胞在岩藻糖预处理及岩藻糖环境持续作用下对 Aβ42单体摄取量均显著增加,岩藻糖预处理导致大鼠星型胶质细胞单体 Aβ42摄入量降低.岩藻糖预处理导致小鼠小胶质细胞和大鼠星型胶质细胞对寡聚体 Aβ42摄取量下降,岩藻糖持续作用后,该趋势出现反转.基因检测表明两种胶质细胞中 SRB 受体高表达,SRA 受体在星型胶质细胞无表达.岩藻糖持续作用引起小鼠小胶质细胞p38-MAPK 信号通路的激活,该信号可能引发小胶质细胞细胞吞饮过程.结论 岩藻糖与胶质细胞清道夫受体的作用模式对细胞的Aβ42的内化过程产生影响,SRA 受体可能参与小胶质细胞吞噬过程中 p38-MAPK 激酶的激活过程而增强小胶质细胞对病理蛋白的摄取.为寻找阿尔茨海默病中胶质细胞相关的潜在免疫治疗靶标提供了理论依据.

脂多糖对胰腺星状细胞Smad和ERK1/2信号通路相关蛋白表达的影响

目的 探讨脂多糖(LPS)干预对胰腺星状细胞(PSC)Smad和ERK1/2信号通路相关蛋白表达的影响.方法 体外培养大鼠PSC细胞株LTC-14,用不同浓度LPS和不同时间干预LTC-14细胞,采用蛋白质印迹法检测细胞Smad、ERK1/2通路相关蛋白以及α-平滑肌肌动(α-SMA)蛋白的表达.结果 0、1、5、10、20、50 mg/L LPS干预LTC-14细胞后,Smad3的蛋白表达量分别为0.15±0.02、0.37±0.02、0.44±0.01、0.46±0.02、0.37±0.01、0.24±0.03,Smad7蛋白表达量分别为0.79±0.05、0.84±0.02、0.55±0.03、0.45±0.03、0.34±0.02、0.92±0.07,p-ERK1/2蛋白表达量分别为0.48±0.05、0.74±0.03、0.72±0.04、0.89±0.02、0.81±0.02、0.72±0.03,p-cPLA2蛋白表达量分别为0.15±0.03、0.30±0.01、0.31±0.01、0.30±0.02、0.28±0.03、0.32±0.02,α-SMA蛋白表达量分别为0.56±0.06、0.62±0.06、0.54±0.04、1.03±0.11、1.39±0.08、1.28±0.10,均在LPS干预后发生显著变化(P值均<0.01);ERK1/2蛋白表达量分别为0.56±0.03、0.57±0.02、0.53±0.02、0.58±0.02、0.59±0.05、0.55±0.04,未随着LPS浓度的升高而发生显著变化.10 mg/L LPS干预0、1、3、6、9 h后,LTC-14细胞Smad3蛋白表达量分别为0.69±0.05、0.68±0.07、1.02±0.14、1.82±0.06、2.04±0.11,Smad7蛋白表达量分别为2.77±0.10、1.37±0.08、1.45±0.14、0.78±0.09、0.63±0.06,p-ERK1/2蛋白表达量分别为0.16±0.03、0.32±0.05、0.79±0.03、1.50±0.07、1.77±0.04, p-cPLA2蛋白表达量分别为0.15±0.04、0.32±0.06、0.63±0.04、0.95±0.04、1.49±0.10,α-SMA的蛋白表达量分别为0.84±0.03、1.26±0.21、1.81±0.19、4.28±0.26、4.37±0.15,均随着LPS干预时间的延长而发生显著变化(P值均<0.05或<0.01);ERK1/2蛋白表达量分别为0.75±0.03、0.72±0.02、0.80±0.04、0.74±0.03、0.85±0.09,不随LPS干预时间的延长而发生显著变化.结论 LPS呈时间-剂量依赖性上调α-SMA表达,并激活胞内Smad和ERK1/2炎症通路,这可能是CP发生的分子机制之一.

谷氨酸对星状胶质细胞分泌神经生长因子的影响

星状胶质细胞合成分泌神经生长因子(NGF)受到多种因素(发育过程、神经系统损伤、病毒刺激等)的影响.其中脑损伤后谷氨酸的作用还不明确[1].通过体外培养星状胶质细胞,用不同浓度的谷氨酸直接作用于细胞,观察细胞合成分泌NGF的改变,明确了谷氨酸对星状胶质细胞表达NGF的确切作用.

诱导活化肝星状细胞凋亡主要信号通路的研究进展

肝纤维化是各种病因引起的肝脏慢性进行性的病理过程,肝纤维化时细胞外基质(ECM)合成大于降解导致ECM在肝内大量沉积.肝星状细胞(HSC)的激活、转化并产生分泌大量ECM是肝纤维化形成的关键环节.而通过诱导活化的HSC发生凋亡是逆转肝纤维化的重要手段之一.就主要的凋亡信号通路:死亡受体通路、线粒体通路、内质网通路、神经生长因子通路进行一一阐述.指出了对活化HSC的凋亡途径进行选择性的药物干预有望发挥抗肝纤维化的作用.

整合素连接激酶在重组结缔组织生长因子诱导大鼠肝星状细胞表型转化中的作用

目的 研究整合素连接激酶(ILK)在重组结缔组织生长因子(rCTGF)诱导大鼠原代肝星状细胞(HSC)表型转化中的作用.方法 应用胶原酶原位灌注+密度梯度离心法分离SD大鼠原代HSC,细胞贴壁培养24h后以rCTGF处理,24h后转染ILK小干扰RNA(siRNA)或对照siRNA,设rCTGF对照及空白对照.应用RT-PCR及Western Blot检测转染siRNA 24、48及72 h时HSC α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、ILK及Ⅰ型胶原基因表达水平变化.计量资料采用t检验.结果 与空白对照相比,rCTGF处理可显著上调大鼠HSC αSMA、ILK蛋白及Ⅰ型胶原mRNA表达.转染ILK siRNA可特异性抑制以TGF诱导的ILK表达上调,与rCT-GF对照相比,转染ILK siRNA 24、48及72 h时,HSC ILK蛋白表达分别下调72％ ±6％ (t=21.39,P＜0.01)、87％±9％(t=68.25,P＜0.01)及47％±3％(t=18.25,P=0.003);αSMA蛋白及Ⅰ型胶原mRNA表达分别下调5％±1％(t=2.52,P＞0.05)及6％±3％(t=1.63,P＞0.05)、31％±7％(t=34.77,P＜0.01)及20±5％ (t=6.71,P＜0.05)和67％ ±8％(t=58.82,P＜0.01)及43％±6％(t=15.21,P＜0.01);转染对照siRNA时,HSC ILK、αSMA及Ⅰ型胶原mRNA表达在相同时点无显著变化.结论 ILK可能部分介导了以TGF诱导的大鼠HSC表型转化.

Ito细胞:定居在肝脏的抗原提呈细胞

以往研究表明,肝脏内多种细胞(包括Kupffer细胞、肝窦内皮细胞、肝细胞等)都具有抗原提呈功能,但都以诱导T细胞耐受为主.在2007年1月Immunity杂志上发表的一篇论著中,作者证明Ito细胞(也称肝脏星型细胞)具有专职抗原提呈细胞的一切特征,该细胞能在体内行使抗原提呈功能并能活化T细胞反应.

BMPR-Ⅱ信号转导功能异常与肺动脉平滑肌细胞增殖/凋亡的关系

近年来,转化生长因子-β(transforming growth fac-tor-β,TGF-β)超家族已经成为医学领域研究热点.尤其是骨形态构建蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)做为TGF-β超家族的一员,不仅在骨及软骨的生成、分化、发育中具有重要作用,在其它重要组织器官(如心、肺、脑等)也有表达,对多种细胞(间充质细胞、成纤维母细胞、角质化细胞、星型细胞、肾脏皮质细胞、内皮细胞以及肿瘤细等)的增殖、分化、迁移、凋亡具有调控作用[1～2].骨形态构建蛋白Ⅱ型受体(bone morphogenetic proteins typeⅡreceptor,BMPR-Ⅱ)做为BMPs信号转导通路上重要成分,完成细胞内、外信息的传递.然而,在某些疾病(如原发性肺动脉高压)中及环境因素刺激下,正常的BMPR-Ⅱ表达下降或功能缺陷,导致信号转导异常,引起肺血管细胞生长状态改变并诱发肺血管重构.本文对BMPR-Ⅱ异常与肺血管细胞增殖/凋亡的关系作一综述.

慢性病毒性肝炎肝组织中星型细胞的激活与凋亡

目的探讨慢性病毒性肝炎肝组织中星型细胞的激活与凋亡对肝纤维化的影响.方法采用HE、组化(网状、胶原及弹力纤维)及免疫组化染色(SMA、FN、LN及Ⅳ-C),用光镜观察肝组织病理分期诊断S1～S4各40例患者的肝活检组织中星型细胞的演变与3种纤维和SMA、FN、LN及Ⅳ-C的分布.设正常者肝5例作对照.结果免疫组化SMA分布演变尤具特征性,在S1、S2多见散在星形细胞激活、转形,沿窦壁扩展或形成细束;S3星形细胞增殖转形更趋活跃,形成桥形;它们主要分布于变性、炎症、坏死区及纤维束(隔)内.至S4则主要以肌成纤维细胞形式构成宽大纤维隔.但在S1～S4,一些无明显炎症反应的区域也可见少数星型细胞活化、转形为SMA阳性的肌成纤维细胞.在少数肝细胞胞浆内也可见到SMA阳性的棕黄色颗粒.这些肝细胞有的分布在纤维束附近,有的分布在无明显炎症的区域.其余3种成分在肝组织中沉积与SMA一致,逐期增多、增粗、增浓、填塞肝窦和(或)窦周隙.组化染色3种纤维在肝组织中也逐期增多,在肝窦中多见网状及胶原纤维沉积,至S4则弹力纤维增多.结论①慢性病毒性肝炎肝组织中星型细胞被激活、转形为肌成纤维细胞,分泌多种细胞外基质成分,是导致肝纤维化甚至肝硬化的重要环节.②肝组织中既可见到星形细胞的激活也可见到星形细胞的凋亡迹象.星形细胞的凋亡是肝组织纤维化逆转的重要因素.

肝性脑病的临床相关检查及意义

肝性脑病(Hepatic Encephalopathy,HE)是肝脏功能严重失调引起的神经精神系统紊乱,可严重影响患者的生活质量.HE包括:慢性HE、轻微HE及发作性HE,主要由于一些诱发因素引起,其增加了大脑与氨、神经毒素、炎性细胞因子等物质的接触,诱导或加重了脑水肿,主要累及脑星型细胞.

细胞内酰基鞘胺醇调节下的人星型细胞中纤溶酶原激活物抑制剂-1的释放