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新疆天山和阿尔泰山野生乌头药材资源调查
目的 掌握新疆天山和阿尔泰山野生乌头药材资源的区系分布、生态环境、气候、土壤等基础数据.方法 通过数据采集、样方测量、走访技术人员和气象部门及购买相关数据,对乌鲁木齐市、哈密市、新源县、尼勒克县、伊宁县、昭苏县、巩留县和布尔津县的野生乌头产区情况进行调查和分析.结果 野生乌头分布东至哈密市,西至昭苏县,北至布尔津县,位于80°15′～93°17′E、42°57′～48°67′N经、纬度范围内,集中分布在海拔1 500～2 500 m的亚高山地带,地理特征为"有山、有水、有海拔",总蕴藏量达到921 t,但利用率仅有1.36%.结论 新疆野生乌头药材资源分布集中,可以持续开发利用,但必须提高现代研究与开发水平.
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民族药制剂在民族药研究中的重要作用
新疆具有丰富的天然植物资源,加快新疆药用植物资源的开发利用研究,实现产业化,事实是西部开发战略的重要组成部分.同时也是新疆继发展"一黑一白"战略后的又一经济增长点,完全符合新疆大开发的时机,前景光明.
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一测多评法测定藏药当佐中没食子酸、羟基红花黄色素-A、桂皮醛及胡椒碱的含量
目的:建市藏药当佐一测多评法,考察不同类型化合物之间采用相对校正因子进行含量测定的准确性和可行性.方法:以藏药当佐为研究对象,通过建立胡椒碱与其他3个指标成分间的相对校正因子(RCF),并利用校正因子对没食子酸、羟基红花黄色素-A、桂皮醛的含量进行计算,实现一测多评(计算法)；同时采用外标法测定当佐中该4个指标成分含量(实测法),并比较计算值与实测值之间的差异.结果:在一定的线性范围内,胡椒碱与没食子酸、羟基红花黄色素-A、桂皮醛间的RCF分别为1.3686,0.2620,3.1333；且在不同实验条件下重现性良好(RSD分别为3.7%,2.2%,2.1%)；不同来源当佐中4个成分含量的计算值与实测值间无明显差异(RSD＜5%).结论:本研究建立的只用1个对照品同步测定当佐中4个成分的一测多评法是准确的、可行的,可用于不同类型化合物间的含量测定,为民族药物多指标质量评价提供新的思路.
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替代对照品法测定龙血竭原料中龙血素A和B的含量
目的:建立替代对照品法同时测定龙血竭原料剑叶龙血树中龙血素A、B的含量.方法:提出了相对斜率的概念,解释了它与相对校正因子的数学关系,阐释了相对斜率(相对校正因子)的物理意义,进而采用相对斜率算法建立剑叶龙血树的含量测定法,并进行方法学验证.结果:方法的线性和回收率均良好;以龙血素A为参照,龙血素B的相对斜率和相对保留时间平均值为1.248和1.06,且在5个不同的色谱系统上保持稳定;相对斜率值与使用紫外分光光度计按吸光系数法测得值一致.结论:相对斜率算法简便、准确,以此进行替代对照品法测定剑叶龙血树中龙血素A、B是可行的.
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七叶莲提取物中总黄酮和槲皮素的含量测定
目的:测定七叶莲提取物中总黄酮及槲皮素的含量.方法:总黄酮含量测定,以芦丁为对照品,采用分光光度法,于509nm处测定;槲皮素含量测定,采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent ZORBAXSB - C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液(36:64),流速1.0 mL·min -1,检测波长为254 nm,柱温25℃.结果:总黄酮线性范围为0.0～40.0 μg·mL-1(r =0.999 9),槲皮素线性范围为0.06～2.40 μg(r =0.999 2);总黄酮和槲皮素的平均回收率分别为100.6％和98.7％.结论:建立的方法具有良好的精密度和耐用性,结果准确可靠,可作为本产品的质量控制方法.
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嵌入式碳纳米管铋膜电极微分电位溶出法测定民族药中微量铅
目的:建立嵌入式碳纳米管玻碳电极测定微量铅测定中的应用.方法:把碳纳米管膜嵌入到玻碳电极表面,用其作为工作电极并与铋膜法相结合,采用微分电位溶出法测定微量铅的含量.结果:与玻碳电极相比,碳纳米管修饰电极能明显提高灵敏度和稳定性.三七根、竹叶兰、青竹标中均含一定量的铅.方法的低检出浓度为0.6000μg·L<'-1>,加标回收率93.9％～108.8％,RSD为2.79％～8.60％.结论:嵌入式碳纳米管玻碳电极具有准确、高灵敏度、稳定性更高等特点,能被用于其它微量元素的测定.
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反相高效液相色谱法测定维药芜菁中槲皮素的含量
目的:建立HPLC法测定维药芜菁中槲皮素含量的方法.方法:反相高效液相色谱法,色谱条件:Kromasil C<,18>柱(5μm,250 mm×4.6 mm)；流动相:甲醇-0.4％磷酸(42:58,v/v)；检测波长:370 nm.结果:测定方法在5.0～50μg·mL<'-1>浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9991),平均回收率为99.2％(RSD=1.59％,n=6).结论:方法简便可行、重复性好,可作为芜菁质量评价的方法之一.同时通过本实验测得芜菁中槲皮素的平均含量为20308μg·g<'-1>,此数据为进一步开发利用新疆丰富的药物资源提供了参考依据.
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一测多评法测定藏药金腰草中4种黄酮类化学成分的含量
目的:建立藏药金腰草中4种黄酮类化学成分含量测定的一测多评法,探讨一测多评法在民族药质量控制中的应用.方法:采用高效液相色谱法,使用Fortis Xi C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-1.0％醋酸水溶液(B),梯度洗脱(0～15 min,10％A→28％A;15～30 min,28％A;30～40 min,28％A→55％A;40～55 min,55％A;55～60 min,55％A→90％A),流速1.0 mL· min-1,检测波长270 nm,柱温30℃,进样量10μL.以Penduletin为内参物,分别建立Chrysosplenoside D、Pendulin、Chrysosplenoside B相对于Penduletin的相对校正因子,分别采用外标法和一测多评法测定4种化合物的含量,并比较二者结果的相对误差.结果:Chrysosplenoside D质量浓度在28.05～140.24μg·mL-1,Pendulin质量浓度在16.53～82.64 μg·mL-1,Chrysosplenoside B质量浓度在48.08～240.40 μg·mL-1,Penduletin质量浓度在32.53～162.64 μg·mL-1范围内线性关系良好;3种化学成分相对于Penduletin的相对校正因子分别为0.588、0.629、0.489;且在不同实验条件下重现性良好(RSD＜3.0％);一测多评法的计算结果与外标法测得结果无显著差异.结论:建立的一测多评法可作为金腰草中4种黄酮类化学成分的含量测定方法,一测多评法为民族药质量控制提供了一个新的模式与方法.
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蒙药材草乌叶DNA条形码研究
目的:建立草乌叶与其易混品的分子鉴定方法.方法:通过聚合酶链式反应(PCR)对草乌叶及9种混伪品的候选序列(ITS、ITS2、marK、rbcL、psbA-trnH)进行扩增,比较各序列的扩增效率和测序成功率,并进行种内、种间遗传变异分析和barcoding gap分析.结果:ITS和ITS2序列GC含量较高,种间变异明显大于种内变异,根据barcoding gap图显示种内、种间遗传距离重叠较小,适合物种的区分,基于K2P距离进行聚类分析,ITS序列呈现较好的单系性.结论:ITS序列可应用于蒙药材草乌叶与其混伪品的鉴定,为民族药鉴定提供新方法.
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HPLC法同时测定维吾尔药材百里香中6种成分的含量
目的:建立HPLC法同时测定维吾尔药材百里香中绿原酸、咖啡酸、百里香酚、芦丁、迷迭香酸和蒙花苷的含量.方法:采用Agilent ZORBX SB-C18色谱柱(250 mm×4.60 mm,5μm),以乙腈(A)-0.2％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～10 min,90％B→85％B;10～16 min,85％B→80％B;16～25 min,80％B→50％B;25～35 min, 50％B→30％B;35～40 min, 30％B→20％B;40～45 min, 20％B→10％B;45～60 rmin,10％B→90％B),流速1.OmL·min-1,检测波长300 nm,柱温30℃,进样量10 μL.结果:绿原酸、咖啡酸、百里香酚、芦丁、迷迭香酸和蒙花苷线性范围分别为0.033～0.198 mg·mL-1(r=0.999 9)、0.034～0.204 mg· mL-1(r=0.999 9)、0.008～0.048 mg· mL-1(r=0.999 7)、0.015 5～0.093 mg· mL-1(r=0.999 6)、0.030 2～0.181 2 mg· mL-1(r=0.999 1)和0.090 1～0.540 6 mg· mL-1(r=0.999 4),加样回收率在99.25％～101.4％之间,RSD为0.8％～1.9％.3批百里绿原酸5.009、5.106、5.185 mg·g-1,咖啡酸4.006、4.152、4.220mg·g-1,香药材中百里香酚含量分别为1.024、1.036、1.106 mg·g-1,芦丁1.822、1.863、1.879 mg·g-1,迷迭香酸7.004、7.054、7.164 mg·g-1,蒙花苷20.001、20.16、20.926 mg· g-1.结论:该方法专属性强,能够快速、准确地测定百里香药材中6种指标性成分含量,为更好地控制维吾尔药材百里香的质量并评价其药用价值提供科学数据.
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HPLC-PDA同时测定石榴健胃片中4种活性成分的含量
目的:建立HPLC-PDA法同时测定石榴健胃片中羟基红花黄色素A、鞣花酸、桂皮醛、胡椒碱的含量.方法:采用Phenomenex Gemini C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.2％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温为30 ℃,检测波长为403 nm(检测羟基红花黄色素A)和267 nm(检测鞣花酸、桂皮醛、胡椒碱).结果:羟基红花黄色素A、鞣花酸、桂皮醛、胡椒碱质量浓度分别在1.02～61.37、0.97～57.97、1.18～70.51、1.00～60.29μg·mL-1范围内均呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 7、0.999 9、0.999 9、0.999 9;平均加样回收率(n=6)分别为100.5％、99.7％、100.4％和100.3％,RSD分别为1.2％、1.1％、1.4％和0.98％;供试品溶液在24 h内稳定;含量分别为1.13、0.33、1.08、2.71 mg·g-1.结论:利用HPLC-PDA法建立一种同时测定石榴健胃片中活性成分羟基红花黄色素A、鞣花酸、桂皮醛、胡椒碱含量的方法,该方法简便准确,专属性强,重复性好.经方法学验证,本法可用于石榴健胃片中羟基红花黄色素A、鞣花酸、桂皮醛、胡椒碱的含量测定.
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藏药二十五味珍珠丸中肉桂酸的含量测定及HPLC指纹图谱研究
目的:建立藏药二十五味珍珠丸的HPLC指纹图谱分析方法及肉桂酸含量测定方法.方法:采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相,流速1.0mL· min-1,检测波长285 nm,柱温30℃.结果:肉桂酸进样量在0.156～1.404 μg的范围内有良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率(n=9)为99.19％.19批二十五味珍珠丸中肉桂酸的含量在30.13～161.08μg·g-1;指纹图谱中检出15个共有峰,相似度计算结果在0.887～0.985之间,并通过聚类分析,将不同企业的19批样品分为两类.结论:该方法较好地反映了二十五味珍珠丸的化学成分信息,且操作简单,重复性好,为进行二十五味珍珠丸的质量评价提供了参考.
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液相色谱-质谱联用同时测定芪胶升白胶囊中黄芪甲苷、淫羊藿苷、阿魏酸的含量
目的:建立中成药芪胶升白胶囊中黄芪甲苷、淫羊藿苷、阿魏酸的含量测定方法.方法:采用Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,5.0μm),流动相A为5 mmol·L-1甲酸铵-0.1％甲酸水溶液,B为乙腈,梯度洗脱,流速0.5 mL· min-1;采用电喷雾离子源进行负模式监测,选择离子监测模式用于定量分析,喷雾电压-4 kV,干燥气温度为350℃,干燥气流量为12 L· min-1,雾化器压力为310 kPa,用于定量分析的离子分别是m/z 829.0(黄芪甲苷)、721.3(淫羊藿苷)、193.2(阿魏酸).结果:黄芪甲苷、淫羊藿苷、阿魏酸质量浓度分别在20.50～1 025、10.38～519.0、10.02～501.0 ng·mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率在97％～101％之间.3批样品中黄芪甲苷、淫羊藿苷、阿魏酸含量分别在0.499～0.509、0.402～0.405和0.100～0.108 mg·g-1.结论:经方法学验证,本方法可以用于芪胶升白胶囊的含量测定.通过对3个批次的芪胶升白胶囊进行分析测定,各个批次含量无明显差异,可为芪胶升白胶囊的全面质量控制提供依据.
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高效液相色谱法同时测定新疆一枝蒿中3个成分的含量
目的:建立新疆一枝蒿中一枝蒿酮酸、6-去甲氧基-4'-O-甲基茵陈色原酮和洋艾素的含量测定方法;比较不同批次的含量差别,为药用植物的选取提供依据.方法:采用高效液相色谱法测定,GeminiNX C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0 μm),以0.4％磷酸(A)-乙腈(B)为流动相,线性梯度洗脱[0～40min,A-B(75∶25)→A-B(40∶60)];洗脱时间:40 min,流速1 mL· min-1,检测波长245 nm,柱温30℃.结果:一枝蒿酮酸质量浓度在13.3～425.2 μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率(n=6)为100.5％(RSD=0.66％);6-去甲氧基-4'-O-甲基茵陈色原酮质量浓度在1.7～53.3 μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率(n=6)为99.6％(RSD=0.68％);洋艾素质量浓度在1.8～56.0 μg· mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率(n=6)为96.8％(RSD=0.53％).结论:本方法操作简便,分离效果和精密度好,为新疆一枝蒿质量控制提供了一个新的方法依据.
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原子荧光光谱法测定傣药蓬莱葛中的痕量砷和汞
目的:建立傣药蓬莱葛中砷和汞的原子荧光光谱检测方法.方法:采用氧化物发生-原子荧光分光光度法测定蓬莱葛中砷、汞的含量,并对测定方法进行方法学考察.结果:在佳工作条件下,砷、汞的浓度与荧光强度均呈现良好的线性关系.砷的检测限为0.0148μg·L-1,RSD为≤4.0％,平均回收率为108.6％～109.7％；汞的检测限为0.1046μg·L-1,RSD≤5.7％,平均回收率为94.4％～109.0％.蓬莱葛中砷和汞元素平均含量分别为0.1537μg·g-1、0.0391μg·g-1.傣药蓬莱葛中砷、汞有害元素含量符合2010年版中国药典中有害元素的限量标准.结论:本文所用方法快速、简便、准确且灵敏度高、效果满意,为蓬莱葛中重金属含量测定提供了较好的方法.
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高效液相色谱法同时测定蒙药复方述达格-4中6个成分的含量
目的:建立采用HPLC同时测定蒙药复方述达格-4中1-苯基-7-(3-甲氧基-4-羟基)苯基-5-醇-3-庚酮、高良姜素、山柰素、高良姜素-3-甲醚、α-细辛醚、木香烃内酯含量的方法.方法:采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2％乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.6 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温30℃,进样量为10 μL.结果:1-苯基-7-(3-甲氧基-4-羟基)苯基-5-醇-3-庚酮、高良姜素、山柰素、高良姜素-3-甲醚、α-细辛醚、木香烃内酯的进样量与其峰面积具有良好的线性关系(r=0.999 9);平均加样回收率(n=6)为96.6％～101.1％,RSD为0.70％～1.8％;测定样品6批,1-苯基-7-(3-甲氧基-4-羟基)苯基-5-醇-3-庚酮、高良姜素、山柰素、高良姜素-3-甲醚、α-细辛醚、木香烃内酯的平均含量分别为0.008 4％～0.060 0％、0.010 7％～0.061 6％、0.010 9％～0.086 5％、0.006 2％～0.0666％、0.011 0％～0.078 1％、0.005 1％～0.060 6％.结论:该方法可用于蒙药复方述达格-4的质量控制,可为蒙药复方述达格-4资源开发利用提供理论依据.
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RP-HPLC法测定热感赛比斯坦颗粒中3种生物碱成分的含量
目的:建立热感赛比斯坦颗粒中吗啡、可待因和罂粟碱3种生物碱成分的含量测定方法.方法:采用高效液相法进行定量分析.吗啡含量测定选用C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-001mol·L-1磷酸二氢钾和0.05 mol· L-1庚烷磺酸钠混合水溶液(pH 3.1) (2:98)为流动相,流速1 mL· min-1,检测波长220 nm;柱温28℃.可待因和罂粟碱含量测定选用C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.01 mol· L-1磷酸二氢钾和0.05 mol· L-1庚烷磺酸钠混合水溶液(pH 3.8)(B)为流动相进行梯度洗脱(0～18 min,2％A→40％A;18～25 min,40％A→52％A),流速1 mL· min-1,检测波长分别为220 nm和257 nm,柱温28℃.结果:吗啡、磷酸可待因和盐酸罂粟碱进样量分别在0.119～23.760、0.057～3.983和0.022～3.906 μg范围内,与峰面积线性关系良好(r=0.999 2～0.999 9),平均回收率(n=6)分别为100.2％、100.0％和100.2％.3批样品中吗啡、可待因和罂粟碱的含量分别为0.030～0.031、0.440～0.444和0.011～0.012 mg· g-1.结论:该方法可用于热感赛比斯坦颗粒中3种生物碱的含量测定.
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星点设计-效应面法优化壮药千斤拔提取工艺
目的:采用星点设计-效应面法优化千斤拔的回流提取工艺.方法:以乙醇浓度、提取时间和溶媒比为自变量,以染料木苷、染料木素和浸膏等的收率为因变量,通过对自变量的总评归一值进行多元线性回归和二项式拟合,采用效应面优化佳的工艺条件.结果:各指标的二项式拟合方程均优于多元线性回归方程,确定回流提取工艺条件为乙醇浓度(X1)为60％ ～80％,溶媒比(X2)为24 ～ 26倍,提取时间(X3)为180 ～240 min,提取次数是2次.工艺验证的总评归一预测值与实际值的偏差为-7.2％,二项式拟合的复相关系数R=0.9343.结论:采用星点设计-效应面法优选方法优化的染料木苷和染料木素提取工艺,方法简便、预测性良好.
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微波消解-等离子体原子发射光谱法测定6种蒙药中15个元素含量
目的:建立电感耦合等离子体原子发射光谱法测定6种清热解毒类蒙药中钼、钴、硒、硅、锰、铜、锡、钡、铁、磷、锌、钾、钠、镁和钙等15个元素含量的方法.方法:采用硝酸-过氧化氢(体积比5∶1)为溶样试剂,以微波消解和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)联用同时测定上述15个元素.结果:在0.5g蒙药中各元素的平均同收率在96.4％→104.5％之间,RSD在1.1％→3.5％之间,检出限介于0.18～102.41 μg· L-1.结论:该方法简便、迅速、准确,适用于蒙药中上述15个元素的同时测定.
关键词： 民族药 清热解毒蒙药 微波消解 电感耦合等离子体原子发射光谱法 微量元素分析 -
贵州注重"黔药"品牌建设
拥有4802种中药资源品种,位居全国第二的贵州省,是我国著名的"云、贵、川、广四大中药道地产区"之一.丰富的中药、民族药资源,使贵州赢得了"地道药材库"、"中药资源库"的美誉.优良草药是根本, 经济发展靠产业." 遍地皆良药" 的贵州省,把新的希望寄托在自身独有而又富集的生物资源上."黔地无闲草",进一步加大投入建设一批民族中药材产业基地,支持民族中药材产业做大做强,提升民族医药产业水平,从2013年起,省财政将加大对民族中草药产业发展资金的统筹力度,确保每年投入2亿元以上资金支持民族中草药产业发展,力争到2015年,全省实现中药材种植面积达到500万亩,带动100多万农民从业,民族中药材总产值达到100亿元以上的目标.
