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胃溃疡愈合前后粘膜SMAD3蛋白的表达及意义
目的:通过研究愈合前后胃溃疡患者胃粘膜中SMAD3蛋白的表达水平,初步探讨其在溃疡发生及愈合中的作用机制.方法:采用免疫组织化学ABC法.结果:20例治疗前后活动性胃溃疡患者胃粘膜组织中SMAD3蛋白的表达水平(以平均吸光度A值表示)为0.9125±0.0158,与治疗后(0.3522±0.01 7)相比明显增高,具有显著性差异(P＜0.01).结论:SMAD3蛋白的高表达可能与胃溃疡的发生有关,并对溃疡的愈合起抑制作用.
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哮喘大鼠肺组织TGF-β1与Smad3、Smad7蛋白的变化及不同中医治法对其的影响
目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smads蛋白在哮喘大鼠肺组织中的变化及宣肺、固本、宣肺固本三种中医治法(宣肺方、固本方、宣肺固本方)对其的影响.方法 以卵蛋白复制大鼠哮喘模型,并用不同中医治法(宣肺方、固本方、宣肺固本方)对其进行干预.在激发哮喘并治疗4周后处死,观察各组大鼠肺系数的变化,并用免疫组化法检测大鼠支气管肺组织中TGF-β1和Smad3、Smad7蛋白的表达.结果 经治疗后,(1)哮喘大鼠的肺系数有不同程度的升高,中药治疗组与地塞米松组间的差异有统计学意义;(2)哮喘大鼠支气管肺组织TGF-β1、Smad3蛋白的表达水平升高,而Smad7蛋白的表达下降,三种中医治法对其均有影响,宣肺固本治法优于其他治法,有统计学意义.结论 哮喘大鼠气道重建模型中TGF-β1、Smad3蛋白与气道重塑呈正相关,而Smad7蛋白则与气道重塑呈负相关;中医宣肺固本法治疗哮喘气道重建可能与调节TGF-β1和Smad3、Smad7蛋白的表达水平有关.
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复方鳖甲软肝方药物血清对大鼠肝星形细胞内TβRⅠ和Smad3蛋白表达的影响实验研究
目的 观察复方鳖甲软肝方药物血清对大鼠肝星形细胞(HSCs)内TβR Ⅰ和Smad3蛋白表达的影响,从信号转导上游受体水平和受体后信号转导水平探讨药物血清抗肝纤维化的作用机制.方法 运用免疫细胞化学和图像分析技术,在离体对不同时相,不同浓度复方鳖甲软肝方药物血清干预状态下,HSC内TβR Ⅰ和Smad3蛋白的表达进行半定量分析. 结果复方鳖甲软肝方药物血清可明显下调HSC表达TβR Ⅰ及抑制HSC表达Smad3蛋白. 结论复方鳖甲软肝方药物血清通过下调TβR Ⅰ的表达,进而干预Smad3介导的TGF-β1在HSC内的信号转导,终抑制胶原蛋白、纤黏连蛋白的合成,从而达到抑制HSC活化的抗肝纤维化作用,这可能是复方鳖甲软肝方药物血清抗肝纤维化作用机制之一.
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miR-140通过下调Smad3表达抑制结肠癌细胞迁移和侵袭能力
目的 探讨miR-140对结肠癌RKO细胞迁移和侵袭能力的影响及其调控机制.方法 将miR-140模拟物、miR-140特异性抑制物和Smad3小干扰RNA(siRNA)等分别通过脂质体转染至细胞,应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测细胞中miR-140和Smad3 mRNA的表达,应用Western blot检测Smad3蛋白的表达.采用细胞划痕实验和Transwell小室模型检测miR-140上调、miR-140下调和Smad3下调对RKO细胞迁移和侵袭能力的影响.结果 Western blot结果显示,上调miR-140后,miR-140组中Smad3蛋白的相对表达水平为0.04±0.01,低于空白对照组(0.47±0.02)和阴性对照组(0.52 ±0.06,均P＜0.05).real-time PCR检测结果显示,miR-140组中Smad3 mRNA表达水平为1.11 ±0.13,与阴性对照组(1.00±0.06)比较,差异无统计学意义(P＞0.05).细胞划痕实验显示,miR-140转染细胞的迁移能力均低于空白对照组和阴性对照组,而与Smad3 siRNA组比较,迁移能力无明显改变.Transwell小室迁移实验显示,miR-140组的穿膜细胞数为76.2±4.4,低于空白对照组(267.1±4.9)和阴性对照组(336.1±5.7,均P＜0.05),而与Smad3 siRNA组(83.5±7.3)比较,差异无统计学意义(P＞0.05).Transwell小室侵袭实验显示,miR-140组的穿膜细胞数为109.5±7.4,低于空白对照组(403.1±5.1)和阴性对照组(392.6±8.4,均P＜0.05);而与Smad3 siRNA组(138.8±3.6)比较,差异无统计学意义(P＞0.05).miR-140下调可使Smad3蛋白表达增高,部分逆转miR-140对细胞迁移和侵袭能力的抑制作用.miR-140抑制剂和Smad3 siRNA共转染则对Smad3蛋白表达和细胞的迁移和侵袭能力无明显影响.结论 miR-140在转录后水平调控Smad3的表达.miR-140抑制结肠癌细胞迁移和侵袭能力,可能是通过下调Smad3来实现.miR-140可能作为肿瘤转移诊断及治疗的潜在候选靶点.
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激活素受体样激酶4,5和7抑制剂体外高通量筛选模型的构建
目的 构建适于高通量筛选的激活素受体样激酶4(ALK4),ALK5和ALK7抑制剂的筛选模型.方法 利用Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统,构建ALK4激酶结构域(ALK4kd),ALK5kd和ALK7kd及Smad2和Smad3蛋白的病毒表达系统,转染Sf9昆虫细胞,表达目的蛋白;通过谷胱甘肽S-转移酶(GST)亲和柱纯化,获得纯化的目的蛋白;分别以纯化的ALK4,ALK5,ALK7激酶片段与纯化的Smad3和ATP构建ALK4,ALK5,ALK7激酶活性测定体系,优化各反应底物浓度及反应条件,建立适于通量化分析的筛选模型;以已知ALK激酶抑制剂SB431542为工具分子,检测其对激酶的抑制活性,确证筛选模型的可靠性.结果 经酶切和PCR鉴定,所得重组Bacmid均正确.转染Sf9昆虫细胞后纯化获得相应目的蛋白.经条件优化,反应体系中激酶和底物蛋白Smad3佳浓度均为10 mg·L-1,ATP佳初始浓度为10 nmol·L-1.所得ALK4,ALK5和ALK7激酶抑制剂筛选体系的Z’因子分别为0.71,0.51和0.74,符合高通量筛选要求.已知SB431542在所建模型上对ALK4kd,ALK5kd和ALK7kd的抑制活性IC50值分别为22,188和91 nmol·L-1.结论 成功构建了ALK4,ALK5和ALK7激酶抑制剂的体外筛选模型.
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γ干扰素对实验性肝纤维化大鼠Smad3 mRNA的影响
目的 初步探讨γ干扰素抗纤维化的分子机制.方法 SD大鼠70只,模型对照组和γ干扰素治疗组注射40%CCl4油剂按0.3ml/100g皮下注射,2次/周,另设正常对照组大鼠10只.γ干扰素治疗组造模同时肌内注射γ干扰素0.2MU/kg,1次/日,模型对照组及正常对照组肌内注射生理盐水,连续干预12周.第12周末处死所有大鼠.取肝脏标本行常规苏木素-伊红和胶原染色,在光镜观察肝组织炎症活动度和肝纤维化情况并进行评分;实时荧光定量PCR方法检测大鼠肝脏Smad3mRNA的表达.结果 肝组织炎症活动度和肝纤维化评分显示γ干扰素治疗组大鼠炎症程度、肝纤维化程度与模型对照组大鼠的肝组织炎症程度、肝纤维化程度比较显著改善(P＜0.01,P＜0.01).荧光定量RT-PCR检测显示:与正常对照组Smad3 mRNA相比,模型对照组大鼠肝脏中Smad3 mRNA表达显著增加(P＜0.01);与模型对照组相比,γ干扰素组大鼠肝脏组织中Smad3mRNA表达明显减少(P＜0.05).结论 γ干扰素抗实验性肝纤维化作用与下调Smad3 mRNA来实现.干预转化生长因子β1信号转导过程是γ干扰素抗肝纤维化的机制之一.
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不同剂量阿托伐他汀对肺纤维化小鼠Smad3/7蛋白表达的影响
目的：研究不同剂量阿托伐他汀对肺纤维化小鼠肺组织中smad3，smad7蛋白表达影响。方法小鼠随机分为对照组，模型组，阿托伐他汀（10 mg/kg，20 mg/kg，40 mg/kg）治疗组。对照组小鼠气管内灌注生理盐水，其余小鼠气管内灌注博来霉素制备肺纤维化模型。给药后第2天开始阿托伐他汀组给予不同剂量阿托伐他汀灌胃，其余两组给予等量生理盐水灌胃，于第7，14，28天分别处死各组小鼠4只，取肺组织进行HE染色观察病理变化，免疫组化法测定肺组织smad3，smad7蛋白表达情况。结果与模型组比较，阿托伐他汀治疗组smad3蛋白表达均降低，smad7蛋白表达升高，且降低及升高程度均与阿托伐他汀剂量呈正相关。结论阿托伐他汀可减轻小鼠肺纤维化程度，其减轻与Smad3/7通路密切相关，且具有剂量依赖性。
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新诊断2型糖尿病患者尿Smad3蛋白水平及其相关因素
目的 探讨新诊断2型糖尿病(T2DM)患者尿Smad3蛋白水平及其影响因素.方法 选取新诊断T2DM患者68例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测新诊断T2DM患者尿中Smad3蛋白水平,并测定患者的空腹血糖和血脂.按尿微量白蛋白分为正常白蛋白尿组(37例)和微量蛋白尿组(31例),比较两组患者中尿Smad3蛋白水平,采用相关和线性回归分析法分析新诊断T2DM患者尿Smad3蛋白的影响因素.结果 与正常蛋白尿组比较,微量白蛋白尿组患者的空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1C)、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血尿酸及尿Smad3蛋白水平均较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);新诊断T2DM患者尿Smad3蛋白与HbA1C、总胆固醇、血尿酸和尿微量白蛋白呈正相关;线性回归分析显示,HbA1c和尿微量白蛋白是新诊断T2DM患者尿Smad3蛋白的独立影响因素(β值分别为0.106、0.003,P＜0.01,P＜0.05).结论 尿Smad3蛋白水平可以作为新诊断T2DM患者肾脏损伤的一个评估指标.
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芪苈强心胶囊改善心肌纤维化及对TGF-β1/Smad3信号转导通路的影响
目的 探讨芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌纤维化(MF)的作用及其可能机制.方法 2012年4-10月于重庆医科大学附属第一医院动物实验中心进行实验.取SD大鼠68只随机分为假手术组8只,余60只建立大鼠CHF模型,8周后随机分为模型组、依那普利组和芪苈强心胶囊高、中、低剂量组.给药4周后检测血浆脑钠肽(BNP)的含量,计算左室质量指数(LVMI),天狼猩红染色(PSR)观察左室心肌胶原形态,测量胶原容积分数(CVF),免疫组化法检测心室中转化生长因子β1(TGF-β1)和Smad3蛋白的表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠BNP、LVMI、Ⅰ/ⅢCVF、TGF-β1和Smad3蛋白表达均明显增加(t=9.75、2.04、9.59、8.57、9.23,P<0.05或P<0.01);与模型组比较,依那普利组、芪苈强心胶囊各剂量组BNP、LVMI、Ⅰ型CVF、Ⅲ型CVF、TGF-β1和Smad3蛋白表达均明显降低(芪苈强心胶囊低、中剂量组BNP除外,芪苈强心胶囊低剂量组Ⅲ型CVF和Ⅰ/ⅢCVF除外),差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与依那普利组比较,芪苈强心胶囊中、高剂量组各项指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 芪苈强心胶囊能减轻CHF大鼠的心室肥厚,抑制MF和改善心功能,这种作用可能与抑制TGF-β1/Smad3信号转导有关.
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火把花根对系膜增殖性肾炎大鼠TGF-β1和Smad3表达的影响
目的 探讨火把花根对MsPGN大鼠TGF-β1和Smad3表达的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为正常对照组、MsPGN肾炎非治疗组(模型组)和MsPGN肾炎火把花根治疗组.用抗胸腺细胞血清诱发造模.于给药14d后,测量24h尿蛋白,处死大鼠,用PAS染色观察肾脏病理变化;RT-PCR检测肾组织中TGP-β1和Smad3的mRNA表达.采用Westernblot检测TGF-β1和Smad3蛋白定量的表达.结果 与正常组相比,MsPGN肾炎大鼠24h尿蛋白排出增加;肾小球ECM明显增多、系膜区扩大(PAS染色); TGF-β1和Smad3 mRNA表达上调;TGF-β1和Smad3蛋白的表达明显增加.火把花根治疗后上述指标明显减轻.结论 TGF-β/Smad通路在MsPGN肾炎时是激活的,火把花根治疗可延缓肾脏损害.
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白藜芦醇对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及机制探讨
目的：观察白藜芦醇（Res）对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用，并探讨其作用机制。方法40只SD大鼠分别予普通饲料喂养16只（对照组、空白组各8只）和高脂高糖饲料喂养24只，喂养8周后高脂高糖喂养的大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素40 mg／kg制作2型糖尿病模型，取16只随机分为观察组、模型组各8只。观察组和对照组予10 mg／（kg· d） Res，模型组和空白组予等量的1％羧甲基纤维素钠，每日灌胃1次，连续8周。比较各组空腹血糖（FBG）、TG、TC、肾脏质量指数（Kw／Bw）、24 h尿蛋白定量。 PAS染色观察肾脏组织病理学变化，免疫组化法检测肾脏组织CD68和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA），Western blot法检测转化生长因子β1（ TGF-β1）、Smad3和磷酸化Smad3蛋白。结果观察组24 h尿总蛋白、FBG、TC、TG、Kw／Bw均低于模型组，P均＜0．01；模型组24 h尿总蛋白、FBG、TC、TG、Kw／Bw均高于空白组、对照组，P均＜0．01。肾脏组织病理改变为观察组轻于模型组，模型组重于空白组、对照组。观察组肾脏组织α-SMA、CD68的表达均低于模型组，P均＜0．01；模型组肾脏组织α-SMA、CD68表达均低于空白组、对照组，P均＜0．01。观察组TGF-β1、磷酸化Smad3蛋白的相对表达量明显低于模型组、对照组，P均＜0．01；模型组TGF-β1、磷酸化Smad3蛋白的相对表达量明显低于空白组，P均＜0．01。结论 Res对2型糖尿病大鼠的肾脏功能有保护作用，可能与抑制TGF-β1／Smad3信号通路有关。
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丹参酮Ⅱ A对肝癌细胞MHCC97-H Smad3/Smad7蛋白及上皮间质转化的影响
目的:探讨丹参酮Ⅱ A对肝癌细胞MHCC97-H Smad3、Smad7蛋白及上皮间质转移标志蛋白E-cadherin/N-cadherin表达水平及侵袭转移能力的影响.方法:10 μM丹参酮Ⅱ A处理MHCC97-H细胞,实时定量PCR检测细检测Smad3、Smad7和snail的mRNA表达;用不同浓度丹参酮Ⅱ A及10％小牛血清对照组培养肝癌细胞MHCC97-H,48h后,Western blot检测Smad3、p-Smad3、Smad7、Snail、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达水平.划痕法和Transwell小室检测肝癌细胞侵袭/迁移能力.结果:10 μM丹参酮Ⅱ A处理MHCC97-H细胞,不同时间点检测Smad3、Smad7和snail的mRNA表达:结果显示,与0h相比,48 h及72 hSmad7的表达量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);Smad3及snail的差异无统计学意义.不同浓度丹参酮Ⅱ A处理MHCC97-H细胞48 h,Western blot检测Smad3、p-Smad3、Smad7、snail、E-cadherin、EpCAm、N-cadherin和Vimentin蛋白表达:结果显示,与对照组相比,高浓度丹参酮Ⅱ A组(20 μM)48 h的p-Smad3、Snail和N-cadherin、Vimentin明显降低,Smad7、E-cadherin和EpCAM明显升高(P＜0.05).中浓度丹参酮Ⅱ A组(10 μM)48 h的Smad7、E-cadherin和EpCAM升高;p-Smad3、snail、N-cadherin和Vimentin降低(P＜0.05).低浓度丹参酮Ⅱ A组(5μM)48 h的E-cadherin升高,N-cadherin降低(P＜0.05);而Smad3、p-Smad3及snail的结果与对照组无明显差异(P＞0.05).不同浓度的丹参酮Ⅱ A组和对照组(DMSO)Smad3的蛋白表达无影响.不同浓度的丹参酮Ⅱ A组均可以减少p-Smad3和增加E-cadherin的表达,且随着丹参酮Ⅱ A浓度增高p-Smad3的表达逐渐减少,E-cadherin的表达逐渐增加.划痕法结果显示,与对照组比较,24h后中浓度和高浓度丹参酮Ⅱ A组肝癌细胞的划痕愈合较慢,差异均有统计学意义(P＜0.05);48 h后中浓度和高浓度丹参酮Ⅱ A组与对照组相比,肝癌细胞的划痕愈合明显减慢,差异有统计学意义(P＜0.01);且同等浓度丹参酮Ⅱ A组肝癌细胞的划痕愈合与24h相比较,48 h肝癌细胞的划痕愈合减慢.transwell显示,与对照组相比,中浓度和高浓度丹参酮Ⅱ A处理细胞48 h可明显减少细胞的侵袭,差异有统计学意义(P＜0.05).而低浓度丹参酮Ⅱ A无明显影响,差异无统计学意义.结论:丹参酮Ⅱ A能抑制肝癌细胞侵袭转移,可能与与抑制Smad3蛋白磷酸化、上调Smad7蛋白,并抑制上皮间质转化有关.
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贝那普利对糖尿病大鼠胰腺组织中TGF-β1和Smad3表达的影响
目的 研究贝那普利对糖尿病大鼠胰腺组织中TGF-β<,1>和Smad3表达和RAS系统的影响。方法 以健康成年Wistar大鼠为实验对象，随机分为正常组、糖尿病未干预组和糖尿病贝那普利干预组3组。正常组以普通饲料喂养，糖尿病未干预组和糖尿病贝那普利干预组以高脂高糖饲料喂养。6周后腹腔注射链脲佐菌素诱导成糖尿病大鼠。于给药8周后处死。检测各组大鼠的血糖、胰岛素、体重。采用免疫组织化学方法检测胰腺组织中TGF-β<,1>及Smad3蛋白的表达，并用彩色病理图像分析系统进行定量分析。采用放射免疫的方法检测胰腺组织中的血管紧张素Ⅱ的含量。结果 与正常组相比，糖尿病未干预组血糖增加胰岛素分泌减少、体重减，轻。TGF-β<,1>及Smad3蛋白的表达明显增加。胰腺组织中的血管紧张素Ⅱ含量增加。贝那普利治疗后除体重无变化外上述指标均明显改善(P<0.05)。结论 胰腺局部RAS系统和TGF-β<,1>/Smad通路在糖尿病时是激活的，贝那普利治疗后可改善胰腺纤维化并可改善胰岛功能。
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丹参素干预对肺纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响
目的:探讨丹参素对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的防治作用及其可能机制.方法:SD大鼠经气管内滴注博莱霉素诱导肺间质纤维化,随后分别腹腔内注射丹参素15 mg·kg-1·d-1(DA组)、地塞米松1mg·kg-1·d-1(DXM组)和生理盐水2mL·d-1(BLM组)进行干预,正常对照组(NC组)气管内滴注和腹腔内注射均用生理盐水.于造模后第28天处死所有大鼠,通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色来评价治疗效果；免疫组化技术检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达；实时荧光定量PCR测定转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3及Smad7 mRNA的表达.结果:DA组与BLM组相比,肺泡炎症及肺纤维化程度均明显减轻,肺组织α-SMA表达明显减少,肺组织TGF-β1和Smad3 mRNA表达明显减少,Smad7 mRNA明显增多.结论:丹参素早期应用可减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能通过抑制TGF-β1、Smad3 mRNA和促进Smad7 mRNA的表达而实现.
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TGF －β1／Smad3对辐射所致鼻咽癌细胞凋亡及细胞周期分布的影响
目的：探讨TGF－β1／Smad3在辐射所致鼻咽癌细胞CNE－2凋亡中的作用及其机制。方法 CNE－2细胞分为6 Gy照射组、TGF－β1＋6 Gy照射组以及对照组，免疫荧光方法检测γH2AX焦点形成试验，流式细胞仪检测凋亡细胞及细胞周期分布，MTS法检测细胞生长生长活力，绘制生长曲线并计算生长增殖率。 Western blot 检测P－ATM、pCHK1、pCHK2、CDC25A、p－Smad3、Smad3、P15和CDK4蛋白表达水平。结果照射组及TGF－β1＋6 Gy照射组凋亡细胞数明显增多，细胞核体积缩小，可见浓染致密的γH2AX表达。 TGF－β1＋6 Gy 照射组的γH2AX表达相对于对照组与6 Gy照射组明显增加。6 Gy照射组和TGF－β1＋6 Gy照射组的G2／M期细胞比例均明显高于对照组（P＜0.05）。 TGF－β1＋6 Gy照射组与6 Gy照射组相比，S期明显增加（P＜0.05）。 TGF－β1＋6 Gy照射组和6 Gy照射组的凋亡及坏死细胞比对照组的明显增加，差异有统计学意义（ P＜0.01）。 TGF－β1＋6 Gy照射组的凋亡和坏死细胞比例明显比6 Gy照射组增加，差异有统计学意义（ t P＜0.05）。对照组、6 Gy照射组和TGF－β1＋6 Gy组的CNE－2细胞克隆形成率分别为0.60、0.03和0.01，与对照组相比，6 Gy照射组和TGF－β1＋6 Gy照射组的细胞克隆形成明显减少，差异有统计学意义（ P＜0.01）。与6 Gy照射组相比，TGF－β1＋6 Gy照射组的细胞形成率减少，差异有统计学意义（ P＜0.01）。 Western blot 结果显示TGF－β1处理组相对于单独6 Gy照射组，p－ATM、p－CHK1、p－CHK2、P15、p－Smad3、CDC25A及CDK4表达下调，Smad3表达无明显变化。结论 TGF－β1可增加照射所致鼻咽癌细胞的凋亡，可能与增加S期细胞比例以及抑制Smad3磷酸化同时促进ATM磷酸化有关。
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纤维化大鼠肝组织中SMAD3蛋白和ERK1的表达
目的:通过研究大鼠肝纤维化模型肝组织中细胞外信号调节激酶(Extracellular signal-regulated kinase, ERK)和SMAD3蛋白的表达及分布规律,初步探讨它们所介导的信号通路在肝纤维化发病机制中的作用.方法:雄性SD大鼠32只,质量250～300 g,皮下注射CCl4制备大鼠肝纤维化模型,分别于注射CCl4后1、4、8周处理动物,采用免疫组织化学方法检测肝组织中ERK1和SMAD3蛋白的表达及分布.结果:ERK1和SMAD3蛋白均主要表达于肝星状细胞中.CCl4注射诱导后,大鼠肝组织中ERK1和SMAD3蛋白的表达较正常对照明显增强(P<0.05).且CCl4注射1、4、8周组肝组织中两者的表达强度均呈明显的逐级递增的趋势(P<0.05).结论:ERK信号通路的激活促进肝星状细胞活化增殖;与此同时,SMAD3蛋白介导的信号通路则可能与肝星状细胞的纤维化活性密切相关,两者共同促进大鼠肝纤维化的发生发展.
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胃溃疡患者胃黏膜中SMAD3蛋白的表达及其意义
目的:探讨胃黏膜中SMAD3蛋白在胃溃疡发生及愈合中的作用机制.方法:采用免疫组织化学ABC法,对20例愈合前后胃溃疡患者胃黏膜组织中SMAD3蛋白的表达水平及其分布进行检测.结果:治疗前20例活动性胃溃疡患者胃黏膜组织中SMAD3蛋白的表达水平为0.9125±0.0158(以平均吸光度A值表示),与治疗后(0.3522±0.0317)相比明显增高(P＜0.01).镜下,SMAD3蛋白主要表达于胃黏膜上皮细胞和胃底(体)腺上皮细胞胞质内,少数固有层中浸润的炎症细胞亦见阳性表达.结论:SMAD3蛋白的高表达可能与胃溃疡的发生有关,并对溃疡的愈合起抑制作用.
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肝细胞癌及肝癌旁组织中SMAD3蛋白的表达及其生物学意义
目的:检测Smad3蛋白在肝癌及癌旁肝组织中的表达,并探讨其生物学意义.方法:采用SABC免疫组织化学方法检测Smad3蛋白在21例肝癌及其紧邻癌旁肝组织、7例正常肝组织中的表达.结果:Smad3蛋白在正常肝组织、癌旁肝组织、肝癌组织中的表达分别为0.0375±0.0031、o.0307±0.0083、0.0169士0.0045.呈明显的逐级递减趋势(组间比较分别为P＜0.01、P＜0.05).结论:Smad3蛋白表达水平的下调可能与HCC发生的早期事件有关.
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冬虫夏草对肝纤维化小鼠Smad3蛋白表达的影响
目的 探讨冬虫夏草对四氯化碳致小鼠肝纤维化的作用及肝脏Smad3蛋白表达的影响.方法 四氯化碳皮下注射复制BALB/c小鼠肝纤维化模型,虫草组在造模同时予以虫草煎剂,直至造模结束.HE染色观察肝组织炎症,天狼猩红染色观察肝脏胶原沉积,生化法测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,免疫组化测定Smad3在肝脏内的表达.结果 与正常小鼠比较,肝纤维化小鼠肝脏肝静脉与汇管区周围肝细胞明显脂肪变性,肝脏胶原沉积,可见纤维间隔形成,肝脏Hyp含量、Smad3蛋白表达量均显著增加.与模型组比较,虫草组肝脏炎症与胶原沉积减轻,Smad3蛋白表达量明显降低.结论 肝纤维化BALB/c小鼠的肝脏Smad3蛋白表达明显上升,虫草制剂有良好的抗肝纤维化作用,其作用机制与下调Smad3蛋白表达有关.
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TGF-β1/Smad3在博来霉素肺纤维化大鼠中的作用
目的 通过Smad3特异性抑制剂(specific inhibitor of Smad3,SIS3)干预博来霉素肺纤维化大鼠,观察转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3蛋白表达情况,探讨TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中的作用.方法 选取健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为4组:生理盐水对照组(NS组),博来霉素组(BLM组),SIS3干预组(SIS3组),二甲基亚砜溶媒组(DMSO组),每组15只.BLM组、SIS3组和DMSO组气管内注射博来霉素溶液(5 mg/kg)建立大鼠肺纤维化模型;NS组以同样方法注入等量生理盐水;SIS3组大鼠腹腔内注射SIS3(2.5 μg/g)干预处理,BLM组注射等量生理盐水,DMSO组注射等量DMSO.各组于造模后第7、14、28天分别处死5只大鼠,行Masson染色观察各组肺组织胶原纤维差异.免疫组化检测各组TGF-β1、Smad3表达情况.结果 与NS组比较,BLM组、DMSO组大鼠肺组织出现明显纤维化,TGF-β1、Smad3表达明显增高;与BLM组、DMSO组相比,SIS3组大鼠肺纤维化程度减轻,TGF-β1、Smad3表达减少.结论 SIS3干预肺纤维化大鼠,能够减轻大鼠肺泡炎,降低肺纤维化程度;TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中可能起到重要作用.
关键词： 肺纤维化 Smad3特异性抑制剂 转化生长因子β1 SMAD3蛋白
