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灰树花β-葡聚糖的遗传毒性试验
灰树花(Grifola frondosa)为药食两用真菌,属担子菌和多孔菌属.研究证明,灰树花多糖具有抑制肿瘤、免疫调节、抗病毒、调节血糖和血脂水平、改善脂肪代谢等多种生物活性[1].
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β-葡聚糖对树突状细胞的免疫调节作用及生物学意义
β-葡聚糖作为一种"生物反应调节剂"在调控树突状细胞(DC)功能方面起着重要作用,许多研究显示β-葡聚糖可以促进DC成熟、细胞因子分泌及调节适应性免疫应答.β-葡聚糖具有抗肿瘤、抗感染和抗炎症等多种生物学功能,这些效应与β-葡聚糖调控DC的作用密切相关.本文就目前国内外在β-葡聚糖对DC免疫调节作用的研究进展及在抗肿瘤、抗感染和抗炎症等方面的应用进行了综述.
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β-葡聚糖对创面愈合过程中细胞作用的研究进展
β-葡聚糖是一种由β-糖苷键连接D-葡萄糖单体组成的多糖,其来源丰富、结构多样,具有多种生理功能.目前对其降血脂、降血糖、抗肿瘤、抗感染、免疫调节等功能有很多报道,但对其促进创面愈合的作用尚无系统报道.本文通过查阅近年来国内外相关文献,对β-葡聚糖促进创面愈合的作用进行总结.文献分析表明,β-葡聚糖能够刺激巨噬细胞、成纤维细胞、角化细胞以及淋巴细胞等重要细胞,使其活化、增殖、迁移,并释放多种细胞因子,从而增强细胞功能,有助于抗炎抑菌、胶原合成、肉芽组织生长、创面再上皮化及创面愈合后的改建,从而促进创面的愈合.本文主要阐述了β-葡聚糖对创面愈合过程各类细胞的作用并系统地总结其对整个创面愈合过程的影响,为揭示其促进创面愈合的细胞学机制提供了理论基础和依据.
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小鼠Dectin-1胞外区的融合表达及其识别白念珠菌β-葡聚糖的研究
目的 克隆、表达并纯化小鼠腹腔巨噬细胞Dectin-1基因胞外区,探讨其识别并结合真菌β-葡聚糖的能力.方法 应用RT-PCR方法从小鼠腹腔巨噬细胞RNA中扩增Dectin-1基因胞外区,构建原核重组表达载体pET28-CRD,进行融合表达、纯化和复性.将融合蛋白与白念珠菌酵母相共同孵育,检测其识别、结合白念珠菌细胞壁β-葡聚糖的功能.结果 成功克隆并构建原核重组表达质粒pET28-CRD,表达并纯化了融合蛋白,该蛋白能识别、结合白念珠菌酵母细胞壁β-葡聚糖.结论 构建的原核重组表达载体能够在原核细胞内表达,表达产物有识别、结合真菌胞壁β-葡聚糖的功能,为进一步研究相应的真菌检测方法奠定了基础.
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补体在单克隆抗体介导的肿瘤免疫治疗中的作用
被单克隆抗体激活的补体可以直接造成肿瘤细胞溶解或增强ADCC作用.然而肿瘤细胞表面通常有高水平表达的膜结合补体调节蛋白(mCRP)使其免受补体介导的杀伤作用.近期研究表明,阻断或克服肿瘤细胞的mCRP可显著提高单抗免疫治疗的疗效.另外,单抗辅以β-葡聚糖可以使iC3b沉积在肿瘤细胞表面并激活补体受体3(CR3)从而介导CR3依赖性细胞毒作用.这些都已成为现有单抗作用机制的有益补充.
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补体在单克隆抗体介导的肿瘤免疫治疗中的作用
被单克隆抗体激活的补体可以直接造成肿瘤细胞溶解或增强ADCC作用.然而肿瘤细胞表面通常有高水平表达的膜结合补体调节蛋白(mCRP)使其免受补体介导的杀伤作用.近期研究表明,阻断或克服肿瘤细胞的mCRP可显著提高单抗免疫治疗的疗效.另外,单抗辅以β-葡聚糖可以使iC3b沉积在肿瘤细胞表面并激活补体受体3(CR3)从而介导CR3依赖性细胞毒作用.这些都已成为现有单抗作用机制的有益补充.
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酵母菌全葡聚糖颗粒β-葡聚糖联合抗瘤单克隆抗体治疗肿瘤
β-葡聚糖是来源于酵母菌全葡聚糖颗粒和其它来源细胞壁的生物效应调节剂(BRMs),用于启动白细胞补体受体3(CR3),从而使这些细胞可以杀伤补体片段iC3b调理的肿瘤细胞.大量动物肿瘤模型研究显示,口服微粒酵母菌β-葡聚糖与抗肿瘤单克隆抗体的联合治疗在肿瘤退化和长时间生存方面有效.β-葡聚糖能提高抗肿瘤单克隆抗体临床治疗的有效性.
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呼吸机相关性肺炎并发假丝酵母菌感染患者PCT、IL-6和CRP水平分析
目的 探究呼吸机相关性肺炎(VAP)并发单一假丝酵母菌感染患者的临床特征以及与降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)和C-反应蛋白(CRP)等炎症指标的相关性. 方法 选择2008年1月-2016年3月医院收治的149例VAP患者,根据假丝酵母菌感染的相关诊断标准,分为假丝酵母菌属组65例、其他病菌组84例;比较两组患者临床指标.结果 在65例伴有假丝酵母菌感染的VAP患者中,以白假丝酵母菌感染为主,共40株占61.54%;在假丝酵母菌属组中,β-葡聚糖阳性患者的PCT、IL-6以及CRP水平均显著高于β-葡聚糖阴性患者,组间比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 导致VAP患者发生的假丝酵母菌感染的易感因素众多,在临床治疗期间需积极消除各种易感因素,及时给予其相应的抗真菌感染治疗;β-葡聚糖在评价假丝酵母菌感染以及感染程度上具有一定的临床应用价值.
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Dectin-1与真菌β-葡聚糖介导的天然免疫
β-葡聚糖是真菌胞壁的主要多糖成分。天然免疫系统识别这一成分后触发髓系细胞的免疫应答反应，杀伤和清除入侵微生物。该文主要介绍天然免疫细胞的模式识别受体dectin-1与β-葡聚糖的特性以及它们通过何种信号传导途径激活天然免疫系统。对β-葡聚糖和dectin-1的研究必将为研制抗真菌免疫制剂和抗真菌药物靶点提供崭新的思路。
关键词： 真菌 β-葡聚糖 天然免疫 dectin-1信号传导通路 -
β-葡聚糖与内毒素共同作用对细菌内毒素检查的影响
目的:研究β-葡聚糖与细菌内毒素共同作用对细菌内毒素检查结果的影响及探讨消除的方法.方法:比较普通鲎试剂和特异性鲎试剂分别与细菌内毒素、β-葡聚糖、内毒素葡聚糖混合溶液的反应.结果:普通鲎试剂可以与β-葡聚糖反应而特异性鲎试剂不与β-葡聚糖产生凝胶反应;微量的β-葡聚糖和内毒素混合液可以使普通鲎试剂产生凝胶反应.结论:β-葡聚糖可以使细菌内毒素检查呈现假阳性结果,应对现行的鲎试剂质量标准和药典细菌内毒素检查法进行修订以免出现误判.
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β-葡聚糖对代谢综合征的防治作用研究进展
β-葡聚糖又称右旋糖酐，是食物纤维的组成部分。早在上个世纪80年代末，美国科学家发现大麦中β-葡聚糖有降血脂、降胆固醇和预防心血管疾病等作用，随着研究的逐步深入，其作用功效和机制已有部分确切性的结论。由于β-葡聚糖来源众多，不同来源的β-葡聚糖其相对分子质量、溶解性、黏度、剂量、分子结构均存在较大差异；将其提取加工后，添入不同食物介质如面包、谷物、饮料当中，观察β-葡聚糖对健康人群和代谢性疾病患者的保健和预防作用。本文就β-葡聚糖对代谢综合征相关症状如肥胖或超重、血压、血糖、血脂及肠菌群等的作用效果及相关机制做综述。
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燕麦β-葡聚糖对小鼠结肠菌群及其功能的影响
目的:研究燕麦β-葡聚糖对小鼠结肠菌群及其功能的影响.方法:体重23～25 g的健康昆明种小鼠126只,分成7组,每组18只,实验组(1～6组)分别以高低剂量0.5 g和0.25 g/(㎏ bw·d)灌胃给予燕麦β-葡聚糖OG2600、OG340和OG5,对照组给予相同体积的生理盐水,灌胃期28 d.分别于实验14、28和35 d(停止灌胃后1w)分析各组小鼠结肠双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠杆菌的变化;并在实验28 d用气相色谱法测定小鼠结肠中短链脂肪酸的含量;用流式细胞仪分析结肠粘膜上皮细胞变化.结果:与对照组比,随着灌胃时间的延长,各实验组均可使小鼠肠道和粪便中的双歧杆菌和乳酸杆菌增殖,使大肠杆菌数量减少,作用效果与分子大小和剂量有关;第2、4、6组小鼠结肠内容物的乙酸、丙酸、丁酸的量显著高于对照组(P＜0.05);第6组细胞增殖指数和对照组有显著差异(P＜0.05).结论:燕麦β-葡聚糖具有调节小鼠肠道菌群的作用;在体内容易发酵产生较高比例的短链脂肪酸,能促进结肠粘膜上皮细胞的增殖.
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β-葡聚糖干预高脂膳食喂养大鼠脂代谢的作用
β-葡聚糖是一种主要存在于燕麦及大麦中的非淀粉水溶性植物多糖,具有降血脂、降血糖、提高免疫力等多种生理功效~([1,2]).本实验旨在研究β-葡聚糖对高脂血症大鼠血脂及脂代谢酶的影响,以同时探讨其降脂机制.
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大麦在糖尿病防治中的意义
目前,国际上对血糖生成指数研究颇热,认为低血糖指数食物与人类健康关系密切.大麦是一种低血精指数食物,其所含的β-葡聚精和丰富的微量元素在血糖、血脂代谢、糖尿病及其并发症的防治中发挥了重要作用.青稞是大麦的变种,其各种营养成分与普通大麦相似,但它所含的β-葡聚糖远高于普通大麦.故研究青稞食品颇具前景.
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β-葡聚糖对单核细胞释放 TNF-α、IL-8和 IL-12的影响
目的：研究β-葡聚糖对单核细胞释放动脉粥样硬化致病因子[肿瘤坏死因子α（ TNF-α）、白细胞介素18（IL-8）和白细胞介素12（IL-12）]的影响。方法用密度梯度离心法分离健康志愿者新鲜血液中的单核细胞，使用佛波醇酯（ PMA）诱导单核细胞分化为巨噬细胞，进一步利用氧化低密度脂蛋白（ ox-LDL）诱导巨噬细胞为泡沫细胞，将实验分为无药对照组、ox-LDL组、颗粒性β-葡聚糖（ WGP）组和WGP＋ox-LDL组，提取总RNA，扩增TNF-α、IL-8和IL-12 cDNA，并采用酶联免疫吸附试验（ ELISA）测定细胞上清液中的浓度。结果与无药对照组比较，ox-LDL诱导单核细胞TNF-α、IL-8和IL-12蛋白水平的表达显著升高（P＜0．05），而WGP可以显著抑制ox-LDL诱导的上述细胞因子在蛋白水平和TNF-α、IL-8在mRNA水平的表达（P＜0．05）。结论β-葡聚糖可能通过抑制单核细胞促炎因子的分泌减缓动脉粥样硬化形成。
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Mac-1的结构与功能及其在肿瘤免疫治疗中的作用
Mac-1是位于白细胞表面参于机体防御作用及免疫反应的重要的粘附分子,它由α(CD11b)和β(CD18)两个亚基以非共价键的方式缔合成异二聚体,Mac-1的分子结构中有两个重要的区域:一个是识别蛋白配体的I-域,另一个是识别多糖的凝集素部位.Mac-1在几乎所有中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性细胞和NK细胞上广泛表达,巨噬细胞、B细胞和T细胞表达较少. Mac-1具有两种主要的功能:一是与活化的内皮细胞表面上的ICAM-1高亲和力的粘附,介导白细胞的游走与渗出.二是作为iC3b的受体,介导白细胞对iC3b调理的微生物或靶细胞的细胞毒功能.此外,Mac-1还能与许多细胞膜表面的糖蛋白缔合成复合物,介导信号的跨膜转导.研究发现,可溶性的β-葡聚糖能够结合并致敏Mac-1继而触发吞噬细胞或NK细胞对iC3b-调理的肿瘤细胞的细胞毒反应,这一发现为β-葡聚糖在肿瘤免疫治疗中的应用提供了理论基础.大多数的人类或动物的肿瘤细胞能活化补体并在原位被iC3b调理,肿瘤细胞表面的iC3b结合到β-葡聚糖致敏了的Mac-1后,吞噬细胞或NK细胞就能杀伤肿瘤细胞.
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白念珠菌胞壁β-葡聚糖诱导人外周血单个核细胞产生IL-6和IL-8的研究
不同浓度的白念珠菌胞壁碱溶性和不溶性β-葡聚糖、白念珠菌菌悬液与人外周血单个核细胞共孵育24h,阳性对照为IL-6、8诱导剂脂多糖,并设不加刺激剂的空白对照,酶联免疫法检测上清液中白介素-6、8(IL-6、8)的含量.结果表明,3种浓度不溶性β-葡聚糖均能诱导产生IL-6、8,而碱溶性β-葡聚糖3种浓度均未能诱生这两种因子.5×107、5×105CFU/mL白念珠菌菌悬液能诱导产生IL-6和IL-8,5×103CFU/mL则未能.提示此胞壁成分的抗原性及其对临床的意义.
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灰树花菌丝体中几种多糖的分离及结构表征
目的从灰树花菌丝体中分离多糖,并进行结构分析.方法灰树花茵丝体经85%乙醇脱脂后,依次用热水、冷碱和热碱对其进行提取.所得多糖采用气相色谱、高效液相色谱、红外光谱、高碘酸氧化、Smith降解等方法分析.结果热水提取得到了1种水溶性杂多糖,相对分子质量为85 000,含岩藻糖-甘露糖-葡萄糖(0.03:0.74:1)和少量糖醛酸;碱提取得到2种含β-(1,6/1,3)连接的水溶性葡聚糖,相对分子质量分别为95 000和140 000.结论灰树花茵丝体水提取可得到杂多糖;碱提取可得到具有超螺旋结构的水溶性β-(1,6/1,3)-葡聚糖.
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β-葡聚糖对巨噬细胞的增殖及ERK5通路的影响
目的: 探讨β-葡聚糖对于小鼠巨噬细胞RAW264.7的生长增殖和诱导细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,以及细胞外信号调节激酶5(ERK5)信号通路在这一过程中的表达.方法: 以不同浓度(12.5,25,50,100,200和400 μg/ml)的β-葡聚糖刺激体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞后,用四唑盐比色实验(MTT)检测细胞的生长增殖; 瑞氏染色法检测RAW264.7 细胞的吞噬活性;用ELISA方法测定培养上清液中TNF-α的表达量;蛋白质印迹法检测ERK5及磷酸化ERK5 (p-ERK5)表达情况.结果: MTT实验结果显示不同浓度的β-葡聚糖对细胞的增殖有不同程度的促进作用,其中以100 μg/ml浓度时促进作用大,大剂量时则对细胞增殖产生抑制作用.在浓度为100 μg/ml时,TNF-α的表达量达到峰值,ERK5和p-ERK5被活化.结论: 一定浓度的葡聚糖对小鼠巨噬细胞的增殖和吞噬有明显的促进作用,细胞外信号调节激酶5信号通路参与了这一过程.
关键词： β-葡聚糖 肿瘤坏死因子-α 巨噬细胞 细胞外信号调节激酶5 -
β-葡聚糖对巨噬细胞增殖胞内游离钙及cAMP浓度的影响
目的: 探讨β-葡聚糖对RAW264.7细胞增生、胞内游离钙及cAMP浓度的影响.方法: 中性红比色法检测细胞生长, 酚试剂法检测细胞蛋白质合成, 动态检测β-葡聚糖对胞内游离钙和cAMP浓度的影响.结果: 微量β-葡聚糖可促进细胞生长及蛋白质合成;β-葡聚糖作用后3～5 min使胞内游离钙浓度升高,作用1 min 后使cAMP浓度升高, 并保持较高水平.结论: 胞内游离钙及cAMP是β-葡聚糖对RAW264.7细胞作用过程中重要的信使分子.
关键词： β-葡聚糖 胞内游离钙 环磷酸腺苷 RAW264.7细胞系 增殖
