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人TAT-PDX-1融合蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化

苗成;宋波;王茜;张宁;韩志强;许予明

摘要: 目的 构建人TAT-PDX-1表达载体,并对其融合蛋白进行纯化.方法 采用RT-PCR技术从人胰腺组织中获得目的基因hPDX-1,将TAT序列与PDX-1克隆到原核表达载体pET-28a;用IPTC诱导、表达融合蛋白;Ni-NTAagaros纯化融合蛋白,Western blot鉴定.结果 目的片段PDX-1被有效扩增,DNA序列测定表明所构建重组质粒pET28a-TAT-h PDX -1与设计相同;TAT-PDX-1融合蛋白在大肠杆菌中获得高效表达并成功纯化.结论 成功地获得了TAT-hPDX-1融合基因的表达产物,为进一步研究及临床应用奠定了基础.

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