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肠出血性大肠埃希菌双重实时荧光PCR检测方法的建立

刘晓岑;金玉娟;刘渠;许欣;陈应坚;甘丽萍;杨慧;徐亚军

摘要: 目的 建立快速、灵敏、特异、有效的肠出血性大肠埃希菌(EHEC)双重实时荧光PCR检测方法.方法 根据GenBank公布的EHEC的stx1和stx2基因序列设计相应的PCR引物和TaqMan探针,探针分别用FAM-BHQ1和HEX-BHQ1标记stx1及stx2,建立双重实时荧光PCR反应体系,并对方法的灵敏度、特异性及其重复性进行分析.结果 建立了EHEC双重实时荧光PCR检测方法.结果显示该方法特异性、重复性好、灵敏度高,低检出限可达102 cfu/ml,117.5 fg/μl.结论 建立的双重实时荧光PCR方法可快速、灵敏、特异、有效地检出EHEC.

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