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着床期小鼠子宫内膜有丝分裂原活化蛋白激酶的表达及LeY寡糖对其表达的调控
目的观察围着床期小鼠子宫内膜有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)的定位及表达变化, 探讨LeY寡糖对其表达的调控. 方法应用免疫组织化学、Western-blot方法,检测小鼠着床期(D1～D8)子宫内膜MAPK的两种亚型ERK1(p44 MAPK)和ERK2(p42 MAPK)的表达部位及水平;并通过点杂交方法,分析细胞表面的LeY寡糖被抗体阻断后,对培养的D4子宫内膜上皮细胞ERK1/2表达的影响. 结果免疫组织化学分析显示D2、3、4磷酸化活性ERK1/2分布于子宫内膜腔上皮和腺上皮, D4主要集中在腔上皮, 而D5、6则以蜕膜细胞表达强;Western-blot结果显示ERK1亚型表达水平高于ERK2,后者在围着床期的变化趋势较前者明显;LeY寡糖被抗体阻断后D4内膜上皮细胞ERKs的表达下降. 结论 MAPK在围着床期小鼠子宫内膜中有特异的定位和表达规律,其表达强度与子宫内膜的接受态及蜕膜化有关.LeY寡糖可能作为一种信息分子,对MAPK信号转导通路起调控作用.
关键词： 着床 子宫内膜 有丝分裂原活化蛋白激酶 LeY寡糖 信号转导 -
不同条件下小鼠围着床期子宫内膜整合素αv和Ley寡糖的表达
目的:探讨促排卵药、胚胎本身及孕后激素等条件对小鼠子宫内膜整合素αv和Le y寡糖的表达及对着床窗开放的影响.方法:将成年雌鼠分为对照和实验两大组.对照组为自然受孕;实验组为用促排卵药后受孕,其中一部分为假孕,另一部分为事先行一侧输卵管结扎.各组分别于孕2-7 d取子宫标本2份,一份石蜡包埋行HE染色和免疫组化染色测定Ley寡糖,另一份于-80℃保存,冰冻切片行免疫组化染色测定整合素αv结果:①对照组于孕7 d,大部分小鼠子宫外观即见明显胚胎着床,显微镜下从孕5 d起出现子宫内膜间质的蜕膜反应,但实验组无1例有此变化.②整合素αv在小鼠子宫内膜腺上皮细胞胞浆内表达.对照组的表达于孕4 d达高峰,而各实验组的表达高峰均推迟1-2 d,且表达水平较对照组明显减弱(P＜0.05).结扎侧和未结扎侧子宫内膜整合素αv的表达高峰无明显差异.③Ley寡糖在小鼠着床期表达于子宫内膜腔上皮和腺上皮表面,其表达两组间无明显差异,不同妊娠天数之间的表达亦无明显差异.在对照组,于孕4 d开始Ley寡糖在子宫内膜间质有表达,孕6 d达高峰,而实验组未见一定的规律.结论:①小鼠子宫内膜腺上皮细胞胞浆内整合素αv的表达与子宫内膜着床窗的开放一致.②促排卵药能抑制小鼠子宫内膜着床窗期整合素αv的表达,延迟着床窗的开放;孕后激素对着床窗期整合素αv表达的影响比胚胎本身更重要.③Ley寡糖在小鼠子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞表面的表达是小鼠胚泡着床所必需的,但其在子宫内膜间质的表达是否与内膜限制胚胎滋养层的过度生长有关,有待进一步研究证实.
