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胚泡表面LeY寡糖对小鼠胚泡纤维粘连蛋白、层粘连蛋白表达及分泌的影响
目的体外观察LeY寡糖对着床前小鼠胚泡细胞外基质(ECM)主要成分纤维粘连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)的表达和分泌的影响. 方法采用特异性单克隆抗体AH6阻断胚泡表面LeY寡糖,运用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹法检测LeY寡糖对着床前小鼠胚泡FN及LN的表达和分泌的影响. 结果在体外培养中,经AH6封闭胚泡表面LeY寡糖抗原后仅1.5 h,胚泡FN及LN的分泌有明显升高(P<0.01),并且持续6 h以上,而胚泡FN及LN的基因转录表达变化不明显(P>0.05). 结论胚泡表面的LeY寡糖抗原对着床前胚泡的FN及LN的分泌具有促进作用.
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单克隆抗体阻断LeY寡糖对小鼠胚泡细胞外基质与基质金属蛋白酶的影响
目的:探讨着床前阶段表达的LeY寡糖对小鼠胚泡细胞外基质(ECM)与基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响.方法:应用半定量RT-PCR及免疫印迹法观察体外培养的着床前表面LeY寡糖被封闭的胚泡ECM主要成分纤维粘连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)和其水解酶类MMP-2,MMP-9的表达和分泌水平的变化.结果:体外培养表面被封闭胚泡6 h,其FN及LN的分泌明显升高(P<0.01),但随着培养时间延长,其增高水平有下降趋势,而其基因的转录变化不明显.在同一时期内,胚泡MMP-2、MMP-9的分泌明显被抑制,其抑制程度随培养时间延长减弱,其基因表达也被抑制,与其分泌水平的变化趋势一致.结论:LeY寡糖抗原被封闭使MMPs的分泌和基因表达被抑制的同时,FN、LN的分泌增加,提示可能与LeY寡糖封闭引起MMPs的活性下降,使其底物FN、LN分解减少,从而引起含量增加有关.