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尪痹颗粒对RA-MsPGN大鼠肾组织PTK活性的影响
目的 探讨尪痹颗粒对RA-MsPGN大鼠模型肾组织PTK活性的影响,治疗RA-MsPGN的作用机制.方法 按照PhosphoSafeTM ExtRAction Reagent试剂盒提取蛋白质,按照K-LISA PTK Screening Kit试剂盒测定蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性,并根据检测试剂盒提供的标准品直线回归方程计算PTKs的含量.结果 RA-MsPGN模型大鼠与正常组相比肾组织PTK含量显著升高(P<0.001),雷公藤多苷片和旭痹颗粒各剂量组均能显著降低大鼠肾组织PTK含量(P<0.05或0.01).结论 尪痹颗粒对RA-MsPGN大鼠肾组织PTK活性有明显抑制作用,其治疗作用有可能是通过对PTK的作用而实现的.
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Abl-PTK酪氨酸激酶区基因的克隆与表达
目的克隆、表达出PTK重组蛋白,以鉴定酪氨酸激酶(PTK)的活性,筛选酪氨酸激酶的抑制剂.方法从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl-PTK使其连接到表达载体pGEX4T-2上,转化大肠杆菌DH5a,筛选鉴定出正确的转化子.转化菌株经IPTG诱导后进行表达并进行SDS-PAGE分析.结果经酶切和诱导表达鉴定,重组质粒 pGEX4T-2-PTK构建成功,并高效表达了58KD的GST-PTK融合蛋白.结论 PTK 基因被成功地重组至融合蛋白表达载体中,并在大肠杆菌中获得高效表达.该研究为进一步纯化、鉴定PTK的活性,筛选PTK的抑制剂奠定了基础.
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PTK重组质粒的构建与表达
目的构建并表达出PTK重组蛋白,以鉴定酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性,筛选酪氨酸激酶的抑制剂.方法从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl-PTK使其连接到表达载体pGEX4T-2上,转化大肠杆菌DH5a,筛选鉴定出正确的转化子.转化菌株经IPTG诱导后进行表达并进行SDS-PAGE分析.结果经酶切和诱导表达鉴定,重组质粒pGEX4T-2-PTK构建成功,并高效表达了58KD的GST-PTK融合蛋白.结论PTK基因被成功地重组至融合蛋白表达载体中,并在大肠杆菌中获得高效表达.该研究为进一步纯化、鉴定PTK的活性,筛选PTK的抑制剂奠定了基础.
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三羟异黄酮在儿童疾病中的研究进展
5,7,4'-三羟异黄酮(genistein,GEN)为一种常见的黄酮类化合物,是从大豆中提取的一种黄酮类有效成分,它是一种PTK的强效广谱抑制剂,在体内可能通过抑制PTK活性而产生抗肿瘤作用.