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  • Abl-PTK酪氨酸激酶区基因的克隆与表达

    作者:金玉霞;曲章义

    目的克隆、表达出PTK重组蛋白,以鉴定酪氨酸激酶(PTK)的活性,筛选酪氨酸激酶的抑制剂.方法从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl-PTK使其连接到表达载体pGEX4T-2上,转化大肠杆菌DH5a,筛选鉴定出正确的转化子.转化菌株经IPTG诱导后进行表达并进行SDS-PAGE分析.结果经酶切和诱导表达鉴定,重组质粒 pGEX4T-2-PTK构建成功,并高效表达了58KD的GST-PTK融合蛋白.结论 PTK 基因被成功地重组至融合蛋白表达载体中,并在大肠杆菌中获得高效表达.该研究为进一步纯化、鉴定PTK的活性,筛选PTK的抑制剂奠定了基础.

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