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人卵巢癌顺铂耐药细胞株 OVCAR-3/DDP 的建立及相关基因表达水平的研究
目的：建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株 OVCAR-3/DDP,初步探讨其耐药机制。方法采用顺铂(DDP)浓度梯度递增诱导法,建立人卵巢癌 OVCAR-3细胞株的顺铂耐药细胞株 OVCAR-3/DDP；通过细胞计数和 MTT 法评估细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期情况,以评价 OVCAR-3/DDP 的生物学特性；采用 RT-PCR 法检测 Mfn2、EGFR 及 MMP2 mRNA 水平。结果成功建立了 OVCAR-3/DDP 顺铂耐药细胞株,其对 DDP 耐药指数是1.92；与亲本细胞株 OVCAR-3相比,OVCAR-3/DDP 生长速度减慢,倍增期是 OVCAR-3细胞的1.36倍(P <0.05)；流式细胞术检测结果显示细胞主要停滞于G2/M 期(P <0.05)；与 OVCAR-3细胞相比,OVCAR-3/DDP 细胞中 Mfn2、EGFR 及 MMP2 mRNA水平均明显升高(P <0.05)。结论建立的 OVCAR-3/DDP 细胞株对顺铂耐药性稳定；OVCAR-3/DDP 细胞对顺铂耐药可能与 Mfn2、EGFR、MMP2基因转录水平上调有关。
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新疆维吾尔族肺腺癌患者表皮生长因子受体基因的多态性研究
目的：研究维吾尔族肺腺癌患者表皮生长因子受体（EGFR）的突变特征。方法选择维、汉民族临床肺腺癌患者181例（维吾尔族76例，汉族105例），记录每位患者的临床特征。留取手术或穿刺组织的石蜡标本，采用 ARMs 法检测肿瘤组织 EGFR 基因18～21外显子突变，比较维、汉两族患者 EGFR 基因突变率，并分析 EGFR 突变与临床特征的关系。结果所有患者总 EGFR 突变率为32．6％，其中维吾尔族突变率为15．8％，汉族为45．7％，2组突变率比较差异显著，且突变均以19号外显子缺失突变及21号外显子 L858R 为主，维吾尔族19号外显子缺失突变更为多见。汉族患者 EGFR 基因突变与性别、吸烟史、肿瘤分化程度有关，而维吾尔族患者 EGFR 基因突变与吸烟史有关，与其他因素关系不确定。结论新疆地区维吾尔族患者 EGFR 基因突变率较同地域内的汉族患者低，19号外显子敏感突变更为常见。
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高分辨率熔解曲线分析技术检测 EGFR 基因突变方法的建立及其初步临床应用
目的：建立高分辨率熔解曲线（high resolution melting，HRM）分析技术检测表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）基因突变的方法，并探讨其的临床应用价值。方法建立HRM 技术检测 EGFR 基因突变方法，并用其检测200例非小细胞肺癌患者肿瘤石蜡包埋标本，并与测序法的结果进行比较。结果所建 HRM 检测方法 Tm 与 ct 值的 CV 值均较小，重复性好。HRM 法检测标本 EGFR 基因突变的结果与测序法相比，突变总检出率分别为40.0%和37.0%，敏感性为100%，特异性﹥95%。结论 HRM 法检测 EGFR 基因突变，敏感性高，特异性强，重复性好，操作简便，节约时间，成本低，适用于临床。
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盐酸埃克替尼治疗体力状况较差 EGFR 基因状态不明肺腺癌的临床疗效
目的：评价埃克替尼治疗 EGFR 基因状态不明体力状况较差晚期肺腺癌患者的疗效及安全性。方法分析2012年8月至2014年8月在重庆市肿瘤研究所就诊的27例美国东部肿瘤协作组-体力状况（ECOG-PS）评分大于或等于2分的晚期EGFR 基因状态不明肺腺癌患者，口服盐酸埃克替尼125 mg ，3次／d ，评价近期疗效和不良反应，计算生存率。结果27例患者，客观缓解率（ORR）为29．6％，疾病控制率（DCR）为81．5％，中位无进展生存期（PFS）6个月。 ECOG-PS 评分得到改善的比例为70．4％，治疗前、后比较差异有统计学意义（Z＝-2．157，P＝0．031）。毒性反应主要为Ⅰ～Ⅱ度的皮疹、乏力、纳差及腹泻。结论埃克替尼治疗 ECOG-PS ≥2分、EGFR 基因状态不明的晚期肺腺癌患者，不良反应未明显增加，耐受性良好，患者可以从埃克替尼的治疗中明显获益。
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竞争性等位基因特异性荧光探针聚合酶链法检测肺腺癌组织 EGFR 基因突变
目的：探讨竞争性等位基因特异性荧光探针聚合酶链（castPCR）法检测初治肺腺癌组织表皮生长因子受体（EGFR）基因突变的应用价值，及 EGFR 突变状态与患者临床生物学行为的相关性。方法：收集2010年10月至2014年12月南京鼓楼医院103例初治肺腺癌组织标本及患者的临床病理资料。使用 castPCR 法检测 EGFR 基因突变（外显子19 del 2235-2249和 del 2236-2250、外显子20 T790M、外显子21 L858R）。结果：103例肺腺癌患者肿瘤组织中共有54例检出了存在至少一个位点的 EGFR 基因突变（突变率52.43%），其中敏感突变（外显子19和/或外显子21）45人（43.69%），外显子20突变11人（10.68%）。同时发现部分患者存在敏感突变与敏感突变、敏感突变与耐药突变共存的现象，其中外显子19和20共突变2人，外显子19和21共突变4人，外显子20和21共突变1人。结论：通过对103例肺腺癌患者肿瘤组织 EGFR 基因突变状态的检测，初步论证了 castPCR 法在肺癌 EGFR 驱动突变检测方面的临床可行性。
