首页 > 文献资料
-
Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路在 猪心肺复苏后心肌功能障碍中的作用
目的：探讨Toll样受体4/核转录因子-κB（TLR4/NF-κB）信号通路在心搏骤停-心肺复苏（CA-CPR）猪心肌功能障碍中的作用。方法按照随机数字表法将26只猪分为假手术组（Sham，n＝6）、CA-CPR12h组（n＝10）和CA-CPR24h组（n＝10）。采用心内膜电刺激方法致颤，8min后给予CPR；Sham组仅进行麻醉、气管插管。观察各组动物复苏前后平均动脉压（MAP）、心排血量（CO）等血流动力学变化及心肌细胞形态学及超微结构改变；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）含量；采用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测心肌细胞TLR4/NF-κB蛋白表达；采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测心肌细胞TLR4/NF-κBmRNA表达。结果 CA-CPR组猪血流动力学紊乱，心肌细胞严重损伤。与Sham组比较，CA-CPR12h和24h组猪自主循环恢复（ROSC）0.5h血清TNF-α明显升高（pg/L：62.49±6.66、48.39±2.37比10.75±0.74，均P＜0.05），2h达高峰（pg/L：70.93±5.51、66.03±2.60比10.87±0.91，均P＜0.05）后逐渐下降；ROSC0.5h血清IL-6显著高于Sham组（pg/L：14.42±1.99、11.23±1.12比8.75±0.74，均P＜0.05），12h达高峰（pg/L：36.50±2.91、38.15±1.26比8.88±0.62，均P＜0.05）后逐渐下降。CA-CPR12h和24h组猪心肌细胞TLR4和NF-κB的蛋白表达较Sham组明显增加〔TLR4蛋白（灰度值）：0.11±0.03、0.24±0.05比0.05±0.02，NF-κB蛋白（灰度值）：0.27±0.04、0.24±0.03比0.09±0.02，均P＜0.05〕，TLR4mRNA表达分别为Sham组的（9.93±1.07）倍和（9.21±1.27）倍，NF-κBmRNA表达分别为Sham组的（4.44±0.96）倍和（6.09±0.81）倍（均P＜0.01）。结论 TLR4/NF-κB信号通路的激活可能是CA-CPR后心肌功能障碍的病理机制之一。
-
吡格列酮通过下调Toll样受体/核因子-κB信号通路对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用
目的 研究过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ激动剂吡格列酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织中Toll样受体(TLR)4和核转录因子(NF)-κB及对血清中白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响,探讨吡格列酮对脑组织损伤的保护作用和机制.方法 用线栓法制备大鼠中动脉脑缺血再灌注模型.随机将60只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、生理盐水干预组、吡格列酮(15 mg/kg)治疗组.脑缺血再灌注24 h后,采用神经功能缺损评分法,观察大鼠的行为学评分;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色试验测定脑梗死体积;酶联免疫吸附(ELASA)技术测定血清中IL-6和TNF-α含量;免疫组化技术测定脑组织TLR4和NF-κB蛋白表达;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定脑组织TLR4和NF-κB mRNA表达.结果 与生理盐水干预组相比,吡格列酮治疗组神经功能评分显著降低(P<0.05),脑梗死体积显著减少(P<0.05),血清中IL-6和TNF-α含量显著降低(P<0.05),脑组织中TLR4和NF-κB 蛋白和mRNA表达显著下调(P<0.05).结论 吡格列酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,作用机制可能与其下调TLR4/NF-κB信号转导通路并降低血中炎症反应相关因子IL-6和TNF-α的含量有关.
-
Toll样受体4/核转录因子-κB信号转导通路介导趋化素样因子-1在骨代谢过程中的影响
目的 观察趋化素样因子-1(CKLF-1)对骨代谢过程的影响,探讨Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号转导通路在此过程中的作用机制.方法 将C57BL/6小鼠骨髓内单个核细胞培养,给予不同浓度的趋化素样因子-1进行诱导后随机分组,分别运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测各组细胞TLR4、骨保护素(OPG)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、核因子κB抑制蛋白-α抗体(IκB-α)的表达;用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定培养的细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)的表达,比较各组指标表达变化.结果 与正常对照组相比,CKLF-1可随着浓度(I×10-、1×10-6和1×10-5 mol/L)升高,上调TLR4 mRNA的表达水平(P＜0.05),且CKIF-1不同浓度组之间相互比较,TLR4 mRNA的表达水平均差异有统计学意义(P＜0.05),浓度为1×10-5 mol/L的CKLF-1组上调幅度为显著;经不同浓度CKLF-1诱导后,增加ICAM-1蛋白表达水平分别为112.50±10.01、173.60 ± 15.82及191.90±20.23(P＜0.05);下调IκB-α蛋白表达水平分别为0.68±0.05、0.59±0.05及0.51 ±0.05(P ＜0.05);下调OPG的蛋白表达水平分别为0.88±0.07、0.75±0.07及0.63 ±0.07(P ＜0.05);升高IL-6表达水平分别为(3.73±0.35) ng/L、(4.32±0.40)及(6.51 ±0.40) ng/L(P ＜0.05);且CKLF-1不同浓度组之间相互比较,ICAM-1、IL-6、IκB-α和OPG的表达水平差异有统计学意义(P＜0.05),当CKLF-1浓度为1×10-5 mol/L时效果为明显.结论 CKLF-1可调节TLR4mRNA、ICAM-1、OPG、IκB-α的蛋白表达和IL-6的表达,其对骨代谢的影响可能与促炎反应和激活TLR4/NF-κB信号转导通路相关.
