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抗心肌肌凝蛋白重链自身抗体IgG亚类与腹主动脉缩窄、冠状动脉结扎术后大鼠慢性心力衰竭的关系
目的 研究抗心肌肌凝蛋白重链自身抗体(AMHCA)IgG亚类的产生与腹主动脉缩窄(AAC)、冠状动脉结扎(LCL)术后大鼠慢性心力衰竭(CHF)之间的关系.方法 应用AAC术与LCL术建立两种CHF大鼠模型,以合成的大鼠心肌肌凝蛋白重链部分肽段(1135-1150位氨基酸残基)为合成肽抗原,采用间接ELISA方法检测大鼠血清中AMHCA IgG亚类的水平及动态变化.结果 两组模型大鼠手术处理后1-2周AMHCA IgG1、IgG2a和IgG2b亚类阳性率较手术完成时均增高(P＜0.05).两组大鼠模型术后1～2周IgG1、IgG2a和IgG2b自身抗体阳性率和抗体滴度开始增高,3～4周达峰值,5～6周后缓慢下降.结论 AAC和LCL组大鼠模型在CHF的发生、发展过程中均有AMHCA IgG亚类的产生,并呈产生、维持、衰减的动态变化.
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抗心肌肌凝蛋白重链自身抗体IgG亚类对腹主动脉缩窄术后大鼠左室功能的影响
[目的]探讨抗心肌肌凝蛋白重链自身抗体(AMCHA) IgG亚类的产生与腹主动脉缩窄术后大鼠左室功能的关系.[方法]应用腹主动脉缩窄术建立慢性心力衰竭(CHF)大鼠模型,测定血流动力学变化,计算左心室重量/体重(LVW/BW)比值;以合成的大鼠心肌肌凝蛋白重链部分肽段(1135-1150 氨基酸残基)为包被抗原,采用间接 ELISA 方法检测大鼠血清中心肌肌凝蛋白重链自身抗体 (MCHA)IgG 亚类的水平及动态变化.[结果]CHF大鼠手术组与假手术组相比左室压力上升和下降大速率降低(+dp/dtmax :2103.91±606.89 vs 3196.64±383.29 ;-dp/dtmax :-1709.60±460.96 vs -2762.64±514.42,P<0.01),左室舒张末压升高(LVEDP:17.49±8.33 vs -5.69±1.19,P<0.01)、左室收缩压升高(LVSP:131.67±25.14 vs 111.98±4.63,P<0.05)、左心室重量/体重比值升高(LVW/BW:3.04±0.44 vs 2.57±0.20,P<0.01),术后1～2周, IgG1、IgG2a和IgG2b自身抗体阳性率和抗体滴度开始增高,3～4周达峰值,5～6周后缓慢下降.[结论]腹主动脉缩窄术所致的压力超负荷型大鼠CHF模型,在CHF的发生、发展过程中有AMHCA IgG亚类的产生并呈产生、维持、衰减的动态变化; AMHCA 的产生不单纯是 CHF 的伴随现象,可能参与了CHF 的病理生理过程.
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人IL-2信号肽和大鼠心肌肌凝蛋白α重链片段融合基因的构建及分泌表达
目的:克隆编码大鼠心肌肌凝蛋白α重链aa736～960的cDNA片段,构建携带融合基因的逆转录病毒分泌表达载体.方法:以RT-PCR方法从幼龄大鼠心肌组织中扩增出681 bp的目的基因,与hIL-2cDNA序列拼接,构建融合基因hIL-2/myosin及其逆转录病毒载体.采用脂质体法转染NIH3T3和PA317细胞,经G418筛选后,用RT-PCR、免疫组化、免疫电镜和Dot-blot法分析检测融合基因的表达.结果:核苷酸序列测定显示克隆基因的核苷酸及推导的氨基酸序列与报告序列一致,开放阅读框正确;RT-PCR检测提示转染细胞有融合基因mRNA转录;免疫组化、免疫电镜和Dot-blot检测表明转染细胞有该肌凝蛋白重链片段的分泌表达.结论:大鼠心肌肌凝蛋白a重链基因逆转录病毒载体构建成功,并可分泌表达,为心肌肌凝蛋白转基因诱导机体特异性免疫耐受及对心肌免疫损伤的研究打下了基础.
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大鼠心肌肌凝蛋白α重链基因逆转录病毒载体的构建
目的：克隆编码大鼠 心肌肌凝蛋白α重链aa736～960的cDNA片段，构建携带huIL-2/myosin融合基因的逆转录病 毒载体。方法：以RT-PCR方法从幼龄大鼠心 肌组织中扩增出681 bp的目的基因，与huIL-2 cDNA序列拼接，构建融合基因huIL-2/myos in及其逆转录病毒载体。采用脂质体法转染NIH3T3细胞，经G418筛选后，用RT-PCR和免疫 组化法分析重组逆转录病毒的表达。结果：核苷酸序列测定显示 ，克隆基因的核苷酸及推导的氨基酸序列与报告序列一致，开放阅读框正确；逆转录病毒载 体pLNC-huIL-2-myosin酶切结果与预期一致。RT-PCR检测提示转染细胞有pLNC-huIL- 2-myosin mRNA转录；免疫组化分析表明转染细胞胞质内有大量肌凝蛋白表达。 结论：大鼠心肌肌凝蛋白α重链基因逆转录病毒载体构建成功，并可在NIH3T 3细胞中表达，为心肌肌凝蛋白基因转移诱导机体特异性免疫耐受对心肌免疫损伤的防治研 究打下了基础。
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抗心肌肌凝蛋白重链自身抗体IgG亚类与慢性心力衰竭的关系
目的 研究抗心肌肌凝蛋白重链自身抗体 IgG亚类的产生与心力衰竭之间的关系.方法 应用腹主动脉缩窄术与左冠状动脉结扎术建立两种慢性心力衰竭大鼠模型,测定血流动力学变化;以合成的大鼠心肌肌凝蛋白重链部分肽段(第1 135～1 150位氨基酸残基)为包被抗原,采用间接 ELISA 方法检测大鼠血清中心肌肌凝蛋白重链自身抗体 IgG 亚类的水平及动态变化.结果 (1)自身抗体IgG1、IgG2a和IgG2b亚类均呈阳性之大鼠(PPP组)收缩和舒张功能(LVSP,LDP,+dp/dt+max,-dp/dt max)显著低于自身抗体IgG1、IgG2a和IgG2b亚类均呈阴性之大鼠(NNN组),P＜0.01或P＜0.05;(2)PPP组,其±dp/dtmax显著低于自身抗体IgG1阴性、IgG2a和IgG2b阳性之大鼠(NPP组),P＜0.01;(3)自身抗体IgG1和IgG2a 阳性、IgG2b阴性之大鼠(PPN组),其±dp/dtmax显著低于NNN组,P＜0.01;(4)PPN组,其±dp/dtmax显著低于NPP组,P＜0.01.结论 腹主动脉缩窄术所致的压力超负荷型大鼠CHF模型和左冠脉结扎术所致的低心输出量型大鼠CHF 模型,在CHF的发生、发展过程中均有AMHCA IgG亚类的产生;AMHCA 的产生不单纯是 CHF 的伴随现象,可能参与了CHF 的病理生理过程.
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抗心肌肌凝蛋白重链自身抗体IgG亚类对左冠状动脉结扎术后左室功能的影响
2.61±0.11,(P＜0.05)],术后1～2周,IgG1、IgG2a和IgG2b自身抗体阳性率和抗体滴度开始增高,3～4周达峰值,5～6周后缓慢下降.结论:左冠脉结扎术所致的低心输出量型大鼠CHF模型中,AMHCAIgG亚类呈现动态变化规律;AMHCA可能参与了CHF的病理生理过程.
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心房型心肌肌凝蛋白轻链1在胎儿心肌和成人梗死心肌中的表达
心肌梗死后左心室重构过程中心室肌凝蛋白轻链1(ALC1)构型的转变受到密切关注[1].有研究发现成人过载心肌中心房型ALC1表达增多[5],而对胎儿心室肌及梗死后成人心室肌ALC1表达规律和特点的研究较少.本实验旨在探讨胎儿心脏发育过程中心室肌ALC1表达规律和成人心梗后心室肌ALC1表达特点.
