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D-半乳糖致衰老模型大鼠的学习记忆和行为学观察及中药干预作用
目的 观察D-半乳糖致衰老模型大鼠学习记忆能力和行为学情况,并探讨中药的干预作用.方法 大鼠每日一次颈背部皮下注射5%D-半乳糖100 mg/kg.诱导大鼠衰老模型,连续7周,观察衰老模型大鼠的自主活动次数、空间记忆能力、主动回避遭受电击能力、探究活动等行为学表现和学习记忆能力,并用抗衰老片与首乌延寿片进行干预,观察中药的干预作用.结果 皮下注射D-半乳糖造模后,衰老模型大鼠自主活动次数显著减少(P<0.05,P<0.01),水迷宫试验探索路径长度和搜台潜伏期显著延长(P<0.05,P<0.01),旷场试验移动路程长度和直立次数显著减少(P<0.01),穿梭回避试验平均潜伏期、进入错误区时间显著增加(P<0.05,P<0.01).给予抗衰老片与首乌延寿片干预后,衰老大鼠的自主活动次数显著增加(P<0.01),水迷宫试验探索路径长度和搜台潜伏期显著缩短(P<0.01),旷场试验移动路程长度和直立次数显著增加(P<0.01),穿梭回避试验平均潜伏期、进入错误区时间显著减少(P<0.05,P<0.01).结论 D-半乳糖致衰老模型大鼠的自主活动次数减少,对新环境探索能力下降,学习记忆力下降;抗衰老片与首乌延寿片等中药可有效增强衰老模型大鼠的行为活动,提高衰老模型大鼠的学习记忆能力.
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亚健康状态大鼠的神经-免疫-内分泌机制的研究
目的 探讨亚健康状态大鼠的神经-免疫-内分泌的机制.方法 取雄性SPF级Wistar大鼠36只,按体重随机分成6组,即多因素组(MF)、多因素干预组(MFT)、热水游泳组(WS)、睡眠不足组(SD)、单纯束缚组(PC)和正常对照组(C),每组6只.分别采用热水游泳、饮食限制、睡眠剥夺、束缚等方式建立亚健康大鼠模型,多因素干预组每日经口给予300 mg/kg的抗衰老片,在造模5d后处理动物,并取大鼠血,分别测定血清5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、甲状腺激素T3和T4、睾酮(T)、皮质酮(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、白介素IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8和IFN-γ含量以及T淋巴细胞亚群的变化,并取脾脏测定T、B淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性变化.结果 (1)与正常对照组比,①造模结束后多因素组大鼠血清5 -HT明显降低(P＜0.05),而热水游泳组和单纯束缚组5-HT含量却升高显著(P＜0.01),且睡眠不足组和单纯束缚组血清DA含量降低显著(P＜0.05)；同时各亚健康模型大鼠的血清T3、T4、CORT和ACTH含量均显著升高(P＜0.01),T/C比值降低显著(P＜0.01),且睡眠不足组血清T降低明显(P＜0.05)；②造模结束后多因素组的大鼠IL-8含量降低显著(P＜0.01),而热水游泳组和单纯束缚组IL-1 β、IL-2、IL-6、IL-8和IFN-γ含量以及睡眠不足组IL-1β、IL-2、IL-6含量均显著升高(P ＜0.05,P＜0.01),同时显著降低各亚健康模型大鼠淋巴细胞增殖转化能力和T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值和NK细胞活性(P＜0.05,P＜0.01).(2)与多因素组比,抗衰老片干预后多因素干预组大鼠血清DA含量明显升高(P＜0.05),并能显著提高机体T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+数目和CD4+/CD8+比值(P＜0.01),降低血清CORT含量.结论 亚健康状态能引起大鼠HPA轴反应性失衡,皮质醇释放过度,引起内分泌的紊乱,并能引起淋巴细胞功能降低,出现明显机体免疫抑制现象；而抗衰老片具有抗应激,提高T细胞免疫功能,改善情绪和内分泌紊乱的作用,从而达到改善亚健康体质的目的.
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抗衰老片对肾虚小鼠空间学习记忆和脑自由基代谢的影响
目的 观察抗衰老片对肾虚小鼠空间学习记忆和脑自由基代谢的影响.方法 选雄性KM小鼠54只,随机分为6组:正常对照组、肾虚组(劳倦过度+房事不节组)、抗衰老片高、中、低剂量组和补肾方(金匮肾气丸)对照组.采用强迫小鼠游泳方法造成劳倦过度,以Colldege效应诱导雄性小鼠房事不节,建立肾虚小鼠模型,观察小鼠体重、水迷宫空间行为记忆能力和脑组织SOD活性和MDA含量变化.结果 肾虚组小鼠体重、脑组织SOD活性较正常对照组明显下降(P＜0.05,P＜0.01),小鼠水迷宫潜伏期和脑组织MDA含量明显升高(P＜0.01)；抗衰老片高、中、低剂量组及金匮肾气丸组小鼠体重和脑组织SOD活性较肾虚组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),小鼠水迷宫潜伏期和脑组织MDA含量较肾虚组明显降低(P＜0.05,P＜0.01).结论 抗衰老片可延缓脑组织的脂质过氧化,从而改善小鼠的记忆能力.
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心率变异性分析评估不同因素致亚健康大鼠自主神经功能的影响
目的 基于心率变异性(heart rate variability,HRV)分析评估不同因素致亚健康大鼠自主神经功能的影响,确定HRV指标与亚健康状态的发生关系.方法 将42只雄性SPF级Wistar大鼠,按体质量随机分成7组,即多因素组、多因素干预组、热水游泳组、饮食限制组、睡眠不足组、单纯束缚组和正常对照组,每组6只,通过热水游泳、饮食限制、睡眠剥夺、束缚等方式建立亚健康大鼠模型,多因素干预组给予300 mg/kg的抗衰老片浸膏粉,并分别在造模结束后及恢复3d时遥测大鼠的心电图,利用HRV分析评估不同因素致亚健康大鼠自主神经功能情况.结果 与正常对照组比,时域分析显示亚健康大鼠的SDNN、RMSDD、STV、LTV均有所升高,且频谱分析显示亚健康大鼠VLF、LF、TP、LF/HF、LFnu上升和HFnu下降,且给予抗衰老片后能明显降低LF、LF/HF和LFnu(P＜0.05)和显著升高HFnu(P＜0.05),单因素logistic回归分析显示RRI、SDNN、LTV、LF、TP、LF/HF、LFnu、HFnu与亚健康产生密切相关(P＜0.05),且经逐步logistic 回归分析结果显示低下的HFnu(OR值=0.566,P=0.023)可作为评价亚健康产生的独立危险因子.结论 不同因素致亚健康大鼠的自主神经功能均出现明显的紊乱,且迷走神经活动抑制是亚健康产生的独立危险因素,可见基于HRV分析技术可无创性的客观评估机体亚健康状态的程度.
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睡眠剥夺对大鼠抗氧化应激的影响及中药的干预作用
[目的]观察睡眠剥夺对大鼠饮食行为、能量消耗、体温和杭氧化能力的影响,探讨中药的干预作用及其抗氧化应激的机制.[方法]将雌性SD大鼠32只随机分为4组,即正常对照组、模型对照组、抗衰老片组、六味地黄丸组,每组8只,利用"小平台水环境法"建立大鼠睡眠剥夺模型,分别进行体温、体重、进食量和饮水量的监测,并计算日能耗,同时检测机体血清SOD活性和MDA含量.[结果]72h睡眠剥夺后,模型对照组大鼠体重、进食量和饮水量均明显低于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01),日消耗能量和体温明显高于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01),且机体血清SOD活性明显降低(P＜0.01),MDA含量明显升高(P＜0.01);进行抗衰老片和六味地黄丸干预后,均能有效预防睡眠剥夺后大鼠的体重、进食量、饮水量的降低,并能降低日消耗能量和体温,显著提高机体SOD活性(P＜0.05,p＜0.01),降低MDA含量(P＜0.05,P＜0.01).[结论]睡眠剥夺可引起大鼠饮食行为的改变、耗能增加、体温升高,抗氧化应激能力下降.而抗衰老片和六味地黄丸等中药具有抗睡眠剥夺引起的氧化应激的作用,其机制可能与提高机体的抗氧化能力有关.
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抗衰老片对衰老大鼠学习记忆和自由基代谢的影响
[目的]观察抗衰老片对衰老大鼠学习记忆和脑自由基代谢的影响.[方法]取健康Wistar大鼠72只随机分为空白对照组、模型对照组、抗衰老片高、中、低剂量组、六味地黄丸组和首乌延寿片组.采用皮下注射D-半乳糖100mg/kg,连续造模49天,建立大鼠衰老模型,各给药组在造模同时给予相应的药物,观察大鼠一般情况和体重变化,用水迷宫测试空间行为记忆能力,并测定脑组织自由基代谢SOD、MDA、GSH-Px、Na+-K+-ATPase、Ca++-Mg++-ATPase、NO和TChE的变化.[结果]与空白对照组比,模型对照组体重增长率下降(P<0.01),脑组织中SOD、Na+-K+-ATPase、Ca++-Mg+-ATPase和GSH-Px活力下降,MDA、NO和TChE均明显升高,水迷宫实验中探索路径和搜台潜伏期显著增加.给予不同剂量的抗衰老片、六味地黄丸和首乌延寿片后,能显著提高衰老大鼠体重的增长率,提高脑组织中SOD、Na+-K+-ATPase、Ca++-Mg++-ATPase和GSH-Px活力,显著降低MDA、NO含量和TChE活性,缩短衰老大鼠在水迷宫实验的探索路径和搜台潜伏期.[结论]抗衰老片可改善衰老大鼠的学习记忆能力,增强记忆的功能,延缓自由基造成脑组织的脂质过氧化,抗衰老的作用机制可能与抑制体内脂质过氧化过程有关.
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抗衰老片对实验性肾阳虚小鼠免疫功能的影响
目的 观察抗衰老片对"劳倦过度、房事不节"诱发的肾阳虚小鼠模型免疫功能的影响.方法 筛选健康雄性KM小鼠54只,随机分为正常对照组,模型对照组,抗衰老片高、中、低剂量组和金匮肾气丸组6组.采用强迫小鼠游泳方法造成劳倦过度,以Colldege效应诱导雄性小鼠房事不节,建立肾阳虚小鼠模型,观察各组胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性等免疫指标的变化.结果 模型对照组小鼠胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性等指标较正常对照组显著降低(P<0.05或P<0.01);抗衰老片高剂量组小鼠的胸腺指数和脾脏指数显著升高(P<0.05或P<0.01),中、低剂量组小鼠的胸腺指数显著升高(P<0.01),脾脏指数仅有升高趋势,但差异无统计意义(P>0.05);抗衰老片高、中剂量组T、B淋巴细胞SI和NK细胞活性显著升高(P<0.05或P<0.01),抗衰老片低剂量组和金匮肾气丸组NK细胞活性显著升高(P<0.05).结论 抗衰老片能明显提高肾阳虚小鼠的免疫功能,进一步表明中医肾在免疫调节中的主导作用.
